遵義地區豬O型口蹄疫抗體和豬瘟抗體調查與多價疫苗免疫效果試驗

中圖分類號：S828 文獻標志碼：A 文章編號：1674-7909（2025）13-123-4

DOI：10.19345/j.cnki.1674-7909.2025.13.025

0 引言

□蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一種高度接觸性、急性和烈性傳染病，主要侵害偶蹄動物。該病傳播迅速、流行廣泛，一旦暴發，不僅會造成巨大的直接經濟損失，更會引發嚴厲的國際貿易禁令，對養殖業乃至國家聲譽造成嚴重沖擊。在已知的7個血清型中，O型口蹄疫病毒在全球范圍內分布最廣、流行最為活躍，也是近年來最主要的流行血清型，對中國養豬業構成了持續而嚴重的威脅[2]。遵義市地處貴州省北部，是貴州省重要的生豬養殖和調出大市，養殖密度高，生豬及其產品流通頻繁。疫苗接種是當前防控口蹄疫最有效和核心的策略[3]。雖然O型口蹄疫疫苗在該地區應用廣泛，但近年來，隨著病毒不斷進化和養殖環境的變化，現有疫苗的保護效力逐漸下降。現有疫苗在遵義地區規模化豬場或特定養殖環境下的實際免疫效果，尚需基于田間抗體水平數據進行系統評估[4]。因此，研究對遵義地區生豬養殖區域O型口蹄疫免疫抗體的整體水平及分布特征進行分析，評估當前使用的多價口蹄疫疫苗的實際免疫效果，為遵義地區乃至類似生態養殖區域科學評價疫苗免疫效果，優化免疫程序，制定更精準有效的口蹄疫防控策略，提供重要的實證數據和理論依據。

1試驗材料與方法

1.1 試驗材料

樣品收集時間為2020—2024年，樣品收集采用隨機抽樣法，共采集全市15個縣每年春秋集中免疫21d后的規模養殖場或散養戶健康豬血清共3667份。2020、2021、2022、2023、2024年分別收集豬血清380、835、812、830、810份。研究使用試劑為口蹄疫病毒O型固相競爭ELISA抗體檢測試劑盒和豬瘟病毒阻斷酶聯免疫吸附試驗（Enzyme-LinkedIm-munosorbentAssay，ELISA）抗體檢測試劑盒。兩種試劑盒均購自武漢科前生物股份有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 抗體檢測方法

1.2.1.1口蹄疫病毒O型固相競爭ELISA抗體檢測

準備階段使試劑盒組分室溫平衡 ?30min 。稀釋濃縮洗滌液。待測血清、陰陽對照完全融化混勻，血清按說明書預稀釋。酶標儀開機預熱 _??15*min ，設置 450nm/650nm 波長。取出所需酶標板條，固定于框架上，按設計標記孔位。加樣與孵育中，空白孔加樣品稀釋液 100μL ，陰性孔加陰性對照 100μL ，陽性孔加陽性對照 100μL ，樣品孔加預稀釋血清100μL ，除空白孔外，所有孔加入酶結合物工作液50μL ，混勻。封板， 37^°C 孵育 60min 。洗滌時，棄孔內液體，每孔加滿 1× 洗滌液（稀釋1倍），靜置30s，棄液，重復洗滌5次，最后一次洗滌后拍干。顯色階段，每孔加新鮮配制的底物工作液 100μL 。封板，避光孵育 15min 。每孔加終止液 50μL ，混勻。 15min 內于酶標儀讀取 450nm OD值[5]。

1.2.1.2 豬瘟病毒阻斷ELISA抗體檢測

試劑盒室溫平衡 ?30min 。稀釋濃縮洗滌液。待測血清、陰陽對照融化混勻，血清按說明書預稀釋。酶標儀預熱 ，設置 450nm/650nm 波長。取出酶標板條，固定于框架上，標記孔位，樣品設雙孔。空白孔加樣品稀釋液 100μL ，陰性孔加稀釋陰性對照 100μL ，陽性孔加稀釋陽性對照 100μL ，樣品孔加稀釋待測血清 100μL 。封板， 37^°C 孵育 60min 。每孔加滿洗滌液，靜置30s，重復洗滌5次，拍干。每孔加酶標抗CSFV單抗工作液 100μL 。封板， 37^°C 孵育 30min ，重新洗滌。每孔加新鮮配制的底物工作液 100μL 。封板，避光室溫孵育 15min 。每孔加終止液 50μL，15min 內于酶標儀讀取 OD₄₅₀nm 值]

1.2.2 判定標準

豬O型口蹄疫抗體：當陰性對照平均 OD₄₅₀nm 值與陽性對照平均 OD₄₅₀nm 值之差 ?0.5 時，試驗成立。計算待測樣品的S/P值，S/P值 ≤0.5 時，判定為抗體陽性；S/P值 gt;0.5 時，判定為抗體陰性。

豬瘟抗體：當陰性對照平均 OD₄₅₀nm 值 gt;0.5 且陽性對照阻斷率 gt;50% 時，試驗成立。計算待測樣品的阻斷率，阻斷率 340% 時，判為抗體陽性；阻斷率 ?30% 時，判為抗體陰性； 30%lt; 阻斷率 lt;40% 時，判為可疑。

2試驗結果分析

研究首先分析了目標地區豬O型口蹄疫和豬瘟免疫抗體檢測結果，如圖1所示。2020—2024年，豬O型口蹄疫抗體合格率呈波動上升趨勢，平均合格率為 93.2% ，整體防控效果逐步提升，其中2024年成效顯著。豬瘟抗體合格率波動較大，但總體呈上升態勢，平均合格率為 90.4% ，取得了一定成效，但存在不穩定因素，應持續關注改進。

圖1豬O型口蹄疫和豬瘟免疫抗體檢測結果

研究進一步分析了每年春秋兩季豬O型口蹄疫抗體檢測結果，如圖2所示。2020年春季豬O型□蹄疫抗體合格率為 86.5% ，2021年大幅上升至98.5% ，2022—2024年維持在 97.1%～98.0% 的較高水平，整體呈上升后趨于穩定的趨勢。2020年秋季豬O型口蹄疫抗體合格率為 93.8% ，2021年驟降至81.6% ，整體波動幅度較大。春季豬O型口蹄疫免疫效果平均合格率為 96.7% ，顯著高于秋季的89.4% ，說明遵義地區春季豬O型口蹄疫免疫效果整體更穩定，秋季可能受環境、管理等因素影響，合格率波動較大。

圖2春秋兩季豬O型口蹄疫抗體檢測結果

豬瘟免疫抗體檢測結果如圖3所示。2020年豬瘟抗體春季合格率為 77.1% ，2021—2022年上升至91.5%～94.4% ，2023年回落至 80% ，2024年又升至96.2% ，呈現“上升一下降一上升”的波動趨勢。2020年豬瘟抗體秋季合格率為 75.7% ，2021—2024年逐步上升至 86.3%～99.2% ，整體呈持續上升趨勢，尤其是2024年達到 99.2% 的極高水平。豬瘟抗體秋季平均合格率為 91.4% ，略高于春季的 89.4% ，但春季合格率波動更大，說明豬瘟免疫在秋季的穩定性和整體效果略優，仍需關注春季合格率波動的原因。

圖3春秋兩季豬瘟抗體檢測結果

3結論與討論

疫苗接種是當前防控口蹄疫最有效和核心的策略。中國實行強制免疫政策，通過大規模疫苗接種構建群體免疫屏障。然而，免疫效果受到多種因素影響，包括疫苗質量、免疫程序、動物自身狀況及田間流行毒株的變異等[7-8]。因此，定期開展動物群體免疫抗體水平監測，是科學評估免疫效果，了解群體免疫狀態，發現免疫薄弱環節和潛在風險區域的關鍵手段，對于及時調整免疫策略，有效預防疫情發生至關重要。

2020一2024年，遵義地區豬O型口蹄疫抗體合格率整體呈波動上升趨勢，年均合格率達 93.2% 。豬瘟抗體年均合格率為 90.4% ，雖呈上升趨勢，但年度間波動較大，提示防控穩定性需加強。豬O型口蹄疫春季免疫效果更穩定，秋季波動明顯，2021年秋季驟降至 81.6%，2024 年反彈至 99.5% 。

研究證實，多價口蹄疫疫苗在遵義規模化豬場整體有效，O型口蹄疫抗體合格率大于 93% ，其廣譜保護性可簡化免疫程序，符合甘詩琪等[10]提出的疫苗核心策略。但2021年秋季O型口蹄疫抗體合格率驟降，可能與病毒局部變異、免疫操作規范性不足或環境應激相關，需結合病毒分子監測進一步驗證。春季穩定性高，氣候適宜，豬群健康狀態較好，利于免疫應答。O型口蹄疫在秋季合格率波動顯著，可能與秋季生豬調運頻繁、冷應激增加及免疫管理疏漏有關。2023年春季豬瘟抗體合格率下降或源于春季疫病高發，干擾免疫效果。目標區域O型口蹄疫年均合格率 93.2% 高于眉縣[]，但低于四川開江縣口蹄疫抗體水平[12]。該結論反映出區域間防控具有差異，提示需因地制宜優化策略。

研究建議強化秋季免疫管理，規范操作流程，避免應激期免疫，定期監測疫苗效價。針對抗體水平波動性，建議增加免疫后抗體監測頻次，對可疑樣本復檢并補免。此外，應追蹤病毒血清型變異動態，評估疫苗交叉保護力，必要時更新毒株組合。

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Investigation ofPorcine O-Type Foot-and-Mouth Disease Virus and Classical Swine Fever Virus Antibodies and Study on the Immunization Efficacy of Polyvalent Vaccines in Zunyi Region Area

YIN Xin LIXingxingWANG Lu LONG Mengyao ZHU Daju

Zunyi Animal DiseasePrevention and Control Monitoring Station，Zunyi 563ooo，China

Abstract： Foot-and-mouth disease，particularly serotype O，poses a significant threat to the global swine industry.To assess the immunization efficacy of polyvalent vaccines，this study investigated and analyzed the antibody levels against O-type foot-and-mouth disease virus and classical swine fever in pig populations in Zunyi region.The results revealed that the annual qualified rate of O-type foot-and-mouth disease antibodies from 2020 to 2024 averaged 93.2% ，showing a fluctuating upward trend，while the average annual qualified rate of antibodies against swine fever was 90.4% ，with more pronounced fluctuations.The antibody qualification rate for O-type foot-andmouth disease was significantly higher in spring than in autumn，with autumn exhibiting severe variability.The polyvalent foot-and-mouth disease vaccine demonstrated overall effectiveness in the Zunyiregion. However，seasonal and management factors significantly influenced immunization stability.We recommend reinforcing autumn vaccination management，increasing the frequency of antibody monitoring，and continuously tracking virus mutations to optimize vaccine strategies.

Key words： pig; foot-and-mouth disease;classical swine fever; vaccine