外泌體miRNA差異表達(dá)可作為診斷慢性心力衰竭合并高尿酸血癥患者新型分子標(biāo)志物及靶基因功能分析

摘要：目的 分析慢性心力衰竭（CHF）合并高尿酸血癥（HUA）患者血清外泌體miRNA的差異表達(dá)，探討其作為CHF合并HUA新型診斷分子標(biāo)志物的可能性，并對(duì)差異miRNA進(jìn)行靶基因功能分析，分析作用靶點(diǎn)。方法 以2020年9月～2023年9月南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬南京中醫(yī)院心血管病科收治的CHF合并HUA患者為觀察組（n=30），選擇同期健康志愿者為對(duì)照組（n=30）。兩組各選取6例樣本，采用高通量測(cè)序分析血清外泌體中的差異表達(dá)miRNA，采用RT-PCR檢測(cè)對(duì)未作高通量測(cè)序的觀察組和對(duì)照組樣本（n=24）進(jìn)行驗(yàn)證，使用R軟件進(jìn)行GO、KEGG富集分析，預(yù)測(cè)差異表達(dá)miRNA的作用靶點(diǎn)，并通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證臨床篩查的差異miRNA。結(jié)果 高通量測(cè)序分析顯示，觀察組患者共檢測(cè)到42 個(gè)差異表達(dá)的miRNA（18 個(gè)上調(diào)，24 個(gè)下調(diào)），其中miR-27a-5p上調(diào)（Plt;0.001），miR-139-3p下調(diào)（Plt;0.001）。RT-PCR檢測(cè)顯示，觀察組患者血清外泌體中miR-27a-5p 表達(dá)量上調(diào)（P=0.004）、miR-139-3p 表達(dá)量下調(diào)（P=0.005）；ROC曲線(xiàn)下面積（AUC）分析發(fā)現(xiàn)，miR-27a-5p、miR-139-3p 預(yù)測(cè)CHF 合并HUA 發(fā)病的AUC 分別是0.708（95% CI：0.562-0.855）和0.734（95% CI：0.593-0.876），兩者聯(lián)合預(yù)測(cè)CHF 與HUA 發(fā)病的AUC為0.899（95% CI：0.812-0.987）。對(duì)差異基因進(jìn)行GO富集分析發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞自噬是富集程度最高的靶點(diǎn)；KEGG功能注釋顯示，激活A(yù)MPK-mTOR信號(hào)通路可能是差異表達(dá)的miR-27a-5p 和miR-139-3p 作用靶點(diǎn)之一。進(jìn)一步動(dòng)物實(shí)驗(yàn)得到了相同的驗(yàn)證。結(jié)論 血清外泌體中miR-27a-5p 上調(diào)和miR-139-3p 下調(diào)可作為精準(zhǔn)診斷CHF 合并HUA 的新型分子標(biāo)志物，激活A(yù)MPK-mTOR信號(hào)通路后促進(jìn)心肌細(xì)胞的自噬反應(yīng)可能是差異表達(dá)的miR-27a-5p、miR-139-3p的作用靶點(diǎn)之一。

關(guān)鍵詞：慢性心力衰竭；高尿酸血癥；外泌體；微小RNA；AMPK；mTOR；自噬

高尿酸血癥（HUA）是嘌呤代謝紊亂導(dǎo)致血清尿酸生成過(guò)多或排泄障礙引起的一種代謝異常疾病，是慢性心力衰竭（CHF）的常見(jiàn)合并癥，與心衰不良預(yù)后密切相關(guān)［1-3］。……