飼料中鹽霉素的不確定度評定

陳智慧

近年來，測量不確定度在化學分析領域日益受到關注，ISO/IEC17025標準明確規定檢測實驗室應具有并應用評定測量不確定度的程序。在國家實驗室認可的評審過程中，專家們最重視的也是測量不確定度報告。在參加能力驗證和比對中經常要求報告結果時附有其不確定度指標。本文以管碟法測鹽霉素為例，探討了不確定度評定方法和步驟，供同行參考。

1 檢測方法

采用《中華人民共和國國家標準》GB/T20196—2006微生物檢驗法(仲裁法),對預混料中鹽霉素進行含量測定,并對其測量不確定度進行分析。其原理是用甲醇和水提取試樣中的鹽霉素,提取液過氧化鋁層析柱凈化,除去飼料中的干擾物質。洗脫液經稀釋,利用試液中鹽霉素與嗜熱脂肪芽孢桿菌作用產生抑菌圈,根據抑菌圈大小用標準曲線法定量測定鹽霉素含量。精密稱定鹽霉素鈉標準品到100 ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度,再精密量取10.00 ml置于100 ml容量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,分別取2.50、5.00、7.50、10.00、12.50 ml至 50 ml容量瓶中, 用甲醇溶液稀釋成濃度為 5.00、10.00、15.00、20.00、25.00 μg/ml的標準工作液,其中5.00 μg/ml為參考濃度的標準工作液。標準曲線上的每個標準濃度各取3個檢定平板為一組。在每個平板上放置6個牛津杯,其中3個牛津杯滴加參考濃度,另3個滴加其他一種濃度的標準工作液。參考濃度液與標準濃度液要間隔放置。每份樣液也用三個檢定平板,其中3個牛津杯滴加樣液,另3個滴加參考濃度,樣液與參考濃度標準工作液要間隔放。用滴定管滴加到牛津杯中,培養18 h后,除去牛津杯。……