HPLC法測定安胎益母丸中芍藥苷的含量

[摘要] 目的 建立安胎益母丸中芍藥苷的含量測定方法。方法 采用RP-HPLC法，以乙腈-水（15∶85）為流動相，檢測波長為230nm。結果 芍藥苷在（15.40～154.00）μg/mL（r=0.9999）范圍內線性關系良好，平均回收率為99.6%，RSD為0.64%（n=6）。結論 本文方法簡便可靠，專屬性強，重復性好，可用于安胎益母丸的質量控制。

[關鍵詞] HPLC；安胎益母丸；芍藥苷

[中圖分類號] R927.2 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2011）34-90-02

Determination of Paeoniflorin in Antai Yimu Pill by HPLC

WANG Zhengyu ZHAO Xiangyang

Suzhou Institute for Food and Drug Control in Anhui Province，Suzhou 234000，China

[Abstract] Objective To establish the methods of determination of paeoniflorin in Antai Yimu Pill. Methods HPLC was used and acetonitrile-water（15∶85） mixture as a mobile phase. The detection wavelength was set at 230nm. Results Paeoniflorin showed a good linear relationship at a ranger of （15.40-154.00）μg/mL，（r=0.9999）. The average recovery was 99.6%，and RSD was 0.64%（n=6）. Conclusion The method is simple with good reproducibility and can be used in quality control of Antai Yimu Pill.

[Key words] HPLC；Antai Yimu Pill；Paeoniflorin

安胎益母丸是衛生部中藥成方制劑第十二冊的品種，由益母草、香附、川芎、當歸、續斷、艾葉、白芍、白術等17味中藥組成，具有調經、活血、安胎的功效，用于氣血兩虧、月經不調、胎動不安。本研究參考相關文獻[1-5]對處方中的白芍建立了含量測定方法，為有效控制該藥物的內在質量提供了專屬性強、操作簡便、快速、準確的方法，現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1260高效液相色譜儀；十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱；1260VWD紫外可變波長檢測器；Agilent C18色譜柱；梅特勒AB-135S電子分析天平（0.01mg）。

1.2 試藥

芍藥苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110736-200732）；安胎益母丸（安徽雪楓制藥廠，批號：20090703，20090904， 20091003）。試劑：水為純化水，乙腈為色譜純，甲醇為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件及系統適用性試驗

色譜柱：Agilent C18（4.6mm×150mm；5.0μm）；流動相：乙腈-水（15∶85）；流速：1.0mL/min；檢測波長為230nm；進樣量：10μL。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取芍藥苷對照品適量（置P2O5干燥器中真空干燥24h），加甲醇制成每1mL含芍藥苷0.154mg的溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取本品研細，精密稱取4g，置錐形瓶中，精密加甲醇50mL，密塞，稱定重量，超聲處理30min，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，經0.45μm微孔濾膜過濾，即得供試品溶液。同法，制得不含白芍的陰性對照液。

2.4 陰性對照試驗

按照本品的處方、制法制備不含白芍的模擬樣品，按供試品溶液制備方法制成白芍陰性對照溶液，將芍藥苷對照品溶液、供試品溶液和白芍陰性對照溶液分別注入高效液相色譜儀進行測定，結果表明處方中其它成分不干擾芍藥苷的測定。見圖1。

2.5 線性關系考察

精密吸取對照品溶液1、2、4、6、8、10μL注入液相色譜儀進行分析。以芍藥苷峰面積值為縱坐標，進樣量為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸方程Y=1164.60X+28.14，r=0.9999。結果表明芍藥苷在（0.154～1.54）μg/mL范圍內呈良好的線性關系。

2.6 精密度試驗

取同一供試品溶液（批號：20090703），精密量取10μL，注入液相色譜儀，重復進樣5次，測定峰面積，結果芍藥苷峰面積RSD為0.45%（n=5），表明精密度良好。

2.7 穩定性試驗

取同一供試品溶液（批號：20090703），每隔2h進樣10μL，依法測定芍藥苷峰面積值，RSD為芍藥苷0.36%（n=6），結果表明供試品溶液在12h內穩定。

2.8 加樣回收率試驗

精密稱取已知含量的安胎益母丸（批號：20090703）6份，分別精密加入芍藥苷對照品適量，精密加50mL甲醇，按含量測定方法制備供試品溶液，依法測定，計算回收率。見表1。

2.9 樣品測定

取本品研細，精密稱取4g，置錐形瓶中，精密加甲醇50mL，密塞，稱定重量，超聲處理30min，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，經0.45μm微孔濾膜過濾，精密量取10μL，注入液相色譜儀，計算芍藥苷含量。見表2。

3 討論

3.1 測定波長的選擇

取本品供試品溶液，經紫外分光光度計全波長掃描，發現在230.1nm處吸收強度大，確定230nm為檢查波長。

3.2 流動相的選擇

試驗摸索階段分別用乙腈-水（15∶85）、甲醇-水-冰醋酸（15∶90∶1.0）、乙腈-0.05%冰醋酸（17∶83）為流動相進行試驗，考察了分離度、理論塔板數等情況，綜合考慮以乙腈-水（15∶85）為流動相時，芍藥苷分離效果和適用性較好。

本文擬定的含量測定方法簡便、快速、重現性好，為安胎益母丸的質量檢查提供了實驗依據。

[參考文獻]

[1] 李亞紅，王鳳雙，袁兆坤. HPLC測定八珍益母片中芍藥苷的含量[J]. 安徽醫藥，2009，13（8）：898-899.

[2] 高立金，郭志鵬. RP-HPLC法測定柴黃升板顆粒中芍藥苷的含量[J]. 中國藥師，2009，12（9）：1264-1265.

[3] 易潤青，李藝，宋粉云. HPLC法測定清瘟解毒片中芍藥苷的含量[J]. 廣東藥學院學報，2009，25（4）：379-381.

[4] 楊忠蘭，石尚友. RP-HPLC法測定血府逐瘀口服液中芍藥苷的含量[J]. 中國藥房，2008，19（21）：1648-1649.

[5] 陳艷霞. HPLC測定九味乳安糖漿中芍藥苷的含量[J]. 中成藥，2008， 30（9）：I0023-I0024.

（收稿日期：2011-10-08）