慢性腹瀉患者菌源分析

【摘要】 目的：通過對慢性腹瀉患者的糞便進行涂片和細菌培養，檢查細菌的種類、數量和所占比例，為臨床提供確切可靠的病原學診斷依據。方法：選取2010年6月~2011年6月到我校附屬醫院就診的持續腹瀉或間歇2-4周內復發病程在兩個月以上的慢性腹瀉患者的糞便標本110份作涂片和細菌培養，取25份正常人的糞便標本作對比分析。結果：110份的糞便標本涂片檢查發現桿菌/球菌比例失調；細菌培養除正常標本中含有的菌群外，還培養出克雷伯氏菌，金黃色葡萄球，白色念珠菌和奇異變形桿菌等其他菌群。大腸桿菌明顯增加，乳酸桿菌明顯減少，雙歧桿菌和腸球菌較正常減少。結論：腸道菌群失調是造成慢性腹瀉的重要原因，要根據病原學檢查結果選擇合理的治療方法。

【關鍵詞】 慢性腹瀉；菌群失調；菌源分析

【中圖分類號】 R572【文獻標識碼】 B【文章編號】 1007-8231（2011） 08-0743-02

慢性腹瀉多是由于急性腹瀉治療不當而轉變來，是由于各種原因導致的腸道菌群失調，影響腸道內維生素的合成和對蛋白質、糖、脂質的消化吸收而導致的大便次數增多和大便不成形[1]。

1資料與方法

1.1一般材料

1.1.1標本選取2010年6月～2011年6月到我校附屬醫院就診的持續腹瀉或間歇2-4周內復發病程在兩個月以上的慢性腹瀉患者的糞便標本110份作涂片和細菌培養，其中男56份，女54份，年齡21～65歲，門診患者71份，住院患者39份，取25份正常人的糞便標本作對比分析。

1.1.2儀器與試劑使用成都瑞琦生物科技有限公司生產的血培養基、伊紅美蘭培養基，麥康凱培養基；采用西門子公司的德林細菌鑒定系統進行細菌鑒定；臺灣貝索革蘭氏染色劑； OLYMPUS顯微鏡。采用蘭州生物制品研究所生產的診斷血清。

1.2方法

1.2.1涂片染色

所有糞便標本直接涂片后進行革蘭染色，放置在油鏡下鏡檢，認真觀察并詳細記錄各類菌群的形態及所占比例。

1.2.2細菌培養及鑒定

將1g糞便標本加入9倍量標本的無菌生理鹽水中震蕩30min，然后加入生理鹽水依次10倍稀釋至109，取3滴進行定量接種[2]，分別接種在血培養基和麥康培養基，置于35℃孵箱中18-24h，然后觀察記錄培養基上各類細菌菌落的生長狀況、數量、形態特征及各菌群之間的比例，菌群不明確時可挑取可疑的菌落進行革蘭染色，然后分析鑒定。

1.2.3血清鑒定

對懷疑是致病大腸埃希菌、沙門氏菌、志賀菌或霍亂弧菌的菌落分別選擇相應的抗血清做凝集試驗。

2結果

2.1標本涂片染色鏡檢

110份的腹瀉患者糞便標本涂片檢查發現桿菌/球菌比例失調，大便常規檢查發現白細胞正常或偏少，結果見表1。

2.2細菌培養

正常對照的標本中有22份同時分離出大腸桿菌(占88%)、雙歧桿菌(占6%)、腸球菌(占4%)和乳酸桿菌(2%)，有3份僅分離出大腸桿菌(占87%)、雙歧桿菌(占7%)和腸球菌(占6%)，慢性腹瀉患者標本除以上正常標本中含有的菌群外，還分離出克雷伯氏菌，金黃色葡萄球，白色念珠菌、銅綠色假單孢菌和奇異變形桿菌等其他菌群，大腸桿菌明顯增加，乳酸桿菌明顯減少，雙歧桿菌和腸球菌較正常減少。結果見表2。

表2慢性腹瀉患者糞便標本細菌培養及鑒定結果

3討論

造成慢性腹瀉的主要原因是急性腹瀉治療不當，而根本原因卻是抗生素的不合理使用。本次調查的所有慢性腹瀉患者都有長時間不合理服用抗生素的經歷，從而導致腸道微生態平衡失調而久治不愈。腸道正常菌群具有作為生物屏障防御病原體的作用，同時還參與蛋白質、糖、脂質的消化吸收及合成維生素等，而且有降解亞硝胺等致癌物質的作用[3]。由于某些原因而破壞了腸道內各種微生物之間的相互制約關系，使細菌的數量和種類發生改變，稱為菌群失調。對本次調查在涂片鏡檢或細菌培養有細菌的標本進行分析顯示，涂片鏡檢時細菌總數于正常對照相比明顯減少，腸桿菌和腸球菌的比例顛倒(正常約為75∶25)，在培養鑒定的菌群中，條件致病菌如克雷伯桿菌、銅綠假單孢菌、奇異變形桿菌和白色念株菌等菌群出現優勢生長。在不合理的使用抗生素和機體抵抗力下降的條件下這些細菌優勢生長就會導致相關腸炎[4]。本次研究的菌群只是腸道微生態環境中的細菌極少一部分，在腸道細菌的3%以下[5]，這些細菌除去大腸埃希菌基本上都是條件致病菌，正是由于抗生素的不合理應用而導致這些細菌數量的異常增多，使腸道微生態環境失調，腹瀉遷延不愈。因此，在臨床治療疾病時，要根據病原學檢查結果選擇合理的抗生素。

參考文獻

[1]張曉煒，宋佩茹，邢軍.抗生素相關性腸道菌群失調38例臨床分析[J].中華醫院感染學雜志，2001，11(2)：132-133.

[2]王曉明，趙瑞芹，辛素夏，等.糞便涂片檢查在診斷腸道菌群失調中的臨床意義[J].實用兒科臨床雜志，2007，22(7)：492.

[3]劉思純.腸道正常菌群及菌群失調[J].新醫學，1999，30(11)：626-627.

[4]王曉華，夏文涵，王曉剛，等.腸道菌群失調癥的研究進展[J].實用臨床醫學，2007，8(8)：136.

[5]王瑞君.人體腸道微生態區系[J].生物學教學，2006，31(2)：9.