加味當(dāng)歸四逆湯防治骨性關(guān)節(jié)炎機(jī)制的研究

摘 要 目的：觀察加味當(dāng)歸四逆湯對(duì)骨性關(guān)節(jié)炎兔血清酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、SOD和NO含量的影響，討論其作用的可能機(jī)制。方法：健康新西蘭兔40只，隨機(jī)分成4組，每組10只，隨機(jī)選取其中3 組進(jìn)行骨性關(guān)節(jié)炎造模，剩余1 組作為正常組不進(jìn)行造模。造模成功后給藥4周，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后測(cè)血清酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、SOD和NO含量。結(jié)果：與模型組比，加味當(dāng)歸四逆湯組兔血清酸性磷酸酶、堿性磷酸酶活性明顯改善，SOD活性顯著提高，NO含量顯著下降。結(jié)論：加味當(dāng)歸四逆湯能顯著改善兔血清酸性磷酸酶、堿性磷酸酶活性，提高SOD活性，降低NO含量，這可能是其防治骨性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制之一。

關(guān)鍵詞 骨性關(guān)節(jié)炎 加味當(dāng)歸四逆湯 機(jī)制

本實(shí)驗(yàn)旨在探討該中藥在治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制。

資料與方法

藥物：加味當(dāng)歸四逆湯；壯骨關(guān)節(jié)丸；木瓜蛋白酶（Sigma）由上海生工生物工程有限公司提供；SOD、NO檢測(cè)試劑盒；其余試劑均為AR級(jí)以上的產(chǎn)品。動(dòng)物：新西蘭大白兔40只，普通級(jí)10～12月齡，體質(zhì)量2.0～2.5kg，雌雄各半，由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：SCXK（粵）2008-0002。動(dòng)物飼料由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

儀器：UV-754分光光度計(jì)，電子全自動(dòng)稱(chēng)重儀，日立7060全自動(dòng)生化分析儀。

實(shí)驗(yàn)方法：建立木瓜蛋白酶致骨性關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物模型：健康新西蘭兔40只，隨機(jī)分成4組，每組10只，隨機(jī)選取其中3 組進(jìn)行骨性關(guān)節(jié)炎造模，剩余1組作為正常組不進(jìn)行造模。將需要造模的動(dòng)物左膝關(guān)節(jié)周?chē)昝?0mg/kg的戊巴比妥鈉進(jìn)行耳緣靜脈注射麻醉。麻醉生效后酒精消毒左膝關(guān)節(jié)，經(jīng)膝關(guān)節(jié)正中進(jìn)針，通過(guò)髕上韌帶注射4%木瓜蛋白酶蒸餾水0.3ml入關(guān)節(jié)腔，隔2天1次，分別于第1天、第4天、第7天進(jìn)行4%木瓜蛋白酶蒸餾水關(guān)節(jié)內(nèi)注射，術(shù)后每天肌肉注射青霉素40萬(wàn)U，傷口換藥，連續(xù)7天，預(yù)防感染，1周后造模完成。將造模成功的動(dòng)物隨機(jī)分為加味當(dāng)歸四逆湯組、壯骨關(guān)節(jié)丸組、模型組，加上對(duì)照組共4組，每組10只。

給藥：造模成功后治療組給予相應(yīng)的藥物（加味當(dāng)歸四逆湯4g生藥量/kg體重，壯骨關(guān)節(jié)丸0.8g/kg體重），對(duì)照組和模型組給予等體積生理鹽水，灌胃給藥，連續(xù)4周。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液指標(biāo)測(cè)定：4周后，在兔耳中動(dòng)脈取血3ml，靜置2小時(shí)，3500轉(zhuǎn)/分離心15分鐘，取動(dòng)物血清測(cè)定酸性磷酸酶、堿性磷酸酶及SOD、NO含量。

結(jié) 果

加味當(dāng)歸四逆湯對(duì)OA動(dòng)物血清酸、堿性磷酸酶和SOD、NO含量的影響，見(jiàn)表1。

討 論

本實(shí)驗(yàn)中，模型組家兔血清中SOD活性較對(duì)照組明顯下降，NO含量顯著升高，說(shuō)明造模是成功的。膝骨性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞分泌NO增加，而增加的NO可抑制IL-1的產(chǎn)生，引起軟骨的破壞。同時(shí)NO還可以增加COX-2的活性導(dǎo)致PGE2合成增加，參與介導(dǎo)滑膜炎癥形成^［1］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示加味當(dāng)歸四逆湯組血清中SOD活性均較模型組顯著升高，NO含量下降，酸性磷酸酶堿性磷酸酶活性改善，說(shuō)明加味當(dāng)歸四逆湯可能是通過(guò)提高血清中SOD活性，降低NO含量及改善酸性磷酸酶和堿性磷酸酶活性來(lái)防治0A發(fā)生發(fā)展的。

參考文獻(xiàn)

1 李憶農(nóng).細(xì)胞因子與骨關(guān)節(jié)炎［J］.中華風(fēng)濕病雜志，2000，2（1）:57.

表1 加味當(dāng)歸四逆湯對(duì)OA動(dòng)物血清酸、堿性磷酸酶和SOD、NO含量的影響

注：與對(duì)照組比，^{△>/sup>P＜0.05，△△P＜0.01；與模型組比，＃>/sup>P＜0.05，＃＃P＜0.01。}