鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液關鍵質量屬性分析

摘要：目的 評價鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液部分關鍵質量屬性對產品質量的影響。方法 對鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液的溶液顏色檢測法、析晶-包材-不溶性微粒的相關性、元素雜質風險進行分析/評估，并對14家企業的187批抽驗樣品進行分析。結果 通過對樣品吸光度與色差值進行相關性分析，以450 nm為檢測波長，建立了紫外可見分光光度法測定樣品溶液的顏色；綜合各企業、過效期和破壞實驗樣品的測定結果，確定限度為A450不得過0.13。證明樣品析晶的難易程度與所采用包材表面的粗糙程度相關，按易發生析晶程度排序，直立式聚丙烯輸液袋＞三層及五層共擠膜＞玻璃瓶；析晶樣品復溶后，盡管目視無可見異物，但4～6 μm不溶性微粒數量顯著升高。采用ICP-MS法，測定樣品中10種可能引入的元素雜質的含量，其含量均低于安全限度的30%。結論 采用紫外可見分光光度法測定樣品的溶液顏色更為方便、準確；應關注樣品析晶-復溶后引入的質量風險；不需格外關注由元素雜質引入的風險。

關鍵詞：鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液；質量評價；溶液顏色；結晶；元素雜質

中圖分類號：R917 文獻標志碼：A

An analysis of critical quality attributes for moxifloxacin hydrochloride and sodium chloride injection

Li Yu， Hou Jinfeng， Liu Haitao， Kou Jinping， Liu Qi， Li Jiahui， Gao Lujuan， Leng Bihan， and Che Baoquan

（Beijing Institute for Drug Control， NMPA Key Laboratory for Research and Evaluation of Generic Drugs， Beijing Key Laboratory of" Analysis and Evaluation on Chinese Medicine， Beijing 102206）

Abstract Objective To evaluate the effect of critical quality attributes on the pharmaceutical quality of moxifloxacin hydrochloride and sodium chloride injections. Methods The study investigated and evaluated the solution color test， the relationship between crystallization， packaging materials and particulate matter， and the risk of elemental impurities for moxifloxacin hydrochloride and sodium chloride injections. A total of 187 batches of samples from 14 companies were analyzed. Results By analyzing the correlation between the absorbance and color difference values， a UV-Vis spectrophotometry method was established to determine the color of the solution at 450 nm. Based on the results of samples from various companies， expired samples， and samples of stress tests， the limit of the absorbance at 450 nm was not more than 0.13. The study demonstrated that the degree of crystallization was related to the roughness of the surface of the packaging material. It’s found that crystallization was most likely to occur in upright polypropylene infusion bags， followed by three-layer and five-layer co-extruded films， and finally glass bottles. Although visible foreign matters were not observed after re-dissolution of crystallized samples， the numbers of particulate matter of 4～6 μm were significantly increased. Ten elemental impurities that were potentially introduced into samples were determined by using ICP-MS， and the contents were below 30% of safety limits. Conclusion UV-Vis spectrophotometry is a more convenient and accurate method for determining the solution color. It is worth noting the quality risks associated with crystallization and re-dissolution. There is no further pay attention to the risk introduced by elemental impurities.

Key words Moxifloxacin hydrochloride and sodium chloride injection; Quality evaluation; Solution color; Crystallization process; Elemental impurities

鹽酸莫西沙星為第四代喹諾酮類抗菌藥物，原研為德國拜耳公司。臨床主要用于治療成人（≥18歲）由敏感細菌引起的上呼吸道和下呼吸道感染，如慢性支氣管炎和社區獲得性肺炎等[1-3]。注射劑直接注射進血液，屬于高風險劑型[4]。因此，2023年國家藥品抽驗工作將鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液列為抽驗品種，從24個省、自治區和直轄市的藥品生產、經營和醫療單位抽取到187批次樣品，涉及15個生產企業（包含原研企業）。187批樣品標準檢驗合格率為100%，但在檢驗過程中除有關物質外（有關物質及含量測定方法另文已發表[5]），發現存在以下3個方面的問題：

（1）15家企業注冊標準中，13家企業標準采用吸光度法測定溶液顏色，不同標準中的方法在測定濃度、稀釋劑、檢測波長和限度等方面均存在差異，現行標準缺乏檢測波長及限度的選擇依據。色差值法可更全面準確反映樣品的顏色，但色差計通用性較差[6]。需建立能準確地判斷鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液溶液顏色的方法，并制定合理的限度。

（2）本品說明書要求15 ℃以上保存，并強調樣品儲存溫度低于15 ℃時會發生沉淀，并且在檢驗過程中觀察到部分企業樣品出現結晶現象[7-8]，需考察減少樣品析晶的方法。此外，形成的結晶再復溶后，雖然目視無可見異物，但仍可能存在目視無法觀察到的不溶性微粒[9]，需進一步考察樣品析晶后的風險。

（3）15家企業的注冊標準檢驗中，僅有兩個標準檢測元素雜質，按ICHQ3D《元素雜質指南》，需考查注射劑中元素雜質風險[10-11]。

本文針對上述問題開展研究，為制訂更為嚴謹的藥品質量標準提供依據。

1 儀器及試藥

1.1 儀器

Colori5型紫外-可見分光光度計-色差計（美國Xrite公司）；TU1901型紫外-可見分光光度計（北京普析通用公司）；BJPX-B250型生化培養箱（山東博科公司）；YB-2型澄明度檢測儀（天津天光公司）；GWJ-8型微粒檢測儀（天津天大天發公司）；Merlin Compact型場發射掃描電鏡（德國Zeiss公司）；iCAP Q型電感耦合等離子體質譜儀（美國Thermo公司）。

1.2 試藥

BVⅢ級硝酸（批號211101，質量分數65%～68%）購自北京化學試劑研究所；金標準液（批號23D50012，質量濃度1000 μg/mL）；鎘（批號22B039-1，質量濃度1000 μg/mL）；鉛（批號227010-6，質量濃度1000 μg/mL）；砷（批號22B006-1，質量濃度1000 μg/mL）；汞（批號226020-1，質量濃度1000 μg/mL）；鈷（批號226048-2，質量濃度1000 μg/mL）；釩（批號222011-4，質量濃度1000 μg/mL）；鎳（批號227009-5，質量濃度1000 μg/mL）；鋰（批號227028-2，質量濃度1000 μg/mL）；銻（批號225032-6，質量濃度1000 μg/mL）；銅（批號225017-4，質量濃度1000 μg/mL）；內標混合溶液（批號22DA0384；含元素：鉍（Bi），質量濃度5 μg/mL；鍺（Ge），質量濃度5 μg/mL；銦（In），質量濃度5 μg/mL；镥（Lu），質量濃度5 μg/mL； 鈧（Sc），質量濃度10 μg/mL；碲（Te），質量濃度25 μg/mL），以上元素標準液均購自國家有色金屬及電子材料分析測試中心。

1.3 樣品

鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液為2023年國家藥品抽檢樣品，共計187批次，涉及15家生產企業，包含國內生產企業14家，以及原研企業德國拜耳公司，規格：250 mL，鹽酸莫西沙星按C21H24FN3O4計0.4 g。

光照破壞樣品：①取樣品1，置3500 Lx光照箱中，照射30 d；②取樣品2，置室外自然光下放置28 d。

2 實驗方法

2.1 建立溶液顏色檢測方法

利用紫外-可見分光光度計-色差計對《中國藥典》2020年版“溶液顏色檢查法”標準比色液測定，得到色差值（DE*、a*和b*）。以色差值（a*和b*）作為基礎數據建立色系模型，結合色差值DE*對溶液的顏色色系進行判定。檢測條件：光源：D65/10°視角；比色皿：10 mm；照明觀察條件：d/o（漫反射照明/垂直接收）條件；儀器透射測量精度：85%透過率條件下±0.2%。

選取15家企業的42批次鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液代表性樣品和光照破壞樣品，取適量原液直接測DE*值。以各企業注射劑樣品及光照破壞樣品DE*值為橫坐標，同時在420～460 nm范圍內，以樣品每隔10 nm的吸光度值為縱坐標，分別進行線性回歸分析。比較不同波長處吸光度值與DE*值的相關性，選取相關性最高的波長作為測定波長。在此波長下，分別對各企業的42批代表樣品進行檢測，綜合代表樣品、過效期和破壞實驗樣品的檢測結果，確定限度。

2.2 析晶-包材-不溶性微粒的相關性分析

從15家企業的鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液樣品中隨機抽取20個樣品，于4 ℃下放置，連續7 d觀察不同樣品中析出晶體的數量。

用掃描電鏡觀測15家企業使用的包材與藥液接觸面的表面特征，并進行相關性分析。掃描電鏡參數：加速電壓5.0 kV，電子束電流1.48 pA；工作距離9.29 mm，掃描駐留時間1 μs；樣品噴金處理。

另抽取15家企業樣品各1批，于4 ℃下放置2周，觀察到樣品析出結晶后取出，室溫（約22 ℃）放置12 h，目視樣品中無可見異物后，比較低溫析晶復溶后的樣品與未經低溫放置的樣品中4～6 μm的不溶性微粒差異。

2.3 元素雜質分析

建立電感耦合等離子體質譜法（ICP-MS），對15家企業的42批次代表性樣品中的元素雜質進行測定，測定元素種類包括全部1類雜質和2A類雜質以及3個在生產過程中涉及的元素雜質。

對照品貯備液制備：精密量取鎘標準溶液20 μL、鉛標準溶液50 μL、砷標準溶液150 μL、汞標準溶液30 μL、鈷標準溶液50 μL、釩標準溶液100 μL、鎳標準溶液200 μL、銻標準溶液900 μL置10 mL塑料量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻。精密量取100 μL上述溶液、鋰標準溶液25 μL、銅標準溶液30 μL，置同一10 mL塑料量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻。

標準曲線溶液制備：按表1進行標準曲線配制。

內標溶液的制備：精密量取內標混合元素標準溶液各100 μL置100 mL容量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻。

供試品溶液的制備：精密量取本品625 μL，置10 mL塑料量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻。

參照2020版《中國藥典》四部通則電感耦合等離子質譜法進行樣品測定。

3 實驗結果與分析

3.1 建立溶液顏色檢測方法

3.1.1 樣品色系判定

采用色差計法對15家企業的42批次代表樣品進行測定，各企業樣品的DE*值均在31.44～32.21之間。觀測各樣品的溶液顏色在色系模型中的位置（圖1），諸樣品在色系模型中均在綠黃色系的左邊，更貼近綠黃色系，因此可以判定樣品的溶液顏色歸屬為綠黃色。

3.1.2 紫外可見分光光度法檢測波長的選擇

以各企業注射劑樣品及光照破壞樣品的DE*值為橫坐標，相應波長下的吸光度值為縱坐標，分別進行線性回歸分析。由相關系數結果可見，450 nm波長下樣品的吸光度值與DE*值的相關系數最大（表2），即該波長處的吸光度值與DE*值的相關性好于其他波長，因此選擇450 nm作為溶液顏色的檢測波長。

3.1.3 限度確定及樣品測定

選擇450 nm作為檢測波長，對15家企業的42批樣品進行測定，其吸光度值（A450）在0.1103～0.1193之間。同時，測定過效期樣品，其A450值仍在此范圍內（表3）。現行鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液注冊標準中采用450 nm波長檢測樣品的顏色，存在3個限度，分別為0.14、0.15和0.18，均高于本文對樣品及過效期樣品的測定值。按本文方法，測定光照破壞樣品1和樣品2的A450值（表3），可見，在無外包裝材料保護下，樣品置3500 Lx光照箱中照射30 d的A450值為0.1369；在室外自然光下放置28 d的樣品溶液明顯變黃（圖2），A450值為0.1771。

結合樣品測定數據，認為以在3500 Lx光照箱中照射30 d的樣品的吸光度值作為鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液溶液顏色的上限，即A450不得過0.13，較現行標準更為嚴謹。

3.2 析晶-包材-不溶性微粒的相關性分析

3.2.1 樣品低溫情況考察

連續7 d觀察不同企業鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液在4 ℃放置樣品出現析晶的數量（表4），其中一家企業產品同時使用玻璃瓶及三層共擠膜兩種包結果表明，不同樣品出現析晶的早晚及多少與包材相關：使用直立式聚丙烯輸液袋的產品最早出現析晶，且出現析晶的樣品數最多；使用三層或五層共擠膜的產品稍晚，出現析晶的樣品數也少于使用直立式聚丙烯輸液袋的產品；使用玻璃瓶的產品第4天才出現析晶，且出現析晶的樣品量最少。采用直立式聚丙烯輸液袋的樣品較使用玻璃包材的樣品更易發生析晶，提示包材與樣品的析晶現象具有相關性。目前，15家企業產品只有一家企業使用直立式聚丙烯輸液袋。

3.2.2 掃描電鏡分析包材表面

采用掃描電鏡法觀察不同企業使用的包材與藥液接觸面的表面特征。原研企業拜耳與3家國內企業使用玻璃包材，其余企業使用的包材有直立式聚丙烯輸液袋、三層共擠膜和五層共擠膜。

由掃描電鏡圖可見，直立式聚丙烯輸液袋表面最為粗糙，其次是三層共擠膜、五層共擠膜，玻璃包材表面最為光滑。結合樣品低溫時的析晶結果，認為可能是由于直立式聚丙烯輸液袋材質較三層和五層共擠膜硬，在運輸、貯藏過程中更易因碰撞產生折痕，使得表面更為粗糙，易形成晶種發生析晶現象。三層共擠膜及五層共擠膜較直立式聚丙烯輸液袋表面更為光滑，玻璃材質表面最為光滑且不易變形，因而不易發生析晶現象。建議使用直立式聚丙烯輸液袋的企業考慮析晶導致的產品風險。

3.2.3 析晶與不溶性微粒的相關性分析

取15家企業的樣品各1批次，經析晶-復溶-目視觀測無可見異物后，測定樣品中4～6 μm的不溶性微粒，并與未經低溫放置的正常樣品比較（表5），可見，樣品析晶再復溶后， 4～6 μm的微粒數較正常樣品提高了近百倍，存在一定風險。

3.3 元素雜質分析

3.3.1 限度

參考ICH Q3D《口服、注射和吸入給藥途徑的元素雜質的安全性評估原則》中對注射劑的要求，結合注射劑中常用元素的每日允許暴露量和本品日最大攝入量，折算成鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液中各元素雜項的濃度限度（表6）。

3.3.2 樣品測定結果

對15家企業的42批次代表樣品中的元素雜質進行測定，各元素雜質的最大值與限度見表7。可見，所有樣品中10種元素雜質的濃度最大值為限度值的4.4%，按ICHQ3D《元素雜質指南》規定，如樣品結果低于限度的30%，則不需要關注元素雜質引入的風險。提示鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液中的諸元素雜質均得到較好的控制。

4 結論

本文的研究結果表明，采用450 nm作為檢測波長，能夠準確反映樣品溶液顏色的變化，采用本研究設立的限度標準，較目前各注冊企業標準中的限度更為嚴謹。本文建立的溶液顏色檢查方法既具有色差計發的專屬性，又具有紫外分光光度法的普適性，是測定鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液溶液顏色的理想方法。

本文的研究發現，采用直立式聚丙烯輸液袋包裝的鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液較采用三層及五層共擠膜和玻璃瓶包裝的樣品更易產生析晶現象，且發生析晶的樣品，復溶后溶液中4～6 μm的不溶性微粒數顯著升高，存在潛在風險。

本文按ICHQ3D《元素雜質指南》，采用ICP-MS法分析鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液中10種可能引入的元素雜質的含量。測定結果顯示，元素雜質在產品中均得以較好地控制。

參 考 文 獻

陳華海. 注射用哌拉西林鈉他唑巴坦鈉與鹽酸莫西沙星氯化鈉注射液治療AECOPD的療效比較[J]. 臨床合理用藥， 2024， 17（20）： 58-61.

楊子琪. 第四代喹諾酮類抗菌藥鹽酸莫西沙星合成工藝進展與優化[J]. 化工設計通訊， 2024， 50（7）： 166-169.

朱小明， 陳芝. 某院2017～2022年期間抗感染類藥品不良反應報告分析[J]. 中國處方藥， 2024， 22（9）： 77-80.

周冉， 林佳睿， 高笑穎， 等. 注射用泮托拉唑鈉與組合包材相容性試驗中元素雜質遷移研究[J]. 中國藥學雜志， 2024， 59（18）： 1741-1747.

李彧， 車寶泉， 李珉， 等. HPLC法測定鹽酸莫西沙星有關物質[J]. 中國抗生素雜志， 2023， 48（3）： 300-307.

劉海濤， 侯金鳳， 寇晉萍， 等. 利用溶液色差值與吸光度的相關性建立頭孢西丁鈉溶液顏色的儀器測定方法[J]. 中國抗生素雜志， 2023， 48（3）： 338-342.

李茜， 楊博涵， 李倚天， 等. 注射用頭孢哌酮鈉質量評價[J]. 中國抗生素雜志， 2024， 49（3）： 262-272.

李樾， 楊銳， 趙霞， 等. 藥用棕色中硼硅玻璃安瓿與吸入用鹽酸氨溴索溶液的相容性研究[J]. 中南藥學， 2024， 22（9）： 2337-2342.

陳成亮， 朱建東， 戴鵬， 等. 精密輸液器用聚醚砜微濾膜孔徑調控研究[J]. 生物化工， 2024， 10（2）： 76-82.

張葉， 孫逸舒， 葉曉霞， 等. 電感耦合等離子體質譜法測定癸氟奮乃靜中24種元素雜質[J]. 中國藥品標準， 2024， 25（5）： 446-451.

周遠華， 夏學深， 張立雯， 等. 基于ICP-MS的兒科常用中藥口服液體制劑的重金屬及有害元素殘留量測定及其風險評估[J/OL]. 中國現代應用藥學， 1-7[2024-11-06].

收稿日期：2024-11-19

基金項目：2023年國家藥品評價性抽檢資助國藥監藥管（No. [2023]2號）

作者簡介：李彧，女，生于1993年，檢驗員，主要研究方向為藥物分析，E-mail： liyuyjy@163.com

*通信作者，E-mail： chebaoq_21@163.com

第一作者：李彧，女，生于1993年，藥師，2024年獲藥物分析學碩士，現北京市藥品檢驗研究院抗生素室檢驗員，主要從事藥品質量控制工作，完成抗生素和化學藥品的國家評價性抽驗工作，曾多次參與或承擔藥典標準提高課題。

通信作者：車寶泉，男，生于1973年，博士，現任北京市藥品檢驗研究院抗生素室主任。主持承擔多項科技部重大新藥創制專項和北京市科技計劃項目。在國內外刊物上發表學術論文90余篇，其中SCI及EI論文10篇，國家發明專利授權10項。