CD44v6在乳腺癌及乳腺腺病中的表達及其臨床意義

[摘要] 目的 探討CD44v6在乳腺癌及乳腺腺病中的表達變化與臨床病理意義。方法 應用免疫組織化學方法，分別檢測52例乳腺癌及15例乳腺腺病組織CD44v6的表達情況，分析其與臨床病理參數的關系。結果 CD44v6在乳腺癌中的陽性表達率78.8%(41/52)，在乳腺腺病中陽性表達率13.3%(2/15)，其差異有統計學意義(P<0.01)，并且其陽性表達率與腫瘤分化程度和淋巴結轉移密切相關(P<0.05)。結論 CD44v6的表達可能與乳腺癌的分化及患者預后相關。

[關鍵詞] CD44v6; 乳腺癌; 乳腺腺病; 免疫組織化學

[中圖分類號] R737.9 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)09-37-02

Expression of CD44v6 in Breast Cancer and Breast Adenosis and Its Significance

WEI Maofu1 YANG Yanli2 LIU Jingwen1

1.Department of Pathology，Dongguan Municipal Humen Hospital，Dongguan 523900，China;2.Department Three of Medicine，Dongguan Municipal Humen Hospital，Dongguan 523900，China

[Abstract] ObjectiveTo investigate the relationship between the CD44v6 expression in breast cancer and breast adenosis and the clinicopathologic features. MethodsThe CD44v6 expression was detected in 52 cases of breast cancer and 15 cases of breast adenosis by the immunohistochemical staining. ResultsThe positive rate of the CD44v6 expression in breast cancer was 78.8%(41/52)，significantly higher than that(13.3%，2/15)in breast adenosis(P<0.01). Its positive expression rate is closely related to the degree of tumor differentiation and lymph node metastasis(P<0.05). ConclusionThe CD44v6 expression may participate in the differentiation of breast cancer and be associated with its prognosis.

[Key words]CD44v6; Breast cancer; Adenosis; Immunohistochemistry

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤，臨床確診時約10%患者已經有轉移。因而在乳腺癌早診斷、早治療的同時，能夠找到可以合理預測乳腺癌浸潤、轉移等生物學行為的標記物，對于判斷乳腺癌的預后和指導乳腺癌的治療具有很重要的臨床意義。近年來很多實驗表明，CD44v6的表達與腫瘤的發生、發展、浸潤和轉移關系密切[1-3]。本實驗研究目的在于探討CD44v6在乳腺癌、乳腺腺病中的表達與臨床病理之間的關系。

1 材料與方法

1.1 標本來源

收集我院2000年3月～2008年3月手術切除經病理證實的乳腺癌標本52例，另外選取乳腺腺病標本15例作為對照。52例乳腺癌標本中，年齡28～72歲，平均52歲，術前均未作任何抗腫瘤治療。低級別乳腺癌12例，高級別乳腺癌40例，其中25例乳腺癌有淋巴結轉移。

1.2 試劑及免疫組化染色方法

鼠抗人CD44V6單克隆抗體、抗體稀釋液及試劑盒均購自基因公司。其稀釋度為1∶50。所有標本均用10%中性福爾馬林固定，石蠟包埋，4μm 連續切片，按二步法進行免疫組化染色，染色前標本切片進行抗原修復處理，一抗在室溫孵育1h，二抗在室溫下孵育0.5h，DAB 顯色，蘇木素復染。用已知陽性的乳腺癌標本作陽性對照，用PBS 緩沖液代替一抗作陰性對照。

1.3 判斷標準

所有免疫組化片子用奧林帕斯BX50顯微鏡進行定性和半定量評估。請3位高職稱病理醫生在不知道臨床信息的情況下獨立對所有免疫組化片子進行評估。陽性判斷標準為細胞膜出現了黃色或棕黃色顆粒，并用陽性片作為對照。每張切片隨機選擇10個視野，40×10高倍顯微鏡下觀察計數。根據染色強度、陽性細胞百分比分別記分[4]:A 染色強度:不著色為0分，淡黃色為1分，黃色為2分，棕黃色為3分。B 陽性細胞所占百分率:<5%為0分，5%~25%為1分，25%～50%為2分，50%～75%為3分，>75%為4分。根據染色強度與陽性細胞百分比得分之積分為4級，即(-)為0分，弱陽性(+)為1～2分，陽性(++)為3～4分，強陽性(+++ )為5～6分。將A×B作為其染色的計數，只有A×B >3 分才算免疫反應陽性，并按乘積分數將染色結果分為:-(0～2 分)、+(大于2分)。

1.4 統計學處理

應用SPSS10.0軟件進行χ2檢驗和Fisher確切概率法，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

CD44V6陽性表達主要表現為胞膜染色。52例乳腺癌中陽性(+)41例，表達率為78.8%(41/52);15例乳腺腺病中陽性(+)2例，表達率為13.3%(2/15)，乳腺腺病與乳腺癌的陽性表達率有顯著差異(P<0.01)。見表1。在低級別和高級別乳腺癌中CD44v6表達率分別是33.3%(4/12)和92.5%(37/40)，差異有顯著性 (P<0.05)。在伴有淋巴結轉移和無淋巴結轉移的患者中表達率分別為92.0%(23/25)和66.7%(18/27)，差異有顯著性(P<0.05)。見表2。與其他臨床病理因素均無相關性(P>0.05)。

3 討論

CD44是這幾年來研究比較多的一類細胞黏附分子，是一組廣泛分布在細胞表面的跨膜糖蛋白，參與細胞與間質、細胞與細胞之間的連接，根據其所含外顯子的不同分為兩種亞型:CD44v和CD44s。CD44蛋白有如下功能:①激活淋巴細胞;②誘導淋巴細胞通過血管壁;③與細胞骨架蛋白互相結合，參與偽足形成;④與細胞外基質中的膠原蛋白、透明質酸、層黏蛋白、纖黏蛋白等結合[5]。CD44在惡性腫瘤組織中主要表達于腫瘤細胞，促進腫瘤細胞的黏附和運動，特別是在促進淋巴結轉移和浸潤方面起很重要的作用，體外實驗證明在肝細胞生長因子存在的情況下這種作用更為明顯[6]。

CD44v6與乳腺癌預后的關系目前仍不十分明確。有研究表明，CD44v6的表達與患者的生存率無明顯相關[7，8]。然而Kaufmann等[9] 的實驗顯示，CD44v6陽性患者與陰性的患者在隨訪9O個月后，陽性患者的總體生存率明顯低于陰性患者，多因素分析的結果表明，CD44v6可以作為獨立預后指標。Tempfer等[10]的研究顯示，乳腺癌中CD44v6陽性組的5年生存率明顯低于陰性組，差異有顯著性。我們的研究顯示，CD44v6在乳腺腺病與乳腺癌的陽性表達率有顯著差異(P<0.01)。在低級別和高級別乳腺癌中CD44v6表達率分別是33.3%(4/12)和92.5%(37/40)，差異有顯著性(P<0.05)。在伴有淋巴結轉移和無淋巴結轉移的患者中表達率分別為92.0%(23/25)和66.7%(18/27)，差異有顯著性。由此我們認為CD44v6的表達與乳腺癌的分化及患者預后密切相關。

[參考文獻]

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[10] Tempfer C，Losch A，Heinzl H，et al. Prognostic value of immnunohistochemically detected CD44 isoforms CD44v5，CD44v6 and CD44v7-8 in human breast cancer[J]. Eur J Cancer，1996，32A(11):2023-2025.

(收稿日期:2009-12-16)