王勝君等
摘要:利用真菌培養水稻干尖線蟲的結果表明:不同的真菌培養線蟲的效果有較大差異。鏈格孢菌、鐮刀菌的效果明顯優于常用的灰葡萄孢菌,可選用于培養水稻干尖線蟲。在真菌菌落上,不同的接蟲量以及不同的溫度和培養時間對水稻干尖線蟲的培養均有一定的影響。
關鍵詞:水稻干尖線蟲;真菌;培養
中圖分類號:S 432,45
水稻干尖線蟲現稱貝西滑刃線蟲,是水稻上的重要寄生線蟲。早在20世紀50~60年代,水稻干尖線蟲病發生嚴重,并被列為國內檢疫對象。近幾年,水稻干尖線蟲病又有反復趨勢,嚴重威脅水田生產。有關利用真菌培養線蟲,國內外均有報道。Mamiya等首次用灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)菌絲體繁殖松材線蟲。程瑚瑞等利用灰葡萄孢菌在馬鈴薯一葡萄糖一瓊脂(PDA)培養基和玉米粒培養基上均大量繁殖出松材線蟲。在實驗室中,水稻干尖線蟲可以在灰葡萄孢菌等幾種真菌上培養。但很少有人系統研究不同種類的真菌培養該線蟲的效率差異。本研究采用不同條件和用不同種類的真菌培養水稻干尖線蟲,鏈格孢菌和鐮刀菌培養水稻干尖線蟲的效果明顯優于常用的灰葡萄孢菌,且鐮刀菌的效果最好,同時得到最適的培養條件,為以后更好地防治水稻干尖線蟲病害提供理論基礎。
1、材料與方法
1.1材料來源
水稻干尖線蟲:貝曼漏斗法分離帶蟲水稻種子而獲得。
真菌:鏈格孢菌和鐮刀菌由作者在水稻種子上分離獲得,灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)由薛春生提供。
1.2供試真菌培養基
馬鈴薯—葡萄糖—瓊脂(PDA)培養基:馬鈴薯200 g;葡萄糖20 g;瓊脂20 g;水1 000 mL。
1.3真菌培養水稻干尖線蟲
1.3.1水稻干尖線蟲的接種
將待培養的水稻干尖線蟲先用無菌水沖洗,然后用1%的硫酸鏈霉素浸洗消毒15min,最后用無菌水沖洗干凈,接到長滿菌絲體的供試真菌菌落上,恒溫(25℃)培養,待菌絲體被食凈,貝曼漏斗法分離獲取線蟲。
1.3.2不同種類真菌對水稻干尖線蟲繁殖的影響
在3種供試真菌菌落上分別接入50條水稻干尖線蟲,恒溫(25℃)培養15 d后,檢測蟲量并計算繁殖倍數。
1.3.3不同接種量對水稻干尖線蟲繁殖的影響
將接種量為10、20、50、100、500條水稻干尖線蟲,分別接到已培養好的上述真菌上培養,恒溫(25℃)培養15 d后,檢測蟲量并計算繁殖倍數。
1.3.4不同溫度對水稻干尖線蟲繁殖的影響
在培養好的上述真菌上各接入50條水稻干尖線蟲,分別置于15、20、25℃和30℃恒溫培養15 d后,檢測蟲量并計算繁殖倍數。
1.3.5不同培養時間對水稻干尖線蟲繁殖的影響
在培養好的上述真菌中各接入50條水稻干尖線蟲,恒溫(25℃)分別培養10、15、20、25、30 d后,檢測蟲量并計算繁殖倍數。
以上試驗均重復3次。
2、結果與分析
2.1不同種類真菌對水稻干尖線蟲繁殖的影響
供試的3種真菌均可繁殖水稻干尖線蟲,但線蟲的繁殖倍數隨真菌種類的不同而有差異。25℃,培養15 d,線蟲在鐮刀菌上的繁殖倍數最大,達346倍;鏈格孢菌上的次之,為250倍;灰葡萄孢上的最小,為108倍(表1)。

2.2不同接種量對水稻干尖線蟲繁殖的影響
不同接種量對水稻干尖線蟲的繁殖倍數有一定的影響。在10~50條之間,隨接種蟲量的加大,繁殖倍數相應增大,但增長緩慢;在50~500條之間,亦相應增大,且增長快速(表2)。
2.3不同溫度對水稻干尖線蟲繁殖的影響
溫度對水稻干尖線蟲繁殖有較大的影響。15~25℃之間,隨溫度的增高,繁殖倍數相應增大;25℃時,達最大;超過25℃,則逐漸減小(表3)。

3、結論與討論
研究結果表明,鏈格孢菌和鐮刀菌培養水稻干尖線蟲的效果明顯優于常用的灰葡萄孢菌,且鐮刀菌的效果最好。因此,作者認為前兩者可選用于培養水稻干尖線蟲。
不同的培養溫度和培養時間對水稻干尖線蟲的繁殖均有一定的影響,從試驗結果可以看出,培養水稻干尖線蟲的最適條件為25℃,20 d。此結論也為研究和防治水稻干尖線蟲病提供一定的理論依據。
本研究供試的兩種真菌——鏈格孢菌和鐮刀菌,均從水稻種子上分離獲得,并且培養水稻干尖線蟲的效果十分顯著。由此推斷,真菌與水稻干尖線蟲的生長和繁殖有一定的相關性。真菌在水稻干尖線蟲病發生發展過程中的作用不可忽視且有必要作深入的探討。