抑郁癥患者血清S100B蛋白及其分泌型糖基化終產(chǎn)物受體的研究☆

楊孔軍 榮晗 劉鐵榜 馮飛 楊海晨 彭江發(fā) 位照國 齊立國 鄧小敏

抑郁癥患者神經(jīng)膠質(zhì)細胞數(shù)量和功能的改變可能是抑郁癥發(fā)生的重要原因之一［1］。研究表明，神經(jīng)膠質(zhì)細胞能合成和釋放一種細胞因子―S100B。S100B是一種鈣結(jié)合蛋白，可作為神經(jīng)膠質(zhì)細胞特異性標記物之一［2］。已有研究表明，抑郁癥患者血清S100B水平顯著升高，且有可能作為抑郁癥疾病的狀態(tài)標記［3］。已證實，在原代培養(yǎng)神經(jīng)元中S100B可通過激活分泌型糖基化終產(chǎn)物受體(endogenous secretory receptor for advanced glycation end products，esRAGE)來發(fā)揮作用［4］。而RAGE mRNA選擇性剪接產(chǎn)生的esRAGE在循環(huán)中表達豐富［5］。我們既往對于抑郁癥模型大鼠的研究顯示，S100B與其受體RAGE/esRAGE在海馬與腦脊液的表達有變化［6］。目前尚未見抑郁癥患者血清S100B的受體esRAGE表達水平的報道。故本研究以抑郁癥患者為研究對象，測定血清S100B與esRAGE水平在患者中的改變及其與臨床特征間的關(guān)聯(lián)，進一步探討膠質(zhì)細胞因子S100B在抑郁癥發(fā)病中的作用。

1 對象與方法

1.1 研究對象 來自2009年2月至2010年10月間深圳市康寧醫(yī)院門診或住院的抑郁癥患者。入組標準:①符合美國精神障礙診斷和統(tǒng)計手冊第4版(DSM-Ⅳ)關(guān)于抑郁癥的診斷標準;②17項漢密爾頓抑郁量表總分≥18分。排除標準:①孕婦或哺乳期婦女，青光眼或慢性尿潴留(因其治療用藥可能影響es-RAGE的表達水平)，嚴重的軀體疾病目前病情不穩(wěn)定者;②接受胍乙啶、利血平、可樂寧或甲基多巴治療的高血壓者，心臟傳導阻滯者;③有抽搐病史，器質(zhì)性精神障礙(包括物質(zhì)濫用者)，精神病性障礙;④長期使用鋰鹽、2周內(nèi)使用單胺氧化酶抑制劑、4周內(nèi)使用其他研究藥物者。共入組34例，首發(fā)15例，復發(fā)19例。年齡18～50歲，平均(35.69±8.27)歲，總病程(4.32±1.21)年。首發(fā)抑郁癥組是指首次發(fā)病的門診和住院患者。

正常對照組為本院職工，HAMD-17總分≤7分，無重大軀體疾病、遺傳性疾病，既往無精神病史及精神疾病陽性家族史。共34名，男性14名，女性20名，年齡18～50歲，平均(34.98±7.39)歲。患者組與對照組的性別比例相同，兩組間年齡的差異無統(tǒng)計學意義(P ＞0.05)。

本研究經(jīng)深圳市康寧醫(yī)院倫理委員會批準，所有研究對象均自愿參加并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料的收集 患者在入組時由兩名經(jīng)過培訓的副主任醫(yī)師進行HAMD的評定(Kappa=0.90)。同時收集患者及對照的一般人口學資料、首次發(fā)病年齡、總病程、本次病程等其他臨床資料。

1.2.2 血清S100B及內(nèi)源性分泌型糖基化終產(chǎn)物受體的測定 所有研究對象均在早晨6:30～7:30 AM之間空腹抽取肘靜脈血5 mL，在自然狀態(tài)下放置半小時后，3000轉(zhuǎn)/分離心10 min，分離出血清，放入－80℃冰箱內(nèi)凍存。最后統(tǒng)一檢測血清S100B及內(nèi)源性分泌型糖基化終產(chǎn)物受體。二者的檢測均采用酶聯(lián)免疫方法，采用上海衍勝公司的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，二者的檢測均嚴格按照說明書進行操作。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS13.0進行統(tǒng)計分析。兩組間血清S100B與esRAGE水平的比較采用獨立樣本t檢驗，首發(fā)和復發(fā)患者組、對照組之間的比較用方差分析。S100B與esRAGE影響因素的分析采用Pearson相關(guān)分析。檢驗水準α=0.05，雙側(cè)檢驗。

2 結(jié)果

2.1 血清S100B與esRAGE水平的比較 如表1所示，抑郁癥組血清S100B濃度高于對照組，其esRAGE濃度低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(t=4.72，P＜0.01;F=3.79，P＜0.01)。進一步將患者分層分析，首發(fā)患者組、復發(fā)患者組和對照組之間血清S100B與es-RAGE濃度的差異有統(tǒng)計學意義(F=7.61，P＜0.01;F=8.42，P＜0.01)，兩兩比較顯示，首發(fā)患者組血清S100B與esRAGE濃度低于復發(fā)患者組(P＜0.01)，與對照組相比，首發(fā)與復發(fā)患者組血清S100B濃度均明顯上升，而esRAGE濃度均明顯下降，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。男性與女性抑郁癥組S100B與esRAGE濃度的差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。

2.2 抑郁癥組血清S100B、esRAGE濃度與臨床特征的相關(guān)性 將抑郁癥組血清S100B與esRAGE濃度行相關(guān)分析，并分別將兩者的表達水平與患者年齡、首次發(fā)病年齡、病程、HAMD評分間行相關(guān)分析。結(jié)果顯示，血清S100B與esRAGE表達水平無相關(guān)(r=－0.27，P＞0.05);血清S100B蛋白濃度與年齡、首次發(fā)病年齡、總病程、本次病程、HAMD總分無相關(guān)性(r分別為－0.08、－0.08、－0.07 、0.02、－0.2，P 均大于0.05)，esRAGE蛋白濃度與年齡、首次發(fā)病年齡、總病程、本次病程、HAMD總分無相關(guān)性(r分別為－0.05、－0.04、－0.61、－0.12、0.37，P 均大于0.05)，盡管個別 r值較大，但P仍大于0.05。

表1 各組血清S100B與esRAGE水平及漢密爾頓抑郁量表評分比較

3 討論

本研究結(jié)果表明，抑郁癥組血清S100B濃度高于對照組。楊坤等［7］對54例抑郁癥患者的臨床研究以及Arolt等［3］針對180例抑郁癥患者的薈萃分析的結(jié)果均表明，抑郁癥患者組的血清S100B濃度較對照組升高，本研究結(jié)果與二者一致。結(jié)果均提示，S100B作為膠質(zhì)細胞分泌的細胞因子，可能參與了抑郁癥的發(fā)病。S100B蛋白水平升高的可能機制為抑郁癥導致了神經(jīng)膠質(zhì)細胞的損傷，破碎的細胞釋放出其胞漿中S100B 蛋白從而釋放入血［8］。但 Sharma等［9］研究認為，抑郁癥的膠質(zhì)細胞病理主要表現(xiàn)為膠質(zhì)細胞的密度降低，沒有發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)細胞破裂等明顯損害性改變，故推測S100B蛋白表達水平的增高可能與膠質(zhì)細胞主動合成釋放s100B有關(guān)。因此，其推測抑郁癥組血清S100B濃度的增高可能是一種代償性增高，即增高的S100B對神經(jīng)元或機體具有保護作用。具體機制仍需進一步研究。

本研究結(jié)果同時表明，S100B的受體血清esRAGE濃度在抑郁癥患者中明顯降低，這與抑郁癥組血清S100B的表達相反，且兩者表達變化無相關(guān)性。提示S100B與其受體esRAGE在抑郁癥血清中的變化不一致。但我們前期的動物實驗結(jié)果顯示二者在中樞的變化是一致的，即S100B與其受體esRAGE在抑郁模型大鼠海馬及腦脊液中的變化一致［6］。S100B與其受體esRAGE的表達在血清中不一致但在中樞表達卻一致，這看似有些矛盾。其原因可能由于血清中S100B及受體esRAGE的來源尚不明確有關(guān)。推測血清中S100B及esRAGE可能來源于體內(nèi)其它組織或器官而并非完全來自于中樞神經(jīng)元與膠質(zhì)細胞。由于目前國內(nèi)外同類研究多集中在抑郁癥患者S100B而缺少esRAGE的研究報道，故本研究的結(jié)果有待于進一步證實。

本研究結(jié)果顯示，抑郁癥組復發(fā)患者血清S100B較首發(fā)患者明顯升高，這與過斌等［10］發(fā)現(xiàn)血清S100B的表達與抑郁癥患者發(fā)病次數(shù)相關(guān)這一研究結(jié)果一致;而本研究同時還顯示S100B的受體esRAGE在復發(fā)患者中較首發(fā)患者中明顯升高，分析可能與復發(fā)抑郁癥患者的神經(jīng)膠質(zhì)細胞代償性分泌S100B的能力進一步增強有關(guān)，從而分泌更多的S100B對機體發(fā)揮保護作用［10］。但具體機制有待于進一步研究。

本研究結(jié)果顯示，抑郁癥組血清S100B與其受體esRAGE的表達與患者年齡、首次發(fā)病年齡、總病程、本次病程、HAMD評分均無相關(guān)性。Schroter等［11］對20例抑郁癥患者的研究顯示，血清S100B可作為抑郁癥的敏感可靠的生物標記，且表達程度與疾病的嚴重程度相關(guān)。關(guān)曉峰等［12］的研究也同 Schroter等［11］的研究一致，結(jié)果顯示首發(fā)抑郁癥患者血清S100B表達程度與疾病的嚴重程度相關(guān)。但楊坤等［7］對54例抑郁癥患者的臨床研究未發(fā)現(xiàn)血清S100B表達程度與疾病的嚴重程度相關(guān)，本研究結(jié)果與其一致。分析上述研究結(jié)果不一致的原因，可能與種族或區(qū)域差異有關(guān)，也可能與研究對象有的僅首發(fā)患者而有的包括了首發(fā)及復發(fā)患者有關(guān)。

綜上，膠質(zhì)源性細胞因子S100B在抑郁癥患者血清中的升高與其受體esRAGE在抑郁癥患者血清中的降低在抑郁癥中起了一定的作用;同時，復發(fā)患者血清S100B及受體較首發(fā)患者明顯升高，提示首發(fā)與復發(fā)患者神經(jīng)膠質(zhì)細胞分泌S100B能力不一樣。但由于本研究樣本量較小，研究結(jié)果尚需進一步證實。

［1］Ongur D，Drevets WC，Price JL.Glial reduction in the subgenual prefrontal cortex in mood disorders［J］.Proc Nat Acad Sci USA，1998，95(22):13290－13295.

［2］Grabe HJ，Ahrens N，Rose HJ，et al.Neurotrophic factor S100beta in major depression［J］.Neuropsychobiology，2001，44(8):88 －90.

［3］Arolt V，Peters M，Erfurth A，et al.S100B and response to treatment in major depression:a pilot study［J］.Eur Neuropsychopharmacol，2003，13(4):235 －239.

［4］Huttunen HJ，Kuja-Panula J，Sorci G.，et al.The biology of the receptor for advanced glycation end products and its ligands［J］.Biochim Biophys Acta，2000，1498(2－3):99－111.

［5］Santilli F，Vazzana N，Bucciarelli LG，et al.Soluble forms of RAGE in human diseases:clinical and therapeutical implications［J］.Curr Med Chem，2009，16(8):940－952.

［6］Rong H，Wang GH，Liu TB，et al.Chronic Mild Stress Induces Fluoxetine-Reversible Decreases in hippocampal and cerebrospinal fluid levels of the neurotrophic factor S100B and its specific receptor［J］.Int J Mol Sci，2010，11(12):5310 － 5322.

［7］楊坤，謝光榮，胡義秋，等.抑郁癥患者血清S100B水平的研究［J］.中國神經(jīng)精神疾病雜志，2007，33(11):681－682.

［8］Rothermundt M，Arolt V，Wiesmann M，et al.S100B is increased inmelancholic but not in non Melancholic major depression［J］.J Affect Disord，2001，66(1):89－93.

［9］Sharma G，Vijayaraghavan S.Nicotinic cholinergic signalingin hippocampal astrocytes involves calcium-induced calciuml～lease from intracellular stores［J］.Proc Natl Acad Sci，2001，98(7):4148－4153.

［10］過斌，譚云龍，楊甫德，等.抑郁癥患者血清S100B蛋白濃度變化［J］.中國心理衛(wèi)生雜志，2009，23(3):188 －191.

［11］Schroter ML，Abdul KH，Krebs M，et al.Serum markers support disease specific glial pathology in major depression［J］.J Affect Disord，2008，111(2－3):271－280.

［12］關(guān)曉峰，胡建，關(guān)悅，等.血清S100B蛋白水平與首發(fā)抑郁癥關(guān)系的研究［J］.中國神經(jīng)精神疾病雜志，2008，34(7):431－432.