臨床診斷為手足口病病例的病原分析326例

摘 要 目的：分析臨床診斷為手足口病的住院患兒的病原分型，為手足口病提供實驗室結(jié)果佐證，以及為手足口病的臨床治療和預(yù)防提供科學依據(jù)。方法：通過RT-PCR的方法對醫(yī)院診斷為手足口病的住院患兒采咽拭子標本進行鑒定分型。結(jié)果：326例患兒標本中250例為腸道病毒陽性，其中腸道病毒71型（EV71）201例、柯薩奇A16（CA16）16例、33例未分型；陽性標本中男168例，女82例；年齡段分布為0～1歲62例，1～2歲88例，2～3歲72例，>3歲28例；年齡1個月～6歲，以3歲以下男孩居多；另76例為陰性標本，與臨床診斷不符。結(jié)論：臨床診斷為手足口病的住院患兒的主要病原為EV71，EV71的檢測可以為臨床診斷和治療手足口病提供參考和依據(jù)。實驗室診斷陽性病例以男孩居多。

關(guān)鍵詞 EV71 CA16 手足口病 腸道病毒

手足口病多發(fā)生于5歲以下兒童，可引起手、足、口腔等部位的皰疹，少數(shù)患兒可引起心肌炎、肺水腫、無菌性腦膜炎等并發(fā)癥。引發(fā)手足口病的腸道病毒有20多種，其中以EV71型和CA16型最為常見。對臨床診斷為手足口病住院的326例患兒進行了RT-PCR檢測，探討其病原分型，為臨床診斷治療和預(yù)防手足口病提供參考。

資料與方法

一般資料：收治手足口病并伴有發(fā)熱患兒326例。

儀器及試劑：7300real-time PCR儀，手足口熒光檢測試劑盒。

方法：采集住院患兒的咽拭子放入病毒保存液中，提取RNA，按試劑說明書配制25ul的反應(yīng)體系，進行RT-PCR擴增，擴增程序：40℃ 25分鐘，1個循環(huán)；94℃ 3分鐘，1個循環(huán)；93℃ 15秒→55℃ 45秒，40個循環(huán)。循環(huán)結(jié)束后判定結(jié)果，檢測樣本無典型S擴增曲線或Ct值＞35，則判樣本為陰性；檢測樣本呈典型S擴增曲線或Ct值≤35，則判樣本為陽性。

質(zhì)量控制：每次實驗需全程注意防止污染，在進行擴增時需設(shè)陰性、陽性、空白對照。

結(jié) 果

326例臨床診斷病例中有250例實驗室確診病例，實驗室確診病例達76.7%。陽性標本中病原基因分型以EV71為主（80.0%），男孩居多（67.2%），見表1、2。

表1 250例陽性標本性別統(tǒng)計

表2 250例陽性標本基因分型統(tǒng)計

250例陽性標本中以3歲以下居多，見表3。

表3 250例陽性標本不同年齡段統(tǒng)計

討 論

EV71是引起HFMD重癥病例的主要原因，EV71具有嗜神經(jīng)性，臨床易并發(fā)無菌性腦膜炎，在研究的326例臨床診斷病例中有201例是EV71陽性，這些病例臨床治療中應(yīng)引起醫(yī)生的高度重視。

檢測中有1例只有1月齡的EV71陽性標本，其接觸人員和食品來源的范圍都比較窄，臺灣曾報道嬰幼兒密切接觸的家長有陽性攜帶，由于沒有給患兒家長及其接觸的食品采樣，不能判斷出傳染源。

早期發(fā)現(xiàn)的手足口的病原體主要為CA16型，1969年EV71在美國被首次確認。此后EV71和CA16感染交替出現(xiàn)，成為手足口病的主要病原體，我們的研究發(fā)現(xiàn)HFMD的主要病原為EV71，在250例陽性病例中有33例EV未分型型，占陽性比例的13.2%，由于沒有分離培養(yǎng)、測序，不能進行基因分型，這例病例應(yīng)引起重視。

易感人群人對腸道病毒普遍易感，受感后可獲得免疫力，手足口病患者主要為學齡前兒童，尤以≤3歲年齡組發(fā)病率最高，檢測結(jié)果顯示HFMD好發(fā)于3歲以下男孩。與之報道結(jié)果相符，同時病毒各血清型之間無交叉免疫。因此預(yù)防的重中之重人群應(yīng)是3歲以下男孩。