支氣管肺發育不良患兒尿LTE4水平變化的臨床意義

[摘要]目的 連續測定高危早產兒出生后到6個月各階段尿中白三烯E4(LTE4)的水平，探討其與支氣管肺發育不良患兒的關系。方法 選擇在本院住院的高危早產兒15例，新生兒15例。早產兒留取第2、7、14、28天的尿液，新生兒取第2、7、14、28天尿液作對照，采用酶聯免疫吸附(ELISA)法檢測LTE4水平。結果 正常新生兒的LTE4維持在較低的水平，早產兒一周內的LTE4水平也變化不大，14天時早產兒LTE4水平開始上升，與正常新生兒相比二者有顯著性差異(P<0.01)，早產兒28天后的LTE4水平維持高水平(P<0.01)。結論 LTE4是哮喘的重要炎性反應介質，與患兒吸氧、呼吸機、肺不成熟密切相關，連續監測尿液LTE4水平對早產兒支氣管肺發育不良(BPD)的早期診斷、指導治療支氣管肺發育不良及改善預后具有重要作用。

[關鍵詞] 支氣管肺發育不良;新生兒;早產兒;LTE4水平

[中圖分類號] R722 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)12-80-02

Changes of Urinary LTE4 Level in Children with Bronchopulmonary Dysplasia:Clinical Significance

HE WeihengMEI Jiaping LIANG Qiwen

Shenzhen Maternal﹠Child Healthcare Hospital，Shenzhen 518028，China

[Abstract] Objective To observe the urine leukotrienes E4 levels(LTE4) of high-risk premature babies from being born to six months and explore the relationship between bronchopulmonary dysplasia(BPD) and the urine LTE4 level. Methods According to the diagnosis criteria，the urinary LTE 4 levels of two groups(one group included 15 premature children and the other 15 full-term children) were detected on Day 2，14 and 28 respectively by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) method， and the statistical analysis was made by using SPSS15.0 software. Results The urinary LTE4 of full-term children was maintained at a relatively lower level. The urinary LTE 4 level of premature children showed little change within the first 7 days，but after 14 days，the level began to rise， remarkably higher than that of the full-term babies(P<0.01)， and the urinary LTE4 of premature children was still at a higher level after 28 days(P<0.01). Conclusion The urinary LTE4 is an important inflammatory mediator of asthma，and closely related to children oxygen uptake， breathing machine and lung immaturity. To observe the urine LTE4 level of premature children is important for the early diagnosis of， and the guidance of treatment of，BPD and the improvement its prognosis.

[Key words] Bronchopulmonary dysplasia;Newborn;Premature children;Urine leukotrienes E4 level

支氣管肺發育不良(BPD)是一種慢性疾病，其發生與正壓通氣、高濃度給氧、早產兒肺發育不成熟、感染炎癥致肺損傷密切相關;白三烯E4(LTE4)為白三烯的代謝終產物，通過作用于白三烯受體導致呼吸道阻塞及呼吸道炎癥反應，在支氣管肺發育不良患兒中起效應介質作用。LTE4水平與氣道炎癥、肺功能惡化的研究正在逐步深入。本研究旨在通過連續測定高危早產兒出生后尿中白三烯E4的水平，探討高危早產兒與正常新生兒尿中白三烯的關系。

1資料與方法

1.1一般資料

2008年8月～2009年5月在本院住院的高危早產兒(孕周<33周，體重<1500g)15例，其中男8例，女7例;正常新生兒15例，男9例，女6例。同時收集臨床指標(孕周、體重、疾病、用氧、呼吸機參數、感染因素、治療情況等)。

1.2方法

收集早產兒出生后2天、7天、14天、28天時的尿液;收集正常新生兒生后2天、7天、14天清晨第一次尿液或24小時尿液;2000r/min離心15min后收集上清1mL，并將標本保存于-20℃，且應避免反復凍融，采用酶聯免疫吸附(ELISA)法測定尿液中LTE4水平(試劑盒由武漢中美科技有限公司提供)，結果以pg/mL為單位，檢測靈敏度為1.95pg/mL，每次均有相應的標準品作質控。

1.3統計學處理

采用SPSS15.0軟件分析，數據以(χ±s)表示。均數比較采用配對t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

早產兒和新生兒各時段尿LTE4水平檢測結果見表1。新生兒及早產兒2天的尿LTE4水平兩組均值比較t值為2.3，P>0.05;7天的兩組數據相比t值為6.4，P<0.01。新生兒及早產兒14天的尿LTE4水平兩組均值比較t值為6.7，P<0.01，差異有統計學意義;28d的早產兒組，其尿液的LTE4維持在高水平，與對應的新生兒數據相比也存在顯著性差異。

3 討論

BPD是以肺功能改變為特征的疾病。1967年Northway最早將支氣管肺發育不良(BPD)定義為生后28天仍需氧;以后Bancalari將BPD定義為生后28天時機械通氣并需氧(維持PaO2>50mmHg)，胸片異常。Shannon建議采用校正胎齡36周仍需氧定義BPD，認為此定義更能準確地預測肺的預后。因此BPD的早期診斷標準并不正確。而有人在BPD患兒的嬰兒后期發現與健康同齡嬰兒相比，其尿中白三烯E4水平增高，提示LTE4可能在BPD的發生、發展中起到一定作用[1]。

在BPD的發病機制中，早產兒肺不成熟，出生早期肺部原發病-HMD是發生的基礎，其中氧自由基、炎癥因子損傷起重要作用，BPD患兒存在明顯的氣道高反應。

Ferreira等[2]報道，在BPD患兒支氣管肺泡沖洗液(BALF)中發現粒細胞與肺水腫具相關性，肺中性粒細胞聚集時患兒外周血中性粒細胞減少，BPD患兒體內多種炎性因子表達水平上調(如IL-Ia，IL-6，TNF-β等)。從皮質激素(GC)治療的有效性表示炎癥反應在BPD發病中的作用。

Adams使用MRI對20例嬰兒及35例23～33周患兒肺檢查，根據圖像的相對質子密度來判斷積水量和分布情況。結果在BPD嚴重患兒，平均質子密度、圖像質子密度梯度和肺損傷的嚴重度較高，以肺后葉最重，BPD與較高的肺水負荷和重力依賴的肺不張及肺泡積液有關，這些局灶性組織損傷呈不均勻分布。

早在上世紀30年代，白三烯作為過敏反應中慢反應物質已經被認識，白三烯參與了氣道炎癥細胞聚集和炎癥介質釋放，增加血管通透性和滲出，誘發氣道高反應性，促使氣道平滑肌收縮和增殖以及氣道重塑，是氣道炎癥的重要介質[3]，分為白三烯A4、白三烯B4、白三烯C4、白三烯D4和白三烯E4五個類型，主要來源于嗜酸粒細胞、肥大細胞、中性粒細胞和肺泡巨噬細胞等。上述細胞在活化狀態下，細胞和核膜的脂質雙層經磷脂酶A2代謝產生花生四烯酸，花生四烯酸經5-脂氧化酶途徑(5-lipoxygenase pathway)代謝生成白三烯[4]。其中，白三烯A4最先形成，并很快轉化為白三烯B4、白三烯D4和白三烯E4，分別為白三烯C4的半胱酰型[5]。白三烯在變應性炎性反應中的作用主要有:①作為嗜酸粒細胞的趨化因子:導致組織中嗜酸粒細胞浸潤增多，相應地產生更多CysLTs，而嗜酸粒細胞釋放嗜酸粒細胞陽離子蛋白等細胞毒性蛋白，導致組織病理學改變;②調節腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α，TNFα)、IL-6和黏附分子等細胞因子的產量;③上調巨噬細胞和平滑肌細胞組胺受體的表達水平，放大機體對組胺的反應。由于炎性介質刺激了CysLTs的產量，后者可通過增加IL-5、GM-CSF和TGF-β等Th2細胞因子的產量調節免疫反應[6]，因此，CysLTs對呼吸道變應性的病理生理學過程起重要作用。BPD患兒存在明顯的氣道高反應，甚至早產兒無論有無HMD都有這種趨勢。究竟是先天性易患病的體質，還是新生兒期的炎性肺損傷，亦或小氣道的解剖學的異常還不清楚。

本課題采用全盲的前瞻性的控制研究，通過測定高危早產兒(孕周<33周，體重<1500g)生后2天、7天、14天、28天以至更長時間或校正胎齡36周時尿中LTE4的水平，收集臨床指標(孕周、體重、疾病、用氧、呼吸機參數、感染因素、治療情況等)于生后28d或校正胎齡36周時根據《實用新生兒學》第三版BPD的診斷標準探討LTE4對BPD的早期診斷意義。通過連續測定高危早產兒生后第2、7、14、28天尿中白三烯E4的水平并與正常新生兒組對照，發現正常新生兒尿中白三烯E4水平維持在一相對低的水平，期間變化不明顯(P>0.05)，并無明顯的臨床意義;早產兒情況則不同，早產兒7天內的LTE4水平與正常新生兒相比無明顯變化(P>0.05)，但早產兒由于體重偏低，隨著介入治療如呼吸機使用、吸氧、應用藥物增多等，其尿中白三烯E4的水平開始上升，從測定的數據看，14d的早產兒與新生兒比已有顯著性差異(P<0.01)。BPD涉及一系列炎性細胞和炎癥介質的復雜過程，白三烯是重要炎癥介質之一，它對于BPD的發生發展起著關鍵作用。本研究表明尿中LTE4濃度的變化與肺功能的變化呈顯著相關性，白三烯在上下呼吸道的炎癥中起重要作用。隨著本研究的進一步深入，了解尿中LTE4水平對BPD患兒中遠期預后及治療的指導意義將會更加明晰。

[參考文獻]

[1] 金漢珍，黃德珉，官希吉. 實用新生兒學[M]. 第3版. 北京:人民衛生出版社，2003:445-459.

[2] Ferreira PJ， Bunch TJ， Albertine KH，et al. Circulating neutrophil concentration and respiratory distress in premature infants[J]. J Pediatr，2000，136(4):466-472.

[3] 連朝輝，楊傳忠，朱小瑜. 支氣管肺發育不良的早期診治及預后研究[J]. 小兒急救醫學，2004，11(1):39-40.

[4] 歐維琳，朱春江，黃健，等. 白三烯D-4對白細胞介素4誘導嗜酸性粒細胞趨化因子-3在支氣管上皮細胞表達的影響[J]. 中國實用兒科雜志， 2007，22(4):285.

[5] 李艷華，方鳳，蔣瑾瑾，等. 小兒上呼吸道感染過程尿白三烯水平的變化[J]. 江蘇醫藥， 2007，33(3):302-303.

[6] 劉煥，謝玉. 嬰幼兒喘息性疾病血白三烯B4濃度研究[J]. 當代醫學，2009，12:4-6.

(收稿日期:2010-02-23)