兩種梅毒血清實驗方法學評價

【摘要】 目的 評價兩種梅毒血清學檢測方法的敏感度和特異度，以及應用價值。方法 對32份梅毒陽性標本和32份梅毒陰性標本采用梅毒螺旋體明膠凝集實驗（TPPA）和快速血漿反應素環狀卡片實驗（RPR）進行檢測。結果 TPPA的敏感度為100%，特異度為100%；RPR的敏感度為75%、特異度為100%。TPPA與RPR的敏感度比較，差異有統計學意義（χ【sup】2【/sup】9.14，P<0.01）。結論 用RPR法檢測梅毒易造成假陰性而漏檢，建議實驗室用TPPA法檢測以提高梅毒的陽性率，避免漏檢。

【關鍵詞】 梅毒抗體； TPPA； RPR； 實驗方法學

梅毒螺旋體屬于密螺旋體屬、蒼白螺旋體的蒼白亞種，是引起人類梅毒的病原體。梅毒是一種系統性、常見的慢性性傳播疾病之一，其傳播途徑為性傳播、血液傳播和母嬰垂直傳播。不良的性行為、共用注射器等均可引起梅毒病原體的感染。感染后幾乎可以累及全身各個器官，且病程長、危害大、臨床表現復雜，呈多樣性，即可以產生多種多樣的癥狀和體征，又可以很多年沒有癥狀而呈潛伏狀態，容易被漏診和誤診。同時育齡婦女還可通過胎盤傳給胎兒引起先天性梅毒。據全國流行病學調查表明，我國從1991年～2001年的性病呈增長趨勢，其中梅毒的增長速度最快，達到61.63%【sup】［1］【/sup】。2005年國家衛生部公布的法定報告傳染病中，梅毒的發病人數，從2002年的第7位躍居第5位【sup】［2］【/sup】。近年來為控制梅毒的傳播，多數醫院對手術、輸血及各種創傷性檢查的患者都進行梅毒的實驗室檢查。因此選擇敏感性高的實驗室檢測方法，對梅毒的早期診斷提供準確及時的依據有助于梅毒的準確診斷和早期治療，尤其對控制其蔓延至關重要。為了解TPPA和RPR敏感度和特異度的差異，筆者對32份梅毒陽性標本和32份梅毒陰性標本分別進行檢測，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集筆者所在地區2006年1月～2011年1月門診及病房確診為梅毒患者的32份陽性血清作為實驗組，其中男性21例，女性11例，年齡19～73歲；經健康體檢為健康人群32份梅毒陰性血清作為對照組，男性20例，女性12例，年齡為21～60歲。

1.2 試劑 TPPA法采用日本富士瑞必株式會社提供的梅毒螺旋體抗體診斷試劑（凝集法）；RPR法采用上海科華生物有限公司提供的梅毒快速反應素診斷試劑，兩種試劑均在有效期內使用。

1.3 方法 （1）兩種方法的操作均嚴格按試劑盒內的操作說明書進行，質控血清由廣西區臨檢中心提供。（2）敏感度和特異度計算方法：敏感度（%）真陽性/（真陽性+假陰性）×100%，特異度真陰性/（真陰性+假陽性）×100%。

2 結果

實驗組和對照組的32例血清用兩種方法進行測定，其結果表明TPPA和RPR敏感度分別為100%和75%，特異度均為100%。TPPA法和RPR法的敏感度比較，差異有統計學意義（χ【sup】2【/sup】9.14，P0.0025），見表1。

表1 兩種方法梅毒血清學檢測結果比較 （n，%）

注:TPPA法與RPR法比較，χ【sup】2【/sup】9.14，【sup】*【/sup】P<0.01

3 討論

梅毒的診斷需要依據病史、臨床表現及實驗室檢查。目前梅毒的實驗室檢查方法有病原體直接檢查法和血清學檢查法。病原體直接檢查法是用暗視野顯微鏡鏡檢測特征性的梅毒螺旋體，主要適用于人體感染梅毒的初期即一期梅毒和二期梅毒，但陰性不能完全排除，多數實驗室特別是基層實驗室不作此實驗。血清學實驗是目前國內外檢測梅毒螺旋體的主要方法，人體一旦感染梅毒螺旋體后，將引起一系列血清免疫學反應，產生兩種抗體。一類是磷脂反應素即非特異性抗體；另一種是針對梅毒螺旋體的特異性抗原而產生的抗體，即梅毒的特異性抗體。TPPA實驗是特異性梅毒血清學實驗；RPR實驗是非特異性梅毒血清學實驗；由于梅毒早期的臨床表現不典型，血清學的實驗室檢測成了梅毒診斷的主要手段，TPPA法檢測的是梅毒特異性抗體，以明膠顆粒為載體，吸附梅毒螺旋體-Niohols株菌體抗原，克服了血細胞自溶而造成漏檢的弊端，有很高的敏感度和特異度，臨床實驗室常以TPPA法陽性作為確診梅毒的依據【sup】［3］【/sup】。RPR是非特異性梅毒血清實驗，它將VDRL抗原吸附于活性碳顆粒的表面，若待測血清中存在反應素時，即發生凝集，具有與TPPA法同樣的特異度，且血清不需要滅活、操作簡單、所需時間短、試劑成本價格低廉，故被臨床大多基層實驗室廣泛使用。本研究以TPPA法為金標準對RPR法進行評價，結果顯示，TPPA法和RPR法的敏感度比較，差異有統計學意義（χ【sup】2【/sup】9.14，P0.0025）。由于RPR法檢測32份陽性標本的檢出率只有75%，有25%是假陰性而漏檢。也有相關報道稱由于RPR法會產生假陰性，陽性結果可以直接報告，但陰性結果必須用TPPA法再確證【sup】［4，5］【/sup】。由于基層醫院檢測對象大多數為手術、輸血、各種創傷性檢查的患者及產婦，并非性病門診的高危患者，梅毒的陰性結果是遠遠高于陽性結果。鑒于RPR法陰性結果的不確定性，須用TPPA法再確證，這既浪費試劑成本又增加工作人員的工作量。建議基層醫院實驗室使用TPPA法檢測梅毒，即高效又準確，從而有效提高梅毒的檢出率，對梅毒進行早診斷、早治療，控制蔓延至關重要。

參 考 文 獻

［1］ 龔向東，葉順章，張君炎，等.1991～2001年我國性病流行病學分析.中華皮膚科雜志，2002，35（3）:178-182.

［2］ 程玉萍.梅毒研究近況.醫學綜述，2007，13（19）:1470-1472.

［3］ 尹躍平，施美琴，王洪春，等.快速梅毒螺旋體抗體檢測實驗的實驗室初步評價.嶺南皮膚性病科雜志，2009，16（1）:11-14.

［4］ 陳遠貴，梅毒不.同血清學檢測方法的比較.臨床輸血與檢驗，2009，11（2）:174-175.

［5］ 彭英，梁平.梅毒螺旋體膠體金法的臨床應用價值.現代醫藥衛生，2008，24（6）:825-826.

（收稿日期：2011-02-21）

（本文編輯：車艷）