苗藥馬桑狗幫急性毒性及其油劑安全性研究△

張 遜 田振華 杜 江

(貴陽中醫學院苗藥教研室，貴州 貴陽 550002)

苗藥馬桑狗幫為虎耳草科落新婦屬植物落新婦Astilbe chinensis(Maxim.)Franch.et Sav.Saxiffagaceae 的根莖，落新婦又名小升麻、紅升麻、金毛三七、馬尾參，臨床上主要用于治療風熱感冒、咳嗽等疾病。苗醫對馬桑狗幫的使用別有特點，著重于在祛風、消腫、止痛方面，用以治療跌打損傷，筋骨疼痛、風濕病、腰腿痛等，有打藥之稱。桑狗幫在黔東南的黎平一帶有一種特殊用法，是將馬桑狗幫制成刮痧油配合刮痧的療法使用，對治療風濕病、腰腿痛、頸椎病、美尼爾氏綜合征效果突出，廣泛受到歡迎。為了繼承弘揚民族醫藥文化，彰顯苗醫特色療法的臨床效果并造福社會，該療法現已被引進至貴陽市三甲醫院使用，憑借其良好的療效，吸引了眾多患者。但是，要作為一種正規的的治療方法，通過現代藥效和毒理實驗研究證明其安全、有效是不可或缺的基礎工作，本實驗旨在對馬桑狗幫藥材的毒性及其刮痧油(以下簡稱馬桑狗幫油)的安全性進行試驗研究，為該藥的臨床用藥提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物：昆明種小鼠40只，雌雄各半，體重18～22g［合格證號：SCXK(渝)2007－0006］。新西蘭兔6只，體重2500～3500g［合格證號：SCXK(渝)2007－0006］，豚鼠30只，雌雄各半，體重250、350g［合格證號：SCXK(渝)2007－0006］，均由重慶騰鑫生物技術有限公司提供。

1.1.2 藥品及主要試劑：馬桑狗幫油劑由我院苗醫藥教研室提供。馬桑狗幫醇提物系馬桑狗幫用70%乙醇回流提取2次，每次2h，合并濾液。濾液經回收乙醇后濃縮至8g原生藥/ml備用。1%2，4－二硝基氯苯(自配)。

1.1.3 儀器設備：LSY型電熱恒溫水浴鍋(北京醫療設備廠)，ZY 10型嬰兒秤(國營無錫衡器廠)。

1.2 實驗方法

1.2.1 急性毒性試驗［1］：體重18 ～22g小鼠20 只，隨機分為四組，每組5只。取馬桑狗幫醇提物按1g/ml、2g/ml、4g/ml、8g/ml4個濃度分別對小鼠進行灌胃給藥，1日3次。給藥過后密切觀察小鼠反應，連續觀察1周并記錄小鼠中毒反應及死亡情況。因在4個濃度范圍均內未見小鼠中毒、死亡情況，另取體重18～22g小鼠20只，按8g/ml濃度的馬桑狗幫醇提物對小鼠進行灌胃給藥，1日3次，以確定最大耐受量。

1.2.2 皮膚刺激性試驗［2］：取健康家兔 6只，給藥前 24h在家兔背部兩側分別刮毛，大小約3cm×3cm。給藥前在背部刮毛處用針頭劃至滲血狀，將馬桑狗幫藥油劑約2ml均勻涂抹在左側，右側均勻涂抹茶油0.2ml作為對照。給藥過后，用棉花、保鮮膜、紗布分別蓋住給藥部位，用無刺激性膠帶固定，約6小時后拆除，用溫水洗凈，觀察30min。于24h、48h、72h重復觀察并記錄家兔皮膚反應情況。

1.2.3 皮膚致敏性試驗［3］：取健康豚鼠 30 只，按體重性別隨機分為3個組，每組10只，給藥前24h將豚鼠背部左側去毛(大小3cm×3cm)，第1組作為給藥組，將馬桑狗幫油劑均勻涂抹在去毛部位，第2組作為陽性組，用1%2，4－二硝基氯苯同上法給藥，第3組作為陰性組，使用茶油同上法給藥。給藥后用棉花、保鮮膜、紗布疊放在涂藥部位，用無刺激性膠布固定，約6h后拆開，溫水清洗給藥部位，擦干并進行觀察，于第7d、14d重復操作。第27天各組豚鼠背部右側去毛(大小3cm×3cm)，于第28d陽性組用0.1%2，4－二硝基氯苯代替1%2，4－二硝基氯苯，各組在脫毛部位(右側)重復上述給藥方法，對豚鼠進行激發接觸，分別在第24h、48h、72h觀察皮膚反應情況并且按標準評分和計算反應平均值與致敏發生率，同時密切觀察動物是否有哮喘，站立不穩或休克等嚴重全身性過敏反應。

2 試驗結果

2.1 急性毒性試驗：用8g/ml馬桑狗幫醇提液灌胃給藥，第1、2次給藥后小鼠一切活動情況正常，末次給藥后極少數小鼠稍有不適，集聚成團，活動減弱，約1h后逐漸恢復，1周之內沒有出現小鼠死亡。由于8g/ml醇提液已經很粘稠，且該濃度已經很大，可作為最大給藥濃度，故馬桑狗幫醇提物小鼠的最大耐受量為480g/kg。

2.2 皮膚刺激性試驗：馬桑狗幫油劑給藥后對照面和受試面均未出現紅斑、水腫等刺激反應，亦無其他異常情況，平均積分值為0分，說明馬桑狗幫油劑對家兔皮膚無明顯的刺激性。詳見表1。

表1 皮膚刺激性反應評價表

2.3 皮膚致敏性試驗：陽性對照藥2，4－二硝基氯苯引發豚鼠皮膚出現典型的紅斑、水腫等過敏反應，在0～48小時之內致敏發生率為100%，陰性組未出現致敏反應，馬桑狗幫油劑未引起豚鼠紅斑、水腫反應，亦未引起哮喘、休克等全身過敏反應，致敏發生率為0，表明其對皮膚無致敏性。詳見表2。

表2 致敏反應評價表

3 討論

3.1 急性毒性實驗采用醇提液灌胃給藥，因為馬桑狗幫刮痧油是以茶油作為溶劑，不利于灌胃，其大多數有效成分為脂溶性成分，故以醇提物進行給藥。

3.2 LD50是衡量藥物的急性毒性大小的重要指標，更是是評價藥物優劣的重要參數。本實驗小鼠最大耐受量為480g/kg，相當于480倍成人劑量，根據中藥毒性的分級標準［4］可以確定為實際無毒。皮膚試驗結果顯示，馬桑狗幫油劑對家兔皮膚無明顯的刺激性;對豚鼠無致敏性，臨床使用安全。

3.3 本實驗是對對苗醫藥特色療法進行現代研究，旨在對該方法中藥物的安全性提供科學依據，對指導臨床用藥，進一步對該治療方法的規范化和標準化的研究打下良好的基礎。

［1］劉冬戀，馬松濤，曾仁勇，等.肉桂揮發油對小鼠的半數致死量測定［J］.西南國防醫藥，2010，20(5)：482.

［2］徐淑云，卞如濂，陳修.藥理學實驗方法［M］.3版.北京：人民衛生出版社，2001：1861－1862.

［3］曾慶文，張景春.氯諾昔康在臨床上的應用進展［J］.中華中西醫學雜志，2008，6(2)：62－63.

［4］夏麗英.現代中藥毒理學［M］.天津：天津科技翻譯出版公司，2005：10.