pH值對尿β₂-微球蛋白測定結果的影響

作者單位：133000 吉林省延邊第二人民醫院

通訊作者：吳英子

【摘要】 目的 探討尿液pH值對β₂-微球蛋白（β₂-MG）測定的影響。方法 免疫散射比濁法測定正常對照組與腎臟疾病組尿液在pH值調節前后β₂-微球蛋白（β₂-MG）含量的變化。結果 尿β₂-微球蛋白（β₂-MG）在正常對照組無明顯變化（P>0.05），但在腎臟疾病組pH值調節前后有顯著變化（P<0.01）。結論 尿β₂-微球蛋白（β₂-MG）不穩定，在酸性環境中易分解破壞。因此其測定需調節pH值并及時測定，才不會出現假陰性或與疾病不相符的結果。

【關鍵詞】 pH值； 尿β₂-微球蛋白； 免疫散射比濁法

β₂-微球蛋白（β₂-MG）是由100多個氨基酸殘基單鏈組成，相對分子量為11 600～11 815。它是構成細胞膜上組織相容性抗原（HLA）的一部分，人體內幾乎所有的有核細胞都能合成微球蛋白（MG）并附于細胞表面，在代謝過程中β₂-MG與HLA分離，釋放到體液中，故血清、尿、腦脊液、胸腔積液、腹腔積液、唾液等均含有β₂-MG，正常人β₂-MG合成的釋放速度非常穩定，全部由腎小球濾過。腎小球濾過率是估價腎功能的一個重要指標，由腎小球濾過的β₂-MG 99%由近端腎小管重吸收，并在此全部被分解成氨基酸，故而尿液中β₂-MG的測定是診斷腎小管疾病較靈敏的特異性試驗。濾過的β₂-MG不再返流入血液循環^［1］，所以血β₂-MG升高可反映腎小球濾過率降低和體內合成增加。尿β₂-MG升高可反映腎小球濾過率增加和腎小管重吸收功能受損^［2］。臨床應用中常通過測定血、尿中的β₂-MG來診斷腎盂腎炎、間質性腎炎、腎移植成活、糖尿病腎病、腎功能不全、痛風病、重金屬鉻汞中毒以及某些惡性腫瘤，為臨床診斷提供了可靠和靈敏的指標。血β₂-MG不受飲食的干擾，也不受采血時間的影響，動靜脈血含量無差別，而尿β₂-MG樣本留去方便，故血、尿β₂-MG檢測是檢查腎功能較便捷的指標。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2008～2010年來筆者所在醫院體檢科和腎病內科就診的門診患者160例。正常對照組為本院體檢科健康體檢者，共100例，男56例，女44例，年齡22～55歲，平均36歲，經檢測，各項常規指標均正常。腎病組為本院腎病內科已確診的腎病患者，共60例，男33例，女27例，年齡12～78歲，平均48歲。

1.2 儀器與試劑 儀器為合肥中國科大創新股份有限公司中佳分公司GC-2010γ射線免疫計數器。試劑使用北京原子能高科股份有限公司β₂-MG放射免疫分析藥盒。pH精密試紙購自上海三愛思試劑有限公司。

1.3 實驗方法 無論是正常對照組還是腎臟疾病組均留取尿液標本，先檢測尿pH值，若尿pH<6.0，則將其分為兩份，一份標本離心沉淀后，取上清液1 ml加1滴穩定劑并徹底混合，待測；另一份標本用1 N的氫氧化鈉溶液調節pH值為7～9，離心沉淀后，取上清液1 ml加1滴穩定劑并徹底混合，待測。然后同時對酸性尿液和堿性尿液中的β₂-MG利用放射免疫分析法嚴格按照操作規程進行定量測定。

1.4 統計學方法 pH值調節前后比較采用SPSS 10.0版統計軟件的t檢驗，P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

尿β₂-MG測定：對100份正常對照組酸性尿和堿性尿分別進行測定，酸性尿β₂-MG測得平均值為（112.12±34） ng/ml；堿性尿β₂-MG測得平均值為（116.01±23） ng/ml，酸性尿和堿性尿差異無統計學意義（P>0.05）。因此尿β₂-MG在正常對照組無明顯變化，但在腎臟疾病組pH值調節前后有明顯變化。對60份腎病患者酸性尿和弱堿性尿分別進行測定，酸性尿β₂-MG測得平均值為（476.99±169） ng/ml；堿性尿β₂-MG測得平均值為（567.57±222） ng/ml，差異有統計學意義（P<0.01）。

3 討論

β₂-MG作為腎小管損傷的標志物已廣泛應用于各臨床實驗室，準確測定尿中β₂-MG的含量是診斷和治療腎臟疾病及觀察預后的重要依據^［3］，其穩定性是影響檢測結果的關鍵。尿液貯存時間、溫度及pH值等因素均影響其穩定性，在實際操作中，pH值是一個重要因素。相關研究表明，在各種尿液貯存時間、溫度條件下，β₂-MG非常容易降解^［4］。在正常飲食條件下，尿液pH在5.5～6.5之間，處于弱酸性環境。這樣尿液排出體外后，β₂-MG處于易降解的環境，因此在實際操作中，必須把尿液pH值調到7～9之間，從而避免尿β₂-MG出現假陰性或結果偏低的情況。尿β₂-MG結果受其他因素的影響，就不能真實反映腎小管受損情況，為能及時診斷并接受治療，一定要搞清楚影響測定的因素。經過研究發現，pH值是影響尿β₂-MG測定的一個重要因素。實驗表明，腎臟疾病組尿液pH值明顯影響β₂-MG的檢測結果。即腎臟疾病組在pH調節前后尿β₂-MG的測定結果有顯著變化，腎小管受損越嚴重的患者，受到的影響就越大。正常對照組因尿中β₂-MG含量甚微，pH值對正常對照組尿β₂-MG測定的影響不明顯（P>0.05），可能因分解的β₂-MG所占比例太小。總之，尿β₂-MG的含量測定對腎病診斷和治療有重要意義，準確測定其結果是保證臨床醫生掌握患者病情的重要依據。接收到尿液標本后，應在盡量短的時間內調節pH值，并嚴格按照操作規程進行尿β₂-MG的測定。

參考文獻

［1］ 熊立凡.臨床檢驗基礎.第3版.北京:人民衛生出版社，2006:142-143.

［2］ 林敏，朱柳君，李輝.尿微量蛋白檢測及尿蛋白電泳在腎臟疾病診斷中的應用.放射免疫學雜志，2006，19（6）:502-503.

［3］ 張秀明，李健齋，魏明競，現代臨床生化檢驗學.北京：人民醫出版社，2001，36-37.

［4］ 王蕾，劉華.尿液貯存溫度、時間及pH值對尿半胱氨酸蛋白酶抑制劑C穩定性的影響.檢驗醫學，2005，20（3）:224-226.

（收稿日期：2011-05-03）

（本文編輯：郎威）