方勇軍 郭小陽(yáng) 吳靈英
精氨酸(Arginine,Arg)是家禽的必需氨基酸,因體內(nèi)缺乏合成酶,從而不能自身合成,必須從飼糧中攝取以滿足需要。在Arg對(duì)家禽的營(yíng)養(yǎng)作用和功能研究中,有關(guān)肉雞方面的報(bào)道很多,而有關(guān)肉鴨的報(bào)道較少。
另外,近年有報(bào)道指出,Arg除了有促進(jìn)生長(zhǎng)的作用外,還有抵抗疾病、促進(jìn)傷口愈合、抗腫瘤等作用,使得Arg的免疫功能研究受到重視。Kwak等報(bào)道表明,Arg對(duì)仔雞免疫器官發(fā)育起重要作用,該試驗(yàn)用缺Arg的日糧飼喂仔雞,試驗(yàn)結(jié)束后發(fā)現(xiàn)缺乏Arg組仔雞的胸腺、脾和法氏囊重量都較對(duì)照組輕,而且體增重緩慢。Konashi等觀察不同必需氨基酸的缺乏對(duì)肉仔雞各項(xiàng)免疫指標(biāo)影響后發(fā)現(xiàn),日糧中缺乏Arg會(huì)使肉仔雞各項(xiàng)免疫指標(biāo)下降,并且在對(duì)免疫器官的影響方面,得到了與Kwak等相類(lèi)似的研究結(jié)果。然而,Arg對(duì)肉鴨免疫性能的影響還未見(jiàn)報(bào)道。
免疫器官的發(fā)育是獲取理想免疫功能的基礎(chǔ),本試驗(yàn)探討飼糧Arg缺乏對(duì)肉鴨生長(zhǎng)和免疫器官發(fā)育的影響。
選擇剛出殼的健康櫻桃谷鴨96只,隨機(jī)分為4個(gè)處理,每個(gè)處理設(shè)4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)6只鴨。每個(gè)重復(fù)飼喂在1個(gè)籠內(nèi),顆粒料飼喂,自由采食與飲水,隨時(shí)更換清潔水。其他飼養(yǎng)管理照常進(jìn)行。
選用玉米蛋白粉為主要的蛋白源設(shè)計(jì)Arg缺乏的基礎(chǔ)飼糧配方(Arg含量?jī)H為0.62%),通過(guò)補(bǔ)充賴(lài)氨酸和色氨酸添加劑,使得除Arg外基礎(chǔ)飼糧的其他營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)達(dá)到或超過(guò)NRC(1994)水平,基礎(chǔ)飼糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。4個(gè)處理組分別飼喂基礎(chǔ)飼糧和在基礎(chǔ)飼糧中添加0.25%、0.50%、1.00%Arg的試驗(yàn)飼糧。Arg添加劑為L(zhǎng)-Arg鹽酸鹽,購(gòu)自武漢阿米諾科技有限公司(純度高于98.0%)。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平
1.3.1 生產(chǎn)性能測(cè)定
每周以籠為單位記錄耗料量,于21日齡早飼前空腹稱(chēng)重,以籠為單位稱(chēng)重,分別計(jì)算21 d的個(gè)體平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料肉比(F/G)。
1.3.2 淋巴器官重和免疫器官指數(shù)的測(cè)定
屠宰稱(chēng)重后的試驗(yàn)鴨,分離胸腺、脾臟和法氏囊,在電子天平上稱(chēng)重(將器官上的油脂剝離干凈)。
免疫器官指數(shù)=器官重量(mg)/活鴨體重(g)×100
1.3.3 免疫器官石蠟切片的制作和觀察
將稱(chēng)重后的胸腺、脾臟和法氏囊,置于10%的中性福爾馬林液中室溫固定,乙醇脫水,二甲苯透明,石蠟包埋,切片,厚度 5~7 μm,HE 染色,奧林巴斯顯微鏡觀察并拍照。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPASS11.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤表示,并用Duncan's法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn),P<0.05為差異顯著,P<0.01為差異極顯著。
Arg缺乏組肉鴨的平均日增重比補(bǔ)充Arg組顯著降低(P<0.01)(見(jiàn)表 2)。飼糧 Arg含量為 0.87%、1.12%和1.62%組比0.62%組肉鴨的平均日增重分別提高了33.02%、35.73%和42.46%。補(bǔ)充Arg顯著提高肉鴨的采食量(P<0.05)和飼料報(bào)酬(P<0.05)。

表2 飼糧Arg對(duì)0~21 d肉鴨生產(chǎn)性能的影響
由表3可見(jiàn),飼糧Arg含量為0.87%、1.12%和1.62%組比0.62%組肉鴨的平均胸腺重分別提高了50.46%(P<0.05)、63.81%(P<0.05)和 54.13%(P<0.05);平均脾臟重量分別提高了 34.88%(P>0.05)、49.94%(P<0.05)和 34.39%(P>0.05);平均法氏囊重量分別提高了 27.37%(P>0.05)、37.02%(P<0.05)和 35.50%(P<0.05)。從表4可以看出,飼糧Arg含量1.12%時(shí)的胸腺指數(shù)顯著高于Arg缺乏組(P<0.05),含量1.12%組脾臟指數(shù)顯著高于其它各組(P<0.05);法氏囊指數(shù)各組間差異不顯著(P>0.05)。

表3 Arg對(duì)21日齡肉鴨免疫器官平均重量的影響(g)

表4 Arg對(duì)21日齡肉鴨免疫器官指數(shù)的影響
選擇飼糧Arg含量為1.12%組的免疫器官顯微結(jié)構(gòu)與Arg缺乏組對(duì)比,可見(jiàn)1.12%組肉鴨胸腺小葉體積較大,皮質(zhì)較寬,淋巴細(xì)胞排列較緊密,胸腺小體的數(shù)量較多(見(jiàn)圖1)。

圖1 0.62%與1.12%Arg組肉鴨胸腺顯微結(jié)構(gòu)的比較
Arg缺乏組鴨脾小結(jié)數(shù)量少且體積小,界限不清晰,并且很難見(jiàn)到生發(fā)中心,1.12%Arg飼糧組肉鴨脾小結(jié)增多且體積變大,生發(fā)中心明顯(見(jiàn)圖2)。

圖2 0.62%與1.12%Arg組肉鴨脾小結(jié)顯微結(jié)構(gòu)的比較
Arg缺乏組肉鴨脾動(dòng)脈周?chē)馨颓瘦^薄,淋巴細(xì)胞排列較疏松,1.12%Arg飼糧組動(dòng)脈周?chē)馨颓瘦^厚,淋巴細(xì)胞排列較緊密(見(jiàn)圖3)。

圖3 0.62%與1.12%Arg組肉鴨脾動(dòng)脈周?chē)馨颓曙@微結(jié)構(gòu)的比較
與0.62%飼糧Arg組相比,1.12%Arg組法氏囊皺襞較寬,很發(fā)達(dá),法氏囊淋巴濾泡小結(jié)大且多,排列緊密,法氏囊淋巴濾泡皮質(zhì)厚,淋巴細(xì)胞密集,淋巴小結(jié)生發(fā)中心明顯(見(jiàn)圖4)。

圖4 0.62%與1.12%Arg組肉鴨法氏囊顯微結(jié)構(gòu)的比較
本試驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn),Arg缺乏嚴(yán)重影響肉鴨的生長(zhǎng),飼糧中添加0.25%的Arg就顯著增加平均日增重和平均日采食量,最佳飼料報(bào)酬在飼糧Arg含量為1.12%時(shí)獲得,與NRC(1994)推薦量幾乎一致。
Arg是家禽的必需氨基酸,Arg可能通過(guò)多種途徑影響家禽的生長(zhǎng)。首先,Arg是家禽體蛋白的組成成分之一,飼糧缺乏Arg直接影響體蛋白的合成;其次,Arg具有刺激垂體和胰腺分泌激素的活性,包括胰高血糖素、胰島素和生長(zhǎng)激素,這些激素能增加蛋白質(zhì)合成和飼料消耗;第三,Arg可能通過(guò)生成多胺類(lèi)物質(zhì)促進(jìn)DNA的合成和細(xì)胞的增殖。
從本試驗(yàn)結(jié)果可以看出Arg對(duì)免疫器官有如同生長(zhǎng)性能一樣的影響,但其作用途徑還不清楚。本試驗(yàn)得出不同免疫器官對(duì)Arg缺乏的敏感程度不同。如胸腺和脾臟的絕對(duì)重量和指數(shù)都受到顯著影響,而法氏囊指數(shù)不受到顯著影響,也許Arg缺乏對(duì)免疫的影響是通過(guò)胸腺和脾臟依賴(lài)途徑起作用。
胸腺是中樞免疫器官,家禽的胸腺分成串珠狀的葉,每葉由許多胸腺小葉組成,具有培育和選擇T淋巴細(xì)胞、分泌胸腺激素的功能,至性成熟后逐漸退化。胸腺大小是動(dòng)物健康和急性或慢性應(yīng)激反應(yīng)的敏感指示劑。Arg對(duì)胸腺的影響與哺乳動(dòng)物甚至人類(lèi)一致,在哺乳動(dòng)物甚至人類(lèi)的試驗(yàn)中,補(bǔ)充Arg可增加胸腺的重量。
法氏囊是鳥(niǎo)類(lèi)特有的中樞免疫器官,培育B淋巴細(xì)胞,并具有免疫應(yīng)答的功能。法氏囊的囊壁形成一些皺襞,皺襞內(nèi)分布著很多淋巴濾泡,淋巴濾泡的周邊為皮質(zhì),中央為髓質(zhì)。據(jù)報(bào)道,胚胎后期或剛孵出的雛禽切除法氏囊后,則體液免疫受到抑制,分泌抗體的漿細(xì)胞減少或消失。
脾臟是重要的外周免疫器官,是T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞定居和進(jìn)行免疫應(yīng)答的場(chǎng)所。家禽的脾由白髓和紅髓構(gòu)成,白髓由脾小結(jié)和動(dòng)脈周?chē)馨颓式M成,紅髓由脾索和脾竇組成。
胸腺和脾臟絕對(duì)重及指數(shù)在飼糧Arg達(dá)1.12%時(shí)表現(xiàn)最大,與前述生產(chǎn)性能的表現(xiàn)一致。從顯微結(jié)構(gòu)觀察,鴨飼糧中添加Arg促進(jìn)了鴨中樞免疫器官的發(fā)育,產(chǎn)生較多的T、B淋巴細(xì)胞,這些細(xì)胞通過(guò)血液循環(huán)到達(dá)外周淋巴組織和淋巴器官,當(dāng)遇到抗原刺激時(shí)可分裂成具有免疫活性的效應(yīng)細(xì)胞,同時(shí)呈現(xiàn)出脾小結(jié)增大、動(dòng)脈周?chē)馨颓试龊瘛E球體積增大且細(xì)胞排列疏松等組織結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
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