復方降脂寧調節脂質代謝作用研究

摘 要：目的：研究復方降脂寧對實驗性高脂血癥小鼠血脂和肝臟脂變的影響。方法：藥物復方降脂寧主要由澤瀉、姜黃、萊菔子組成。將48只小鼠隨機分為正常組、模型對照組、陽性對照組、藥物低劑量組、藥物中劑量組和藥物高劑量組。對各組小鼠進行造模和給藥，7d后檢測小鼠血清中總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量，并對肝臟進行病理學檢測，觀察脂變情況。結果：復方降脂寧能夠降低實驗性高脂血癥小鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量，其中高劑量組TG含量的降低具有顯著性差異(P<0.05)；能夠減輕肝臟脂變的程度，減少脂變肝細胞數目，縮小肝脂變面積。結論：復方降脂寧能降低實驗性高脂血癥小鼠血清的脂質含量，并有效抑制其肝臟脂變，對脂質代謝紊亂有明顯的調節作用。

關鍵詞：復方降脂寧；高脂血癥；脂質代謝；肝臟脂變

中圖分類號：R589.2文獻標識碼：A文章編號：1673-2197（2008）09-0018-03

中藥復方降脂寧主要由澤瀉、姜黃、萊菔子組成。本實驗通過研究復方降脂寧對實驗性高脂血癥小鼠血脂和肝臟脂變的影響，從而對復方降脂寧調節脂質代謝作用進行初步評價。

1 實驗材料

1.1 動物

健康昆明種封閉群小鼠48只，體重25±5.1g，雌雄各半，由樂山長征制藥廠提供。

1.2 藥物

陽性藥物：洛伐他汀，規格20mg，由昆明四創藥業有限公司提供（批號20061101）。按照人體用量的10倍計算，取洛伐他汀16.66mg，研磨粉末，用100mL蒸餾水溶解，冷藏備用。

復方降脂寧：提取澤瀉、姜黃、萊菔子的有效成分，依處方配制成復方降脂寧溶液。

1.3 主要試劑

甘油三酯（TG）、膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)檢測試劑盒：北京中生生化工程高技術公司產品；膽固醇：上海伯奧生物科技有限公司產品（規格25g，批號070108）；去氧膽酸鈉：上海伯奧生物科技有限公司進口分裝(規格10g，批號040923)；丙硫氧嘧啶：上海復星朝暉藥業有限公司產品（規格50mg，批號060904）；豬油：300g，市售。

1.4 主要儀器

722型光柵分光光度儀：上海精密科學儀器有限公司產品；

30RF型高速離心機：日本日立公司產品；

7600全自動生化分析儀：日本日立公司產品。

2 實驗方法

2.1 造模所用脂肪乳的配制

本實驗造模所用脂肪乳采用以下方法配制^［1］：

取2.4g丙硫氧嘧啶于乳缽中研細，備用。取48g豬油于40℃水浴加熱融化，置乳缽中，加入24g膽固醇、2.4g丙硫氧嘧啶，充分攪拌、溶解，再緩緩加入10％去氧膽酸鈉溶液48mL，不斷攪拌，然后加12mL吐溫-80，研磨乳化均勻，最后加蒸餾水至240mL，裝入密閉容器中，冷藏。

2.2 動物分組及造模用藥

健康小鼠48只，雌雄各半，隨機分為6組：正常組、模型對照組、陽性對照組、藥物低劑量組、藥物中劑量組及藥物高劑量組。每組8只。

小鼠正常飼養7d后每日下午，正常組灌胃蒸餾水0.5mL/只，其它組小鼠灌胃脂肪乳0.5mL/只；每日上午，正常組和模型對照組灌胃蒸餾水0.5mL/只，陽性對照組灌胃洛伐他汀0.5mL/只，藥物低、中、高劑量組分別灌胃低、中、高劑量復方降脂寧溶液0.5mL/只。連續7d。

2.3 標本的采集、制備

各組動物最后一次灌胃后，禁食12h，不禁水。

2.3.1 血清的制備

眼球取血，采抗凝血液于潔凈干燥試管內，上機分離血清（3000r/min，10min），用于血清生化測定。

2.3.2 病理標本的制作

將小鼠處死，解剖，取肝臟用10%福爾馬林溶液固定后，常規石蠟包埋、切片，蘇木素-伊紅（HE）染色，光鏡下觀察。

3 檢測指標

3.1 血清生化測定

膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C），低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C），按檢測試劑盒說明方法，取血清于全自動生化分析儀上檢測。

3.2 肝組織病理學檢查

肝組織石蠟切片HE染色，光學顯微鏡下觀察肝臟組織形態、脂肪變程度及肝細胞變性的情況。

4 統計方法

計量資料將各組數據進行方差分析后，采用t檢驗，檢驗方法采用SPSS13.0統計軟件計算。

5 實驗結果

5.1 對小鼠血液生化指標變化的觀察

實驗過程中陽性對照組和藥物高劑量組小鼠各死亡1只。

注：與正常組相比，※表示P<0.05；與模型對照組相比，△表示P<0.05。

與正常組比較，模型對照組血清TC、TG含量升高，其中TC含量變化具有顯著性差異（P<0.05）;與模型對照組相比，陽性對照組血清TC、TG含量降低，但無顯著性差異（P>0.05）;三個藥物組血清TC、TG含量有不同程度的降低，與陽性對照組相比均無顯著性差異（P>0.05），藥物高劑量組TG與模型對照組比較具有顯著性差異（P<0.05）;三個藥物組與模型對照組比較，伴隨著劑量的增加血清TC、TG含量的降低幅度逐漸增大，但無顯著性差異（P>0.05）。

模型對照組血清HDL-C、LDL-C含量高于正常組，且均具有顯著性差異（P<0.05）;陽性對照組與三個藥物組相比HDL-C、LDL-C含量無顯著性差異（P>0.05）;陽性對照組和三個藥物組血清HDL-C、LDL-C含量與模型對照組比較有不同程度的降低，但均無顯著性差異（P>0.05）。三個藥物組與模型對照組比較，伴隨著劑量的增加血清HDL-C、LDL-C含量的降低幅度逐漸增大。

注：與正常組相比，※表示P<0.05。

5.2 對小鼠肝臟組織病理觀察

正常組：小鼠肝組織無異常，肝竇清晰可見，肝索排列整齊，細胞邊界清晰，胞質豐富(見圖1)。

模型對照組：小鼠肝組織出現彌漫性脂變，肝索排列紊亂，肝細胞表現為大小不等的空泡狀，嚴重者相互融合，將細胞核擠向一邊，屬于典型肝細胞脂肪變性(見圖2)。

陽性對照組：小鼠肝脂變程度一定程度減輕，部分肝細胞正常，近下緣處可見肝細胞脂肪變性，但與模型組相比，脂變肝細胞數目減少，脂變面積縮小(見圖3)。

藥物低劑組：小鼠肝脂變程度有所減輕，但從總體來看，其減輕程度不如降脂寧其它劑量組(見圖4)。

藥物中劑組：小鼠肝脂變程度一定程度減輕，肝細胞內少見空泡，脂變肝細胞數目減少，脂變面積縮小(見圖5)。

藥物高劑組：小鼠肝脂變程度明顯減輕，正常細胞數量占多數，脂變肝細胞數目減少，脂變面積縮小(見圖6)。

實驗結果表明，降脂寧能有效抑制小鼠肝臟的彌漫性脂變，減少脂變肝細胞的數目、縮小脂變面積。

6 討論

本研究表明，復方降脂寧能夠抑制血清脂質的升高，從而改善脂質代謝異常，促進血脂代謝恢復正常；能夠抑制實驗性高脂血癥小鼠的肝臟脂變，減少血脂升高對肝臟造成的損害。

實驗中發現模型對照組血清HDL-C含量高于正常組，這可能是在造模情況下，隨著血中膽固醇的增多，機體反饋性地引起脂蛋白增加以清除膽固醇，本實驗周期僅為7d，而脂質代謝需要一定的時間，在血中膽固醇含量較高的情況下，脂蛋白在短時間內難以下降。這一點在進行芹菜提取物對喂飼高脂飼料大鼠血脂的影響研究時也有所發現^［2］；而陽性對照組和三個藥物組血清HDL-C含量與模型對照組比較有不同程度的降低，可能是各組藥物促進高密度脂蛋白將血中膽固醇運送到肝臟代謝，從而造成血中總膽固醇含量下降，最終引起HDL-C的下降。

本研究說明復方降脂寧是一種很有前景的調節脂質代謝藥物，對預防和治療由脂質代謝紊亂導致的心血管、脂肪肝等疾病有積極的意義。

參考文獻：

［1］ 萬麗，張加雄，陳芳，等.用脂肪乳劑建立小鼠高脂血癥模型［J］.成都中醫藥大學學報，2004，27(3)：36.

［2］ 夏薇，隋煥平，邱雋，等.芹菜提取物對喂飼高酯飼料大鼠血脂的影響［J］.中國公眾衛生，2001，（4）：337-338.

（責任編輯：姜付平）

Regulation of the Compound Jiangzhining on Lipid Metabolism

Zhang Zhanping，Yan Zhiyong，Chen Chang，Qin Jinzhi，Peng Jia

(Pharmacy School of Southwest Jiaotong University，E’meishan， Sichuan614202，China)

Abstract：

Aims：To investigate the effects of Compound Jiangzhining on serum lipids and hepatic steatosis in experimental hyperlipidemic mice. Methods：Compound Jiangzhining was consisted of Alismatis，Curcuma and Semen Raphani. 48 mice were randomly divided into normal group，the control group，the positive control group，low-dose drug group，middle-dose drug group and high-dose drug group. All the mice were established model and administrated. After 7 days，some index of blood samples from mice were tested，including TC，TG，HDL-C，LDL-C levels，and observed hepatic steaosis.Results：Compound Jiangzhining could reduce serum TC，TG，HDL-C，LDL-C of experimental hyperlipidemic mice，the TG significantly increased (P<0.05). Compound Jiangzhining also could improve hepatic steatosis existing，reduce the number and the area of fatty liver cells.Conclusion：Compound Jiangzhining could reduce serum TC，TG，HDL-C，LDL-C，improve hepatic steatosis existing and regulate the disorder of lipid metabolism in experimental hyperlipidemia mice.

Key words：

The Compound Jiangzhining；Hyperlipemia；Lipid metabolism；Hepatic steatosis.