新輔助化療對局部晚期乳腺癌中ER、PR、C-erbB-2表達(dá)的影響

[摘要] 目的 探討新輔助化療對局部晚期乳腺癌中ER、PR及C-erbB-2的表達(dá)有無影響。方法 通過免疫組化的方法檢測新輔助化療前粗針穿刺標(biāo)本及術(shù)后標(biāo)本的ER、PR及C-erbB-2的表達(dá)情況。結(jié)果 新輔助化療前后ER、PR及C-erb-2表達(dá)狀態(tài)發(fā)生改變的分別有5例、10例及7例。新輔助化療前后ER、PR及C-erbB-2的表達(dá)無顯著性差異（P＞0.05）。結(jié)論 新輔助化療可使部分晚期乳腺癌患者的EP、PR及C-erbB-2的表達(dá)發(fā)生變化，但EP、PR及C-erbB-2的表達(dá)變化無統(tǒng)計學(xué)意義，說明新輔助化療不會影響晚期乳腺癌患者的ER、PR及C-erbB-2的表達(dá)。

[關(guān)鍵詞] 新輔助化療；局部晚期乳腺癌；ER；PR；C-erbB-2；免疫組織化學(xué)

[中圖分類號] R737.9 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1673-9701（2011）23-62-03

Influence of Neoadiuvant Chemotherapy on the Expression of ER、PR、C-erbB-2 In Patients with Locally Advanced Breast Cancer

TIAN Mengzi BI Yanqing

Department of General Surgery，Dongying City People’s Hospital，Dongying 257091，China

[Abstract] Objective To explore neoadjuvant chemotherapy locally advanced breast cancer to ER， PR and C-erb-2 without the express impact. Methods Through the immunohistochemical determination of the new adjuvant chemotherapy before thick needle biopsy specimens were collected and postoperative ER， PR and C-erbB-2 expression. Results ER、Pr and C-erbB -2 expression before and after chemotherapy state changes respectively in 5 cases， 10 cases and 7 cases. Statistical analysis results show that that the new adjuvant chemotherapy ER， PR and C-erbB -2 before and after express no significant differences（P＞0.05）. Conclusion Neoadjuvant chemotherapy with advanced breast cancer can be made part of the EP， PR and C-erbB-2 expression changes，but EP，PR and C-erbB- 2 expression change was not statistically significant.Neoadjuvant chemotherapy with advanced breast cancer does not affect the ER， PR and C-erbB-2 expression.

[Key words] Neoadjuvant chemotherapy；Locally advanced breast cancer；ER；PR； C-erbB-2；Immunohistochemical

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤，在我國占全身各種惡性腫瘤的7%～10%，并呈逐年上升趨勢，部分大城市統(tǒng)計學(xué)報告顯示乳腺癌發(fā)病率已占女性惡性腫瘤首位。乳腺癌病因目前仍不清楚，可能的因素很多，比如遺傳因素、不典型增生、初潮年齡早或未生育哺乳等都可能是導(dǎo)致乳腺癌發(fā)生的原因[1]，局部晚期乳腺癌因其病變侵及局部區(qū)域范圍廣，隨著研究的進(jìn)展，新輔助化療已經(jīng)成為局部晚期乳腺癌的絕對適應(yīng)證。隨著新輔助化療在乳腺癌尤其是局部晚期乳腺癌中的廣泛應(yīng)用，其對乳腺癌的各個生物學(xué)指標(biāo)如EP、PR及C-erbB-2等的表達(dá)到底有無影響，目前仍無大規(guī)模試驗證明。本文的目的即為探索新輔助化療（NAC）對局部晚期乳腺癌患者HR和C-er-2表達(dá)的影響，從而進(jìn)一步明確NAC在局部晚期乳腺癌中應(yīng)用的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2004年1月～2009年3月在東營市人民醫(yī)院住院的83例女性乳癌患者，年齡41～73歲，中位年齡55歲，患者均可捫及腫塊，且均經(jīng)B超引導(dǎo)下粗針穿刺證實為浸潤性乳腺癌，按TNM分期均為Ⅲ期乳腺癌，且所有患者均同意行新輔助化療。全部病例均接受乳腺癌的根治性手術(shù)。活檢標(biāo)本與術(shù)后標(biāo)本都切片后進(jìn)行免疫組化分析。除去在化療過程中病情進(jìn)展的3例及化療后腫塊消失（完全緩解）的11例，共有69例患者參與本試驗。穿刺后標(biāo)本及手術(shù)后標(biāo)本均處理后送本院病理科行病理檢查及免疫組化實驗。

1.2 實驗方法

1.2.1 免疫組化染色 所有組織均用10%福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋，4μm厚連續(xù)切片，分別做HE和免疫組化染色。

1.2.2 主要試劑 ER、PR、C-erbB-2基因、二步法染色試劑盒、DAB顯色試劑盒、0.01M PBS液、抗原修復(fù)液均購于北京中山生物技術(shù)有限公司。

1.2.3 采用二步法染色 根據(jù)試劑盒操作說明書中的要求和步驟制作標(biāo)本，陽性對照采用對照片（購于北京中山試劑公司），以PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)著色深淺程度及陽性細(xì)胞數(shù)量（%），由我院病理科醫(yī)生在高倍光鏡下隨機(jī)選擇12個視野，做出判斷。陽性細(xì)胞必須是：①細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰；②細(xì)胞定位性好；③著色明顯高于背景。根據(jù)以上標(biāo)準(zhǔn)，-視為陰性表達(dá)，+～+++視為陽性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計數(shù)資料以率和構(gòu)成比表示，用秩和檢驗及Fisher法進(jìn)行組間比較，P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

新輔助化療前ER、PR表達(dá)陽性的分別是34例（49.27％）和50例（72.46％），化療后ER、PR表達(dá)陽性的分別有29例（42.03％）和44例（63.77％）；新輔助化療前后ER、PR陰性表達(dá)及陽性表達(dá)發(fā)生改變的分別有5例和10例。其中ER有5例由陽性表達(dá)變?yōu)殛幮员磉_(dá)；PR有8例由陽性表達(dá)變?yōu)殛幮员磉_(dá)，有2例由陰性表達(dá)變?yōu)殛栃员磉_(dá)。ER、PR的表達(dá)在新輔助化療前后無顯著性差異（P＞0.05） （表1、2）。而C-erbB-2的陽性表達(dá)率在輔助化療前后分別為41例（59.42%）及40例（57.97%），化療后C-erbB-2 的表達(dá)3例由陽性表達(dá)變?yōu)殛幮员磉_(dá)，有4例陰性表達(dá)變?yōu)殛栃员磉_(dá)，化療前后C-erbB-2的表達(dá)無顯著性差異（P＞0.05）（表3）。新輔助化療雖可使部分晚期乳腺癌患者的EP、PR及C-erbB-2的表達(dá)發(fā)生變化，但這些變化無統(tǒng)計學(xué)意義，其不會影響晚期乳腺癌患者的ER、PR及C-erbB-2的表達(dá)。

3 討論

NSABP B-18和B-27等試驗研究表明：80%～90%的患者在進(jìn)行化療后腫瘤明顯縮小[2]，增加了手術(shù)機(jī)會。但是很多生物學(xué)指標(biāo)和病理表達(dá)在化療前后都有了一些變化，尤其是激素受體的表達(dá)狀況，影響我們判斷預(yù)后的同時還影響了我們對下一步治療方案的選擇。

ER、PR的表達(dá)狀態(tài)作為是否選擇內(nèi)分泌治療的指標(biāo)從上世紀(jì)70年代已經(jīng)被提出，并且其能預(yù)測早期復(fù)發(fā)的風(fēng)險[3]。研究分析患者服用5年三苯氧胺（TAM）后，復(fù)發(fā)幾率及死亡風(fēng)險在ER陽性乳腺癌患者中明顯降低了。很多臨床試驗表明PR也是重要的預(yù)測預(yù)后的因子之一，并且認(rèn)為HR陽性的乳腺癌病人在輔助內(nèi)分泌治療中獲益最大[4]，作為制定乳腺癌輔助治療的考慮因素，ER及PR是臨床醫(yī)生不可忽視的。本研究發(fā)現(xiàn)，化療前后ER、PR水平比較，雖無統(tǒng)計學(xué)差異，但對部分患者ER及PR的狀態(tài)有影響。研究認(rèn)為HR狀態(tài)發(fā)生變化的原因有很多，其中包括：①認(rèn)為染色主觀性判斷；②腫瘤細(xì)胞染色的透明度受到化療的影響；③另取材樣本的差異也可能是HR受體表達(dá)發(fā)生變化的重要原因。很多情況下，各種因素共同作用從而導(dǎo)致了穿刺標(biāo)本及術(shù)后標(biāo)本的ER、PR部分出現(xiàn)了表達(dá)的變化。

本實驗的C-erbB-2高表達(dá)陽性率偏低，NCCN規(guī)定C-erbB-2高表達(dá)是免疫組化染色表達(dá)為+++，一旦為++則必須加FISH試驗加以確定。本實驗把所有表達(dá)為+～+++的定義為陽性，有可能導(dǎo)致陽性率增高。雖然目前來看，因為國內(nèi)人群經(jīng)濟(jì)等各方面的原因?qū)е聦-erb-2的重視程度低于HR受體，但隨診研究的進(jìn)展，其在乳腺癌中的重要地位已經(jīng)越來越受到人們的重視。本研究表明，新輔助化療前后對C-erbB-2的狀態(tài)無顯著變化，參考了國內(nèi)外很多關(guān)于C-erb-2的試驗來看，我們的結(jié)論與其一致。研究認(rèn)為凡是C-erbB-2+++或++而加用FISH確定用高表達(dá)者，含蒽環(huán)類或/和紫杉類的化療藥物效果明確。加用FISH檢查是考慮賀普丁治療費(fèi)用高昂，一般人群難以承受，為了精確的了解C-erb-2高表達(dá)的的狀態(tài)必須加用FISH檢查。

雖然有研究證實乳腺癌的新輔助化療對患者的DFS及OS無明顯改善，但新輔助化療可以增加手術(shù)幾率，保乳成功幾率較前明顯增加。根據(jù)NSABPB-18試驗的年隨訪結(jié)果，新輔助化療后的病理完全緩解率可以作為局部進(jìn)展期乳腺癌的獨(dú)立預(yù)后指標(biāo)[5]。德國學(xué)者Prisack等[6]的研究表明，ER及PR高表達(dá)和C-erbB-2低表達(dá)，腫瘤分化程度高的乳腺癌患者進(jìn)行乳腺癌的新輔助化療后PCR增加。根據(jù)意大利歐洲腫瘤研究所Collconi等[7]的研究表明，對于ER、PR陰性且腋窩較少淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病人行乳腺癌的新輔助化療后病理完全緩解率高于其他類型病人。英國Burcombe和澳大利亞Taucher的研究卻提出了不同見解：他們認(rèn)為無論是手術(shù)標(biāo)本的ER、PR或C-erb-2還是粗針穿刺活檢的生物學(xué)標(biāo)記結(jié)果都不能作為乳腺癌新輔助化療的預(yù)測指標(biāo)。在我國，類似的實驗開展的較少，仍未得出統(tǒng)一的結(jié)論。

分析多個國內(nèi)外臨床試驗后發(fā)現(xiàn)，雖然有部分實驗提示在新輔助化療前后ER及PR的表達(dá)狀態(tài)會發(fā)生影響，主要表現(xiàn)為陽性改為陰性的幾率增加，但是90%以上的研究結(jié)果提示乳腺癌新輔助化療前后的HR受體狀態(tài)無顯著變化。對于C-erb-2的研究則結(jié)論沒有大的異同，一般認(rèn)為在新輔助化療前后C-erb-2的狀態(tài)無明顯改變，大多都承認(rèn)了費(fèi)博建的理論[8]。我們的研究結(jié)果表明，新輔助化療前后ER、PR及C-erb-2的表達(dá)有部分發(fā)生了改變，以ER及PR為著，但是沒有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義。在國內(nèi)，大部分的乳腺癌患者的輔助治療計劃是通過術(shù)后的免疫組化結(jié)果來明確ER、PR及C-erb-2的情況從而確定其輔助治療方案，根據(jù)我們的研究結(jié)果，局部進(jìn)展期乳腺癌患者新輔助化療前后ER、PR及C-erb-2的表達(dá)狀態(tài)仍然有部分發(fā)生了改變，我們建議LABC的病人輔助治療方案的選擇以新輔助治療前的穿刺標(biāo)本的免疫組化結(jié)果為準(zhǔn)。

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（收稿日期：2011-03-21）