聚乙二醇在蛋白質純化中的應用

摘要：本課題將對聚乙二醇在蛋白質純化中的作用、優(yōu)勢、應用范圍及對于性質鑒定的影響等方面進行研究，為從生物體中提取活性蛋白質組分提供更好的方法和思路，并為聚乙二醇在蛋白質純化中的應用提供依據(jù)。

關鍵詞：聚乙二醇 ;球蛋白; 清蛋白

Abstract: In this thesis， PEG used in protein purification will be studied it’s function， advantage ， application scope and other aspects. From these facts ， It can provide better way and better thinking in extracting protein alive ，and also offer basis of purification.

Key words: polyethylene Glycol ， globulin，albumin

1 材料和方法

1.1材料

5%卵清蛋白溶液（新鮮雞蛋清：水=1：9）為自己所配制的溶液；紫外掃描光譜儀Lambda17型（PERKIN-ELMER公司）；熒光分光光度計LS50B型（HITACHI公司）；FTIR譜儀NEXUS670型（Nicolt公司）；其他試劑為國產分析純。

1.2方法

1.2.1不同沉淀蛋白質方法的比較，即用硫酸銨的鹽析法；用乙醇的有機溶劑沉淀法；用聚乙二醇的有機溶劑沉淀法和用5%三氯乙酸的有機酸沉淀法

1.2.2 產物性質鑒定用紫外光譜比較法和紅外光譜比較法

2 結果與分析

2.1 用聚乙二醇提純蛋白質不需要考慮鹽濃度、PH，甚至蛋白質的絕對溶解度（在水中）等因素(

即三者對于用聚乙二醇提純蛋白質來說影響不大).

2.1.1證明蛋白質在聚乙二醇中的溶解度與鹽濃度無關

不同鹽濃度卵清蛋白溶液（硫酸銨）直接加入聚乙二醇

不同鹽濃度卵清蛋白溶液（硫酸銨）用聚乙二醇反透析比較

注 ：反透析法就是把聚乙二醇放在透析袋中，讓水能進出透析袋中，而蛋白質不能進出透析袋.

結果： 在試管底都出現(xiàn)乳白色絮狀沉淀，沉淀的量如上面的表格所示，其波動值<0.015g，可以說是基本相等的，加水后能繼續(xù)溶解(證明其未變性).

2.1.2 證明蛋白質在聚乙二醇中的溶解度與pH無關

不同PH的卵清蛋白溶液，直接加入聚……