RP-HPLC法測定清胃丸中黃芩苷的含量

[摘要] 目的 建立清胃丸中黃芩苷的含量測定方法。方法 采用RP-HPLC法，以甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）為流動相；檢測波長為315nm。結果 黃芩苷在（6.18～80.34）μg/mL（r=0.9998）范圍內線性關系良好；平均回收率為99.18%，RSD為0.75%（n=6）。結論 本文方法簡便可靠，專屬性強，重現(xiàn)性好，可用于清胃丸的質量控制。

[關鍵詞] HPLC；清胃丸；黃芩苷

[中圖分類號] R286.0 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2011）35-78-02

Determination of Baicalin in Qingwei Pills by RP-HPLC

ZHAO Xiangyang ZHU Jing

Suzhou Institute for Food and Drug Control，Suzhou 234000，China

[Abstract] Objective To establish the determination method of Baicalin in Qingwei Pills. Methods HPLC was used and methanol-water-phosphoric acid（47∶53∶0.2） mixture as a mobile phase. The detection wavelength was set at 315 nm. Results Baicalin showed a good linear relationship at a range of（6.18-80.34）μg/mL，r=0.9998. The average recovery was 99.18% and RSD was 0.75%（n=6）. Conclusion The method is simple with good reproducibility and can be used for Qingwei Pills.

[Key words] HPLC；Qingwei Pills；Baicalin

清胃丸是衛(wèi)生部中藥成方制劑第十冊的品種，由大黃、芒硝、黃芩、滑石、牽牛子、羌活、膽南星、檳榔、白芷、關木通等10味中藥組成，具有清腸胃實熱、通利二便的功效，用于頭疼目昏、牙痛齦腫、暴發(fā)火眼、便秘溺赤、喉干咽痛、口唇焦裂等。為全面控制質量，對組方各藥的化學成分進行了研究，參考相關文獻[1-5]建立了黃芩的含量測定方法，為有效控制該藥物的質量提供了專屬、簡便、準確、快速的方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1260高效液相色譜儀；1260VWD紫外可變檢測器；十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱；梅特勒AB-135S電子分析天平（0.01mg）。

1.2 試劑及藥品

黃芩苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110715-

200514）；清胃丸（安徽雪楓制藥廠，批號：20091101，20091204，

20091221）。試劑：甲醇為色譜純，水為純化水。

2 方法與結果

2.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱：Agilent C18（4.6mm×150mm；5.0μm）；流動相：甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）；流速：1.0mL/min；檢測波長：315nm；進樣量：10μL。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取黃芩苷對照品適量（置P2O5干燥器中真空干燥24h），加甲醇制成含黃芩苷0.0618mg/mL的溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取本品適量研細，精密稱取本品細粉約4g，置錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，精密稱定后，超聲處理30min，稱定并用甲醇補足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

2.4 陰性對照試驗

依據處方及制法，制備缺少黃芩的模擬樣品，按供試品溶液制備方法制成黃芩陰性對照溶液。將黃芩陰性對照溶液、黃芩苷對照品溶液和供試品溶液分別注入高效液相色譜儀進行測定，記錄的色譜圖見圖1。結果表明處方中其他成分不干擾黃芩苷的測定。

2.5 線性關系考察

精密取對照品溶液1、2、5、7、10、13μL，注入液相色譜儀進行測定并記錄色譜圖。以濃度為橫坐標、黃芩苷峰面積值為縱坐標，繪制標準曲線，并計算出回歸方程Y=1365.60X+1.0565，r=0.9998。結果表明黃芩苷在（6.18～80.34）μg/mL范圍內呈良好的線性關系。

2.6 精密度試驗

取對照品溶液，注入液相色譜儀，進樣10μL，重復進樣5次，測定峰面積。按峰面積計算出RSD為0.06%（n=5）。結果表明本實驗精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗

取對照品溶液，每隔2h進樣10μL，依法測定黃芩苷含量，黃芩苷RSD為0.12%（n=6）。結果表明供試品溶液在8h內很穩(wěn)定。

2.8 加樣回收試驗

精密稱取已知含量的清胃丸（批號：20091101）6份，分別精密加入黃芩苷對照品適量，加25mL甲醇溶解，并按供試品制備方法制備，依法測定，記錄色譜圖并計算回收率，結果見表1。

2.9 樣品測定

取本品適量研細，精密稱取細粉約4g，置錐形瓶中，精密量取甲醇25mL，密塞并精密稱定重量，超聲處理30min，用甲醇補足減失的重量，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液10μL，注入液相色譜儀，計算黃芩苷含量，結果見表2。

3 討論

在最大吸收波長選擇時，首先取供試品溶液經紫外分光光度計全波長掃描，發(fā)現(xiàn)在315nm波長處有最大吸收，故本試驗選擇315nm為檢測波長，保證了檢測的靈敏度和準確性。

試驗曾以乙腈-水（45∶55）、甲醇-水-冰醋酸（47∶53∶0.2）及乙腈-0.05mol/L冰醋酸（15∶85）為流動相，考察各相下主峰與雜質峰的分離情況，比較之后發(fā)現(xiàn)以甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）為流動相時，黃芩苷分離效果最佳。

通過綜合考察后，筆者認為本文擬定的RP-HPLC含量測定方法具有簡便快捷、準確靈敏和重現(xiàn)性好等優(yōu)點，可有效控制清胃丸的質量。

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（收稿日期：2011-10-11）