頭孢呋辛酯口服固體制劑的質量分析與評價

2025-04-22 00:00:00莊珊珊?陳祥奕?伍雯琦?林晨煦?林思榮

中國抗生素雜志 2025年3期

摘要：目的評價頭孢呋辛酯口服固體制劑（頭孢呋辛酯片、頭孢呋辛酯膠囊和頭孢呋辛酯顆粒）的質量現狀。方法采用法定檢驗方法結合探索性研究，對2023年國家藥品抽檢中獲得的樣品的質量狀況及現行質量標準的合理性進行評價。結果按法定標準檢驗190批次樣品的合格率為100%。現行注冊質量標準嚴于中國藥典標準，主要表現為個別項目的限度更嚴謹。探索性研究建立了測定有關物質的LC-MS法，對產品中的雜質進行了定性。同時建立了測定聚合物類雜質的RP-HPLC法，對不同企業的產品進行了比較；考察頭孢呋辛酯口服制劑在不同介質中的溶出行為，并同參比制劑的溶出行為進行了比較。結論目前國內市場流通的頭孢呋辛酯片（膠囊）質量總體較好，通過開展一致性評價，質量近年來有明顯提升，現行標準基本可行。

關鍵詞：頭孢呋辛酯；雜質譜；溶出曲線；質量分析

中圖分類號：R978.1，R917 文獻標志碼：A

Quality analysis and evaluation of cefuroxime axetil oral solid dosage formulation

Zhuang Shanshan， Chen Xiangyi，Wu Wenqi， Lin Chenxu， and Lin Sirong

（Fujian Institute for Food and Drug Quality Control， Fuzhou 350001）

Abstract Objective To evaluate the current quality status of domestic cefuroxime axetil oral solid dosage formulation （i.e. tablets， capsules and granules）. Methods The statutory specification methods combined with an exploratory study were used to evaluate the quality status of the samples obtained from the national drug sampling inspection in 2023 and the rationality of the current quality standards. Results According to the statutory standards， the qualification rate of 190 batches of samples tested was 100%. The current registered quality standards were more rigorous than the standards of the Chinese Pharmacopoeia， mainly in the form of more stringent limits for individual items. The exploratory study established an LC-MS method for the determination of the substances of interest and the characterization of impurity profiles in the product. Meanwhile， the RP-HPLC method for polymer impurities was established， and the products of different enterprises were compared; the dissolution behavior of the oral formulation of cefuroxime in different media was investigated and compared with that of the reference formulation. Conclusion The quality of cefuroxime axetil tablets （capsules） currently circulating in the domestic market was generally good. Through the consistency evaluation， the quality has been significantly improved in recent years， and the current statutory standards are basically feasible.

Key words Cefuroxime axetil; Impurity profile; Dissolution profile; Quality analysis

頭孢呋辛酯是第二代頭孢菌素，為頭孢呋辛的前藥，口服經胃腸道吸收后，在酯酶作用下迅速水解為頭孢呋辛而發揮抗菌作用。頭孢呋辛抗菌譜廣，可用于敏感菌所致的輕、中度感染，如敏感菌株所致咽炎或扁桃體炎、急性中耳炎、急性細菌性鼻竇炎、慢性支氣管炎急性發作、一般泌尿感染和萊姆病等[1] 。頭孢呋辛酯由葛蘭素史克公司研發，1988年獲得FDA批準在美國上市，商品名為西力欣。自2001年以來，多家國產仿制制劑獲準在國內上市[2]。為國家基本藥物，頭孢呋辛酯口服制劑因其療效確切，使用方便，在市場的占有量大。近三年的不良反應例數較多，主要為腹瀉、腹痛、胃部不適、燒心、惡心等消化道反應和皮疹、瘙癢等過敏反應[3]。

頭孢呋辛酯為2023年國家藥品抽檢品種，據國家藥品監督管理局網絡數據庫檢索結果，目前國內有4家原料藥生產企業和28家制劑生產企業，本次共抽到14家生產企業的片（膠囊、顆粒）共計190批樣品，涵蓋0.125 g、0.25 g和0.5 g 3種規格。頭孢呋辛酯原料和片劑在ChP 2020、BP 2023和USP 2023均有收載，膠囊劑和顆粒劑僅ChP 2020有收載。國家藥品抽檢的目的在于客觀地評價國內藥品的質量現狀，分析產品的主要質量問題，進而明確產品質量提高的方向。本文通過比較頭孢呋辛酯制劑的標準檢驗與探索性研究結果，分析通過一致性評價制劑和未過評制劑的質量差異，對國產頭孢呋辛酯口服固體制劑的質量現狀進行評價，分析其存在的問題，進而明確提高產品質量的方向。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Waters 2695高效液相色譜儀；Thermo UPLC-Q Exactive超高效液相色譜-靜電場軌道阱高分辨質譜聯用儀；SOTAX AT 7 smart（off-line）溶出度儀；Mettler Toledo XPE206DR分析天平。

1.2 對照品

頭孢呋辛酯對照品（批號130492-202104，按頭孢呋辛計，含量82.1%，中國食品藥品檢定研究院）；頭孢呋辛酯E異構體對照品（EP雜質B，批號FS1638141，含量97.3%，天津阿爾塔科技有限公司）。

1.3 試劑和藥品

本文涉及的頭孢呋辛酯片（膠囊、顆粒）均為2023年國家藥品抽檢樣品，共190批次。其中頭孢呋辛酯片144批，頭孢呋辛酯膠囊41批，頭孢呋辛酯顆粒5批。涉及14家生產企業（A-N），其中企業A、D、H～K的頭孢呋辛酯片和企業D的頭孢呋辛酯膠囊為已通過一致性評價的產品，下文簡稱為“過評藥”，其余為未通過一致性評價的產品，簡稱“未過評藥”。

乙腈、甲醇為色譜純（Merck公司）；水為超純水，其他試劑均為分析純。

2 實驗方法

2.1 法定檢驗

按照各企業注冊標準進行檢驗。頭孢呋辛酯片檢驗項目包括性狀、鑒別、異構體、有關物質、水分、溶出度和含量測定；頭孢呋辛酯膠囊檢驗項目包括性狀、鑒別、異構體、有關物質、水分、溶出度、微生物限度、鉻和含量測定；頭孢呋辛酯顆粒檢驗項目包括性狀、鑒別、異構體、有關物質、水分、溶出度、pH值和含量測定。

2.2 探索性研究

根據法定檢驗結果，結合專題調研、文獻檢索等情況，圍繞著藥品的安全性、有效性開展了有關物質、頭孢呋辛酯聚合物和體外溶出行為等研究。

2.2.1 有關物質分析及質譜分析

采用企業注冊標準收載的有關物質HPLC測定方法，分別對頭孢呋辛酯原料和190批次頭孢呋辛酯制劑進行測定。參考文獻[4]建立新的高分辨質譜測定法（LC-MS），對破壞樣品和樣品中的強保留雜質進行定性分析，確定雜質來源。

HPLC分析：色譜柱為Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流動相為0.2 mol/L磷酸二氫銨溶液-甲醇（62：38）；流速為1.0 mL/min；檢測波長為278 nm；柱溫30 ℃；進樣體積20 μL。

LC-MS測定。色譜條件：色譜柱為Agilent Eclipse Plus C18（3.0 mm×150 mm，1.8 μm）；流動相為甲醇-0.01 mol/L醋酸銨（38：62）；流速為0.35 mL/min；

檢測波長為278 nm。進樣體積2 μL。質譜條件為離子源：ESI，正離子模式；噴霧電壓：3.5kV （+）；毛細管溫度：325 ℃；輔助氣加熱溫度：350 ℃；鞘氣流速（Arb）：45；輔助氣流速（Arb）：10；吹掃氣體流速（Arb）：1，S-Lens RF Level：60；掃描模式：一級質譜分辨率（Full ms resolution）：70000，歸一化碰撞能量梯度（NCE模式）：50，80和100 eV；二級質譜（dd-MS2 resolution）分辨率：17500，采集范圍m/z：200～1000。

2.2.2 聚合物類雜質分析

參照文獻[5]建立了新的洗脫方法。

色譜條件：色譜柱為TOSOH TSKgel G2000SWXL（7.8 mm×300 mm，5 μm）；流動相為pH7.0磷酸鹽緩沖液[0.005 mol/L磷酸氫二鈉溶液-0.005 mol/L磷酸二氫鈉溶液（61：39）]-乙腈（90：10）；進樣體積：20 μL；流速：0.8 mL/min；柱溫：30 ℃；檢測波長：278 nm。

2.2.3 體外溶出行為比較

參照日本橙皮書對體外藥物溶出度研究的要求，分別以水、pH1.2鹽酸溶液、pH4.0醋酸鹽緩沖液和pH6.8磷酸鹽緩沖液4種溶出介質，測定不同企業頭孢呋辛酯片的溶出曲線，并以原研藥西力欣為參比制劑，采用f2因子法比較溶出曲線的相似性，評價過評頭孢呋辛酯片和未過評頭孢呋辛酯片溶出行為的差異。

色譜條件：色譜柱為資生堂C18色譜柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相為0.2 mol/L磷酸二氫銨溶液-甲醇（62：38）；檢測波長為278 nm；流速為1.0 mL/min；柱溫30 ℃；進樣體積20 μL。

3 結果與討論

3.1 法定檢驗結果

本次國家藥品抽檢的190批次樣品按各自的法定標準檢驗，全部符合規定。檢驗中發現，頭孢呋辛酯片涉及12個標準，過評和未過評企業現行質量標準的差異總體較小，僅個別檢查項目及限度存在差異。從質量標準來看，企業注冊標準基本接近于USP 2023和BP 2023，嚴于ChP 2020。但各國藥典均未對頭孢呋辛酯聚合物進行專門控制，僅1家通過一致性評價的企業在其質量標準中控制了聚合物類雜質。

3.2 探索性研究結果

3.2.1 有關物質

對13家企業頭孢呋辛酯片中的雜質譜進行考察，由其典型色譜圖（圖1）可見，頭孢呋辛酯片主要檢出11個雜質峰；兩個E異構體的含量之和為0.04%～0.3%，均值為0.2%；Δ3-異構體的含量為0.1%～0.9%，均值為0.3%；其他單個雜質的含量為0.1%～0.4%，均值0.2%；總雜質含量為0.3%～1.9%，均值為0.7%。采用箱式圖比較不同企業樣品的雜質和雜質總量（圖2），可見，過評企業中，A企業產品相關雜質的檢出量均較低，離散程度也較小，更接近原研藥產品水平，但K企業產品相關雜質的檢出量均較高，離散程度也較大。未過評企業中，E企業產品的已知雜質和最大單雜均較其它企業的產品高。整體來看，多數國產仿制藥的Δ3-異構體和其他單個雜質的含量較原研產品高；未過評產品與過評產品和原研產品比較，雜質種類無較大差異，但過評產品的檢出量相對較小。

4家企業的頭孢呋辛酯膠囊中，兩個E異構體的含量之和為0.1%～0.4%，均值為0.2%；Δ3-異構體的含量為0.1%～0.5%，均值為0.2%；其他單個雜質的含量為0.1%～0.3%，均值為0.1%；總雜質含量為0.3%～0.8%，均值為0.6%。未過評企業M產品中的雜質水平均較其他3家企業的產品高，過評企業D產品中的雜質控制得較為穩定。未過評企業O和N的頭孢呋辛酯顆粒中，兩個E異構體的含量之和為0.1%～0.2%，均值為0.2%，Δ3-異構體的含量為0.1%～0.4%，均值為0.3%，其他單個雜質的含量為0.1%～0.2%，均值為0.2%，總雜質含量為0.4%～0.8%，均值為0.6%。

綜上，頭孢呋辛酯制劑中有關物質的總體控制情況較好，頭孢呋辛酯片（膠囊、顆粒）檢出的雜質種類、個數和原研產品基本一致；過評產品和未過評產品中均有工藝控制較為穩定的企業，產品中雜質含量均在限度內，但過評企業A的雜質控制水平較其他企業更好。

通過分析頭孢呋辛酯的合成路線[6]結合強制降解試驗，對頭孢呋辛酯原料藥和制劑進行LC-MS分析，對色譜圖中雜質1～11的來源進行了歸屬。LC-MS分析的總離子流圖見圖3。推測的各雜質結構見表1。

3.2.2 聚合物

測定12個生產企業的73批次頭孢呋辛酯片和3個生產企業的27批次頭孢呋辛酯膠囊中的聚合物類雜質，典型色譜圖見圖4。測定結果的頻數分布圖見圖5～6。

由頻數分布圖可知，各企業樣品的聚合物類雜質基本呈正態分布，最大未知雜質分布較為均勻。各企業頭孢呋辛酯片中的最大未知聚合物單雜的含量為0.1%～0.3%，均值為0.2%，總聚合物雜質的含量為0.1%～0.4%，均值為0.3%。各企業頭孢呋辛酯膠囊中的最大未知聚合物單雜的含量為0.1%～1.3%，均值為0.4%，總聚合物雜質的含量為0.2%～1.5%，均值為0.5%。比較不同企業產品中的聚合物類雜質，原研藥西力欣檢出1個雜質，國產仿制藥包括通過一致性評價的企業A的樣品均檢出2個雜質，且檢出量均不高，說明頭孢呋辛酯片在生產和貯藏過程中不易聚合生成聚合物類雜質。頭孢呋辛酯膠囊中的聚合物類雜質水平較頭孢呋辛酯片高，未過評M公司生產的2批頭孢呋辛酯膠囊中的最大未知聚合物雜質含量超過1.0%。聚合物類雜質易引起過敏反應，是抗生素雜質譜控制的重點[7]。

3.2.3 體外溶出行為

頭孢呋辛酯屬于低滲透性藥物，FDA及TSRL（治療系統研究實驗室）將其歸為BCS（生物藥劑學分類系統）Ⅳ類，BDDCS（基于藥物體內處置的生物藥劑學分類系統）將其歸為Ⅲ類[8]。難溶性藥物的溶出度是影響其生物利用度的重要因素，也是考察制劑質量的重要指標[9]。在仿制藥一致性評價工作中，頭孢呋辛酯片（0.25 g）為首批評價產品。以原研藥西利欣作為參比制劑，分別以pH1.2、pH4.0、pH6.0和水各900 mL作為溶出介質，轉速為50 r/min測定，對11家生產企業產品和頭孢呋辛酯片原研藥進行溶出曲線的比較（圖7）。采用口服固體制劑溶出曲線測定相關指導原則[10]推薦的相似因子（f2）法，對溶出曲線的相似性進行評價，比較參比制劑GLAXO WELLCOME UK LIMITED的溶出曲線與國產仿制藥溶出曲線的差異，結果顯示，國內仿制制劑的溶出/釋放行為與參比制劑存在一定的差異。過評企業J的頭孢呋辛酯片在不同介質中溶出曲線的f2值均大于50，與參比制劑均相似，占過評品種的17%；未過評企業F和E的頭孢呋辛酯片在4種不同的介質中溶出曲線的f2值均大于50，與參比制劑均相似，占未過評品種的40%。11家仿制藥在水為溶出介質時，91%的樣品溶出曲線f2值大于50；在pH1.2的溶出介質中，45%的樣品溶出曲線的f2值大于50；在pH4.0的溶出介質中，82%的樣品溶出曲線的f2值大于50；在pH6.8的溶出介質中，55%的樣品溶出曲線的f2值大于50（表2）。部分過評制劑的4條溶出曲線與參比制劑也均不相似，或僅部分曲線與參比相似，差異主要體現在pH1.2和pH6.8的溶出介質中。提示采用溶出行為作為該類藥物一致性評價的體外評價指標值得進一步商榷。

4 總結

按法定標準檢驗，頭孢呋辛酯片（膠囊、顆粒）合格率為100%，結合探索性研究結果，認為頭孢呋辛酯片和膠囊的總體質量狀況較好，頭孢呋辛酯顆粒由于抽樣樣本少，難以評價總體質量。研究發現，多數過評的頭孢呋辛酯片（膠囊），雜質種類比較穩定，雜質檢出量普遍較小，且與原研藥的雜質含量接近；少數過評的頭孢呋辛酯片雜質含量的離散程度較大，存在批間差異，提示企業應強化工藝控制，保證藥品質量的穩定性；未過評品種應盡快開展仿制藥一致性評價工作，提高產品質量。

參考文獻

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收稿日期：2024-12-06