血凝檢測結果影響因素的分析

[摘要] 目的 通過掌握和了解關于血凝檢測的影響因素，為確保正確的臨床治療提供保障。方法 對血凝檢測影響的各種因素進行分析。結果 嚴格執行正規操作要求，避免諸多不利因素的產生，確保檢驗結果準確性。結論 標本的采集與處理、試劑的使用、操作過程以及藥物等其他因素均會對血凝檢測結果產生影響，檢驗人員應掌握好熟練的操作技術，為臨床服務提供準確的數據。

[關鍵詞] 血凝檢測;抗凝劑;影響因素

[中圖分類號] R446.11+2[文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)12-83-02

血凝試驗是臨床工作中常用的檢測項目，血凝檢測結果的準確性是指導臨床正確治療的保障。血凝檢測影響因素很多，如樣本采集、運送、保存;試劑的使用、復溶、預溫及儲存;藥物使用、監控、參考范圍的確定;檢驗人員的熟練程度、是否正規操作等諸多因素都會導致檢測結果誤差。檢驗報告正確填寫或輸入檢驗報告的復核，其中每個環節都可能會影響檢測結果。對各種影響檢測結果作以下分析。

1標本采集與處理

1.1采血技術

1.1.1患者處于平靜、空腹狀態醫務人員應幫助患者消除緊張情緒，避免血小板、凝血因子的激活;止血帶不應拉得太緊，最好不要超過5min，必須順利“一針見血”，避免混入組織液或發生溶血。因為組織液中會有豐富的因子Ⅷ，可激活外源性凝血途徑，加速凝血酶原的消耗，使試驗結果偏低。采血液與抗凝劑混勻，不宜用力振搖，避免用力振蕩破壞凝血蛋白;宜采用真空采血管，可顛倒混勻。采血時有多管，宜采用第2管。采血時不能有氣泡，氣泡會使纖溶蛋白原、因子V、因子Ⅷ變性。

1.1.2試管要求一次性注射器，硅化玻璃管，要求2mL血量規格。

1.1.3抗凝劑選用常用的抗凝劑是枸櫞酸鈉。因為因子Ⅴ和因子Ⅷ在枸櫞酸鈉中穩定。不宜使用EDTA-2Na、肝素、草酸鹽抗凝。肝素影響還適用于接受肝素治療的病人的監測。而草酸鹽能與鈣離子形成不溶性沉淀物，影響血凝儀的光電終點。EDTA能抑制或干涉纖維蛋白凝塊形成纖維蛋白原單體聚合，且對因子Ⅴ保護性差。抗凝劑與全血的比例:抗凝劑與全血的比例為1∶9，不嚴格控制比例會改變血漿的鈣離子濃度而影響結果(要求血量與采血管標本的體積差要≤10%)。

1.2標本保存[1]

標本保存受時間和溫度影響，由于凝血因子易失活，室溫條件下，試管加塞避免CO2擴散而使pH改變。血漿標本原則上應立即檢測，血液一旦離體后即開始變化，隨離體的時間不同凝血因子逐漸消耗，從而檢測出的結果也不同。從標本采集起，PT 2h之內、TT 2h之內、APTT 2h之內完成檢測。凝血試驗在室溫保存4h內完成，如果不能及時檢測完成，放置4℃冰箱保存，24h內完成。不能完成將血漿放置在-20℃冷凍存放1周。試驗PT血漿應于37℃快速融化，不要超過10min;TT試劑預溫不宜超過30min，不能反復凍融。血液采集進入空器及進入實驗所用時間越短，凝血因子保護越好。

1.3標本運送和處理

最好在實驗室內采血，標本應隨采隨測，病房患者的標本盡快送到實驗室，盡量減少運輸和儲存時間，防止日光直射，以避免凝血因子降低酶活性。

3000r/min離心10min，標本離心后如發現有溶血或小凝塊應重抽，血中的乳糜微粒等將對血凝試驗結果造成干擾，應通知臨床醫生。出現這種情況都嚴重影響結果。

2試劑使用及要求

不同的凝血活酶試劑有不同的最佳適用范圍，應選用適合檢測的儀器，適合本實驗室目的凝血活酶，嚴格按照說明書使用，注意有效期和穩定性。取溶試劑使用后，立即放入冰箱2～8℃保存[2]，每次使用要求混勻，發現試劑混濁立即遺棄。復溶后的試劑不能反復凍融。嚴格控制好APTT試劑中的CaCl2濃度。試劑使用中要注意污染的問題，避免試劑瓶蓋錯蓋造成交叉污染;同一試劑用同一吸管或移液頭，不能交叉使用，否則會造成試劑標本的交叉污染。

更換不同批號的凝血活酶和部分凝血酶試劑時，必須要檢測正常對照。要建立本實驗室的參考范圍，每天做室內質控。

3操作的因素

操作技術對檢驗結果有很大的影響，某個環節不正確將會造成試驗結果的明顯變化。

檢查儀器電源、光源是否穩定，預熱時間或溫度是否正確。溫度過高過低都影響檢驗結果。檢查所有試劑、緩沖液、標本是否合格，如發現問題及時糾正。

每次檢測之前，應先檢測質控血漿的數值，以確保檢測結果的準確性。血漿預溫不宜超過10min。加試劑時量要準確，要防止氣泡的產生，有氣泡時凝血時間會延長，出現錯誤的結果。加樣器與反應杯垂直，加樣時間要掌握好，加樣動作要穩、準、快。既要讓反應杯與感應器充分接觸，又不能停頓時間過長。測定過程中應保持反應杯的清潔，防止異物掉入比色杯。

4藥物和其他因素

藥物本身影響凝血機制，如用肝素、華法林可抑制凝血酶，嚴重影響干擾凝血酶原試驗，使凝血酶原時間延長。DIC患者在早期血液處于高凝狀態，PT時間縮短，但在大量消耗凝血因子和產生的FDP拮抗凝酶的作用時，PI時間延長。

生理變化:妊娠、激動或劇烈運動精神緊張等因素都會影響凝血檢測的結果。在凝血檢測中，以上各種原因都會影響凝血檢測結果。出現異常結果時，應聯系咨詢病情，診斷是否用抗凝藥或在溶栓治療，抽血是否順利。檢驗人員收集標本一定要觀察采血量，有無凝血塊，離心后有無脂血，溶血觀察血漿的顏色，不合格的標本退回重抽，否則會造成不正確的結果。只有掌握和了解各種不利因素，才能避免出現錯誤的結果。保證質量才能更好為臨床服務，提供準確的數據。

[參考文獻]

[1] 李立青. 標本放置時間及溫度對凝血三項測定結果的影響[J]. 大理學院學報，2004，3(5):47.

[2] 肖秀林，陳紅宇，王昌富，等. PT和APTT樣本采集順序和保存溫度的探討[J]. 上海醫學檢驗雜志，2001，16(2):104.

[3] 劉穎燕，徐彩萍. 樣本采集對凝血檢測結果的影響[J]. 檢驗醫學，2008，23⑴:202.

(收稿日期:2010-02-03)