染色體核型與急性髓系白血病誘導成功的關系

[摘要] 目的 評價染色體核型在急性髓系白血病(AML)WHO 分型系統(tǒng)中的作用。方法 107例AML患者按WHO標準進行分型診斷，并對診斷后各亞型之間的誘導化療完全緩解率(CR)進行分析。結果 AML中伴有重現染色體異常36例(33.6%)，染色體核型均為低危;伴有多系發(fā)育異常24例(22.4%)，染色體核型中危17例、高危7例;不另做分類占47例(43.0%)，染色體核型中危39例、高危8例。伴t(8;21)和伴inv(16)或t(16;16)患者的誘導化療CR 率顯著高于不另做分類的(P<0.05)。有多系增生異常患者的誘導化療CR率明顯低于無多系增生異?；颊?P<0.05)。結論 AML各亞型之間誘導化療CR率不同，細胞遺傳學是預測急性髓系白血病達到CR最有用的因子之一。

[關鍵詞] 白血病，髓系，急性;染色體核型;WHO 分型

[中圖分類號] R733.31 [文獻標識碼] A[文章編號] 1673-9701(2010)12-03-03

Relationship between Chromosome Karyotype and Induction Success in Acute Myeloid Leukemia

PAN Xin1WANG Xiaomin2CHI Hongmei2ZHU Lin2LI Yan2FU Ling2MAO Min2ZHANG Xiaoyan2

1.Postgraduate College of Xinjiang Medical University， Urumuqi 830000，China;2.Department of Hematology，People’sHospital of Xinjiang Uygur Autonomous Region， Urumuqi 830000，China

[Abstract] Objective To explore the role of chromosome karyotype in the WHO classification of acute myeloid leukemia(AML). Methods One hundred and seven patients were diagnosed as AML according to the WHO classification. A comparative analysis was made of the complete remission rate(CR) of preoperative induction chemotherapy between the various subtypes. Results In 107 cases of AML，36 cases(33.6%) showedthe recurrent chromosome abnormalities and chromosome karyotype was of favorable risk， 24 cases(22.4%) showed multilineage dysplasia，17 cases were of intermediate risk and 7 cases were of high risk. And other 47 cases(43.0%) failed to be categorized，in which 39 cases were of intermediate risk and 8 cases were of high risk. The CR rate of induction chemotherapy in the AML cases with t(8;21)and AML with inv(16)or t(16;16)was significantly higher than that of those cases that failed to be categorized(P<0.05). The CR rate of induction chemotherapy in the AML cases with multilineage dysplasia was significantly lower than that of the AML cases without multilineage dysplasia(P<0.05). Conclusion The CR rates of induction chemotherapy are different between the various subtypes of AML， and cell genetics is one of the most useful factors for predicting the attainment of CR in AML.

[key words] Leukemia;Myeloid，acute;Chromosome karyotype;WHO classification

“WHO 造血組織和淋巴組織腫瘤分類方案(2001)”以白血病免疫學、細胞遺傳學、分子生物學特征更新了白血病的診斷，使其與現代白血病治療策略的制定相適應[1，2]，其中細胞遺傳學分析對于AML尤為重要，大多數AML患者都存在非隨機的染色體異常，對于診斷分型、治療選擇及療效評價有至關重要的作用[3，4]。本文對我院按WHO 標準進行分型診斷的107例AML患者的完全緩解率進行分析，并探討細胞遺傳學的作用，現報道如下。

1資料與方法

1.1病例選擇

2007年3月～2009 年6月按WHO標準確診的初治AML患者共107例，其中男69例，女38 例。平均年齡為45.5(3～79)歲。

1.2分型

按WHO 標準進行分型:結合患者的臨床病史、細胞形態(tài)學、細胞/分子遺傳學、免疫表型分析等資料按WHO 標準[1，2]進行診斷分型。具體方法如下:分類計數患者的骨髓片和血片，分類計數200個骨髓有核細胞和100個外周血有核細胞。原始細胞計數方法為:原始細胞包括原始粒細胞I 型和原始粒細胞Ⅱ型，此外M2b是以異常的中性中幼粒細胞為主，M4和M5還包括原始和幼稚單核細胞，M7還包括原始巨核細胞，急性早幼粒細胞白血病(APL)還包括異常早幼粒細胞。單獨分類各系細胞確定各系發(fā)育異常。標準為:1)紅系，計數100個有核紅細胞，病態(tài)造血為巨幼樣變、核碎裂、核分葉或多核、環(huán)狀鐵粒幼細胞，胞漿空泡;2)粒系，計數100個中性粒細胞，病態(tài)造血為胞漿顆粒減少、假Pelger-Hu?觕t 異常和過分葉核細胞;3)巨核系，瑞-吉染色骨髓涂片計數至少25個巨核細胞，病態(tài)造血為小巨核細胞、單葉核或多核巨核細胞。AML 伴有多系發(fā)育異常的診斷標準為至少兩系≥50%的細胞有病態(tài)造血。應用流式細胞儀免疫表型檢測協助診斷分型。

1.3染色體核型分析

取患者骨髓，經1640培養(yǎng)基24h培養(yǎng)后，用秋水仙酰胺阻留中期分裂相，收集有絲分裂象細胞常規(guī)制片，經過R顯帶及吉姆薩染色，根據細胞遺傳學國際命名體制(ISCN，1995)識別和描述[3]。

1.4融合基因檢測

用RT-PCR法檢測AML1-ETOPM，L-RARα和CBFB- MYH11，具體方法見文獻[5]。

1.5治療

M3誘導治療采用全反式維甲酸或全反式維甲酸加三氧化二砷雙誘導治療，其余均采用標準劑量的DA方案聯合方案治療，年齡>60歲患者應用CAG或HAG方案化療[6]。

1.6統(tǒng)計學處理

采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件包，行χ2檢驗。

2結果

(1)本系列分析的AML共有107例，按WHO分型構成比為:AML伴有重現染色體異常占33.6%(36例)，AML伴有多系發(fā)育異常占22.4%(24例)，無治療相關性AML，AML不另做分類占43.0%(47例)?；颊甙碬HO分型各亞型構成比及化療完全緩解比率見表1。

(2)AML伴t(8;21)/AML1-ETO共9例，按國內AML標準確診的M2b 5例，余為M2a 4例;AML伴inv(16)(p13q22)或t(16;16)(p13;q22)/CBFB-MYH11與M4Eo 的吻合率為100%;AML 伴t(15;17)/PML-RARα25例，其中誘導治療一療程后達CR 23例(92%)，未緩解2例，其中1例患者出現心梗、另1例心功能不全難以耐受治療。無一例11q23異常。

(3)24例AML伴有多系增生異?；颊撸小门壤秊?6∶8，繼發(fā)于MDS伴有多系病態(tài)血AML 22例，無先期MDS伴有多系病態(tài)造血AML 2例。這類患者骨髓原始細胞比例(中位數為28.97%)明顯低于無病態(tài)造血的AML(P<0.05)，其高危核型檢出率(29.17%)明顯高于無多系增生異?；颊?9.63%)(P<0.05)。

(4)3例患者出現t(9;22)(q34;q11)核型，分別為:2例M4，其中之一為慢性粒細胞白血病轉化而來，應用DA方案化療未緩解，另1例給予化療后緩解，不久即復發(fā);1例M6應用化療效果差，未緩解。

(5)AML伴t(8;21)和AML 伴inv(16)或t(16;16)患者的誘導化療CR 率81.8%，顯著高于不另做分類的AML患者46.8%(P<0.05)，見表2。不另做分類的AML患者染色體核型中危39例、高危8例。

(6)有多系增生異?；颊叩恼T導化療CR 率20.8%，明顯低于無多系增生異?；颊?5.1%(P<0.05)。見表3。有多系增生異常患者染色體核型染色體核型中危17例、高危7例，無多系增生異?；颊咧腥旧w核型低危所占比例為43.4%。

(7)染色體核型低?；颊呋烠R率88.9%，顯著高于染色體核型高?；颊?6.7%(P<0.05)，且高于染色體核型中?；颊?1.1%，患者按染色體核型預后分層構成比及化療完全緩解比率見表4。低危與中危核型患者化療CR率比較見表5。

3討論

急性白血病FAB 形態(tài)學分型因其對實驗室條件要求不高，得到廣泛應用，但該分型存在諸多不足，特別是未將判斷AML預后的染色體異常考慮在內。2001年的WHO造血組織和淋巴組織腫瘤分類方案對AML的診斷作了修改:外周血或骨髓原始細胞≥20%可診斷為AML。當患者被證實有克隆性重現性細胞遺傳學異常時，即使原始細胞<20%也應診斷為AML。伴有多細胞系病態(tài)造血的AML及治療相關性AML和MDS分別單獨劃分為獨立亞類，將M6 細分為紅系/粒單核系白血病和純紅系白血病。

我們的數據來源于一組新發(fā)急性髓系白血病，經過較長時間的隨訪，顯示了一些在診斷時發(fā)現的特異細胞遺傳學改變能預示治療結果。這個研究包括一群相對同質的新發(fā)急性髓系白血病患者，他們接受了類似的誘導化療。本系列提示WHO分型的AML伴inv(16)(p13q22)或t(16;16)(p13;q22)/CBFB-MYH11與FAB分型的M4Eo 的吻合率為100.0%，常規(guī)染色體核型難以識別inv(16)，所查2例M4Eo染色體核型為47，XY，+22[6]/48，XY，+8，+22[5]及46，XY，-7，+der(7)[1]/46，XY，N[8]，但CBFB-MYH11融合基因均陽性支持診斷，且其中1例有+22，相關研究提示+22與inv(16)相關[7]。本研究中伴t(15;17)/PML -RARα患者所占AML比例為23.4%，與根據染色體核型進行分析的大系列[8]的比例相似。本研究無一例11q23 異常，與Schoch 等[9]發(fā)現不一致，可能是收治患者及所分析病例數相對偏少所帶來的偏差。有多系發(fā)育異常AML的比例基本與文獻[8]報道一致，該亞型從近期療效來看明顯差于其他亞型，特別是此前有MDS病史者，第1療程CR率僅為18%，相對于無多系增生異常患者，其患者年齡大，重要臟器功能差，化療的耐受性差，化療后骨髓抑制期長，并發(fā)癥多。本系列治療相關性AML 比例明顯低于文獻報道[8]，可能與我國腫瘤現代聯合化療開展較西方國家晚且普及程度較差有關。3例患者出現t(9;22)(q34;q11)核型，治療預后差，與NCCN 2009 AML臨床指南將t(9;22)列為高危的細胞遺傳學指標相符和。

盡管本系列中收治患者及所分析病例數相對偏少，AML伴11q23/MLL、有多系發(fā)育異常AML和治療相關性AML病例數較少，且隨訪時間較短，尚不能進行各亞型之間的長期生存的比較，但現有分析結果表明，AML的WHO分型各亞型的一致性及與臨床療效相關性好，主要是由于細胞遺傳學是預測急性髓系白血病達到CR最有用的因子之一，而細胞遺傳學在WHO分型中占重要地位[10]。

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(收稿日期:2010-01-15)