金絲桃素通過調節小鼠小膠質細胞內CN-NFAT鈣信號通路改善壓力應激誘導的抑郁樣行為

摘要：目的 探究金絲桃素（HY）通過鈣調蛋白（CaM）介導引起鈣調磷酸酶蛋白（CN）-活化T細胞因子（NFAT）鈣信號通路變化調節壓力應激引起的抑郁（DP）障礙并研究其機制。方法 將C57BL/6J 小鼠隨機分為正常組（Control 組）、DP組和DP+HY組（15只/組），行為學測試曠場實驗（PFT）、糖水偏好實驗（SPT）、懸尾實驗（TST）、黑白場實驗（LDB）、新奇食物抑制實驗（NSFT），免疫組化檢測小鼠腦海馬體1 區（CA1）酪氨酸羥化酶（TH）陽性表達，ELISA檢測小鼠血清5-羥色胺（5-HT）、去甲腎上腺素（NA）水平，Western blotting檢測炎癥因子腫瘤壞死因子（TNF-α）、白細胞介素-1β（IL-1β）和白細胞介素-2（IL-2）及CN-NFAT通路相關蛋白表達水平。同時，將小膠質細胞（BV-2）分為Control組、脂多糖（LPS）組、LPS+HY組以及鈣調磷酸酶抑制劑（CNIS）組，采用免疫熒光法檢測離子鈣結合接頭分子1（IBA-1）陽性表達，ELISA檢測細胞上清液5-HT、NA水平，Western blotting檢測炎癥因子IL-1β、IL-2和TNF-α 以及CN-NFAT通路相關蛋白表達水平。結果 與Control組相比，DP組小鼠的PFT經過中間區域的次數、SPT糖水消耗率、LDB明暗箱之間的穿梭次數以及NSFT食物的攝食率都降低（Plt;0.05），TST不動時間增加（Plt;0.05），TH神經元的數量減少（Plt;0.05），5-HT 和NA的水平減低（Plt;0.05），促炎細胞因子（TNF-α、IL-1β 和IL-2）及CaM-CNNFAT鈣信號通路的蛋白表達水平升高（Plt;0.05），LPS 組的IBA-1 表達上升（Plt;0.05），神經遞質水平（NA、5-HT）減少（Plt;0.05），促炎細胞因子（TNF-α、IL-1β 和IL-2）及CaM-CN-NFAT 鈣信號通路的蛋白表達量升高（Plt;0.05），與DP 組相比，HY組均逆轉了上述結果（Plt;0.05），與LPS 組相比，CNIS 組與HY組作用相似，對IBA-1 表達及神經遞質水平（NA、5-HT）和促炎細胞因子（TNF-α、IL-1β和IL-2）及CaM-CN-NFAT鈣信號通路的蛋白表達量均有逆轉作用（Plt;0.05）。結論 HY對于壓力應激誘導的DP樣小鼠和激活態下BV-2的改善作用，可通過靶向降低CN-NFAT鈣信號通路表達起有效作用。

關鍵詞：金絲桃素；壓力應激；CN-NFAT信號通路；……