凍瘡消酊質量標準研究
2008-12-31 00:00:00宋麗莉黃惠蓮
亞太傳統醫藥 2008年10期
（廣州王老吉藥業股份有限公司，廣東 廣州 510450）
摘 要：目的：控制凍瘡消酊的質量，建立紅花的薄層色譜鑒別和樟腦、冰片的氣相色譜含量測定方法。方法：采用薄層色譜法，鑒別紅花藥材；用氣相色譜法測定樟腦、冰片中的樟腦與龍腦含量。結果：樟腦在0.858~17.130g之間呈良好的線性關系，龍腦在0.915~12.052g之間呈良好的線性關系；樟腦的回收率為97.97%，龍腦的回收率為 97.66%。結論：本質量標準能有效地控制凍瘡消酊的質量。
關鍵詞：凍瘡消酊；薄層色譜法；氣相色譜法
中圖分類號：R927.11文獻標識碼：A文章編號：1673-2197（2008）10-0019-02
凍瘡消酊是由紅花、肉桂油、樟腦、冰片等組成的中藥復方制劑，具有活血祛瘀、止癢止痛、消腫的作用。臨床上主要用于凍瘡、褥瘡的治療。本文采用薄層色譜法和氣相色譜法對凍瘡消酊進行更好的質量監控。
1 儀器、試藥與藥品
HP5890A型氣相色譜儀；檢測器FID；HW-2000型色譜工作站；不銹鋼毛細管柱（內徑0.25mm，長度30m，膜厚度0.25μm）HP-INNOWAX；METTLER AE240十萬分之一型電子天秤；CMAG REPROSTARⅡ型號成像系統；硅膠G板（青島海洋化工廠）；紅花對照藥材（中國藥品生物制品檢定所，批號：120907-200609）；水楊酸甲酯對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110707-200609）；龍腦對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110881-200504）；樟腦對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：747-200106），無水乙醇為分析純，廣州市化學試劑廠；凍瘡消酊及陰性對照（廣州王老吉藥業股份有限公司提供，批號：071101、071201、071202）
2 實驗方法與結果
2.1 紅花薄層色譜鑒別
（1）供試品溶液的制備：取精密量取本品5mL置分液漏斗中，加水5mL，用石油醚（60~90℃）振搖提取3次，每次15mL，合并石油醚液（備用），取下層液，蒸干，殘渣加80%丙酮1mL溶解，作為供試品溶液。
（2）對照品溶液的制備：取紅花對照藥材0.5g，加70%乙醇10mL，超聲處理10min，濾過，濾液蒸干，殘渣加80%丙酮1mL溶解，作為對照品溶液。
（3）陰性溶液的制備：取缺紅花的樣品，同供試品溶液制法制成紅花陰性溶液。
（4）色譜條件：照薄層色譜法（《中國藥典》2005年版一部附錄VI B）試驗，吸取上述溶液各4μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-甲醇-水（5∶1∶6）的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同的黃綠色熒光斑點。陰性無干擾。結果見圖1。
圖1 紅花薄層色譜圖
1、2、3、凍瘡消酊樣品（批號：070901、070902、070903），4、紅花對照藥材，5、陰性對照溶液
2.2 樟腦和冰片的含量測定
2.2.1 色譜條件
色譜柱：不銹鋼毛細管柱（內徑0.25mm，長度30m，膜厚度0.25μm）HP-INNOWAX；柱溫：150℃；FID檢測器溫度：190℃；進樣口溫度：190℃，氮氣流量：80mL#8226;min-1；氫氣壓力為160kPa；空氣壓力為260kPa。
2.2.2 內標溶液的配制
取水楊酸甲酯對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1mL含水楊酸甲酯5mg的溶液，作為內標溶液。
2.2.3 對照品溶液的制備
（1）樟腦對照品溶液的制備 取樟腦對照品60mg，精密稱定，置10mL量瓶中，加內標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
（2）龍腦對照品溶液的制備 取龍腦對照品30mg，精密稱定，置10mL量瓶中，加內標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
2.2.4 供試品溶液的制備
取鑒別項下的石油醚液，揮干，殘渣用內標溶液溶解定容至10mL，搖勻，作為供試品溶液。同法制得分別缺樟腦與冰片的陰性對照溶液。
2.2.5 系統適用性試驗
在上述色譜條件下，分別取對照品溶液、供試品溶液及缺樟腦與冰片的陰性對照品溶液進樣，理論板數按樟腦和龍腦峰計算應不低于1900。色譜圖見圖2。
圖2 凍瘡消酊樣品溶液（A），缺樟腦對照品溶液（B）
缺龍腦對照品溶液（C）的GC圖譜
2.2.6 線性關系考察
精密稱取樟腦對照品適量，加內標溶液配制成每1mL各含0.856mg、1.713mg、3.426mg、5.139mg、6.852mg、13.704mg、17.130mg的樟腦對照溶液；精密稱取龍腦對照品適量，加內標溶液配制成每1mL各含0.915mg、1.830mg、2.745mg、4.821mg、7.319mg、9.038mg、12.052mg的龍腦對照溶液。分別吸取1μL注入氣相色譜儀中，按上述色譜條件測定各峰面積。以峰面積積分值為縱坐標，各對照品的濃度為橫坐標，繪制標準曲線，計算得回歸方程：
樟腦：Y=5.7814×104X+3.978×104，r=0.9997
龍腦：Y=8.9734×104X+4.2688×104，r=0.9997
表明樟腦在0.858~17.130μg、龍腦在0.915~12.052μg與峰面積的線性關系良好。
2.2.7 精密度試驗
取對照品溶液1μL，連續進樣5次，測定峰面積值，計算得樟腦與龍腦的峰面積分值RSD為1.5%、1.9%。
2.2.8 穩定性試驗
取同一供試品溶液，于0、2、4、6、8、12h測定供試品中樟腦、龍腦的峰面積，并計算其峰面積積分值得相對標準偏差為樟腦：RSD=1.93%、龍腦：RSD=1.65%。
2.2.9 重復性試驗
精密稱取同一批號樣品，按供試品溶液制備方法平行制備5份，依法測定，計算，結果樟腦與龍腦質量分數的RSD為1.9%、1.5%。
2.2.10 加樣回收率試驗
加樣回收率試驗：精密量取已知含量的凍瘡消酊（批號：071101）樣品2.5mL，共5份，置具分液漏斗中，分別精密加入一定量的對照品溶液，按2.2.4項下操作，在上述色譜條件下進行GC分析，測定樟腦與龍腦含量，計算加樣回收率，結果見下表1、表2。
表1 樟腦加樣回收率試驗測定結果
表2 龍腦加樣回收率試驗測定結果
2.2.11 不同提取溶劑的考察
精密稱取同一批號樣品，分別用乙醚和石油醚（30~60℃）提取，結果見表3。
表3 不同提取溶劑的考察
2.2.12 樣品測定
分別精密量取不同批號的凍瘡消酊5mL，按2.2.4項下操作，在上述色譜條件下對3批凍瘡消酊進行GC分析，結果見表4。
表4 凍瘡消酊中樟腦與龍腦的測定結果
3 討論
考察了用乙醚、石油醚（60~90℃）二種試劑分別作為溶劑提取，結果乙醚提取不完全，而石油醚（60~90℃）提取完全，且方法簡單易行，故選用石油醚（60~90℃）為提取液。
參考文獻：
［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）［ M］.北京：化學工業出版社，2005：98-99.
［2］ 魏學冰.氣相色譜法測定膚瘍寧軟膏中冰片的含量［J］.中成藥，2004，26（1）：76.
（責任編輯：姜付平）
