非小細胞肺癌患者血清長鏈非編碼RNA及血管內皮生長因子的表達變化及相關性研究

陳麗麗 李明 王文怡

【摘要】 目的：探究非小細胞肺癌患者血清長鏈非編碼RNA（lncRNA）及血管內皮生長因子（VEGF）的表達變化及相關性。方法：2020年1月—2023年5月武漢科技大學附屬天佑醫院收治的90例非小細胞肺癌患者為觀察組，同時期收治的40例肺部良性病變患者為對照組。檢測及比較兩組血清lncRNA（lncRNA H19、lncRNA DANCR及lncRNA ANRIL）及VEGF（VEGF-A、VEGF-C及VEGF-D）的表達水平，并比較觀察組中不同性別、年齡、疾病分期、分化程度及淋巴結轉移情況患者的血清lncRNA及VEGF表達水平，采用Pearson相關性分析非小細胞肺癌患者上述血清lncRNA與VEGF的相關性。結果：觀察組血清lncRNA與血清VEGF均顯著高于對照組（P<0.05）；觀察組中不同疾病分期及淋巴結轉移情況患者的血清lncRNA與VEGF比較，差異均有統計學意義（P<0.05）；Pearson相關性分析顯示，非小細胞肺癌患者的血清lncRNA與VEGF均呈正相關（P<0.05）。結論：非小細胞肺癌患者lncRNA H19、lncRNA DANCR及lncRNA ANRIL及VEGF均呈現高表達狀態，且上述lncRNA與VEGF均呈正相關，在非小細胞肺癌早期診斷中具有一定價值。

【關鍵詞】 非小細胞肺癌 長鏈非編碼RNA 血管內皮生長因子 相關性

Study on the Expression Changes and Correlation of Serum Long Non-coding RNA and Vascular Endothelial Growth Factor in Patients with Non-small Cell Lung Carcinoma/CHEN Lili， LI Ming， WANG Wenyi. //Medical Innovation of China， 2024， 21（15）： -147

[Abstract] Objective： To investigate the expression changes and correlation of serum long non-coding RNA （lncRNA） and vascular endothelial growth factor （VEGF） in patients with non-small cell lung carcinoma. Method： A total of 90 patients with non-small cell lung carcinoma admitted to Tianyou Hospital Affiliated to Wuhan University of Science & Technology from January 2020 to May 2023 were included in the observation group， and 40 patients with benign lung lesions admitted during the same period were included in the control group. The expression levels of serum lncRNA （lncRNA H19， lncRNA DANCR and lncRNA ANRIL） and VEGF （VEGF-A， VEGF-C and VEGF-D） were detected and compared between the two groups. The expression levels of serum lncRNA and VEGF in patients with different gender， age， disease staging， differentiation degree and lymph node metastasis situation were compared in the observation group. Pearson correlation was used to analyze the correlation between serum lncRNA and VEGF in patients with non-small cell lung carcinoma. Result： Serum lncRNA and VEGF in observation group were significantly higher than those in control group （P<0.05）. There were significant differences in serum lncRNA and VEGF in patients with disease staging and lymph node metastasis situation in the observation group （P<0.05）. Pearson correlation analysis showed that serum lncRNA were positively correlated with VEGF in patients with non-small cell lung carcinoma （P<0.05）. Conclusion： lncRNA H19， lncRNA DANCR， lncRNA ANRIL and VEGF are all highly expressed in patients with non-small cell lung carcinoma， and the above lncRNA are positively correlated with VEGF， which have certain value in the early diagnosis of non-small cell lung carcinoma.

[Key words] Non-small cell lung carcinoma Long non-coding RNA Vascular endothelial growth factor Correlation

First-author's address： Department of Laboratory， Tianyou Hospital Affiliated to Wuhan University of Science & Technology， Wuhan 430064， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2024.15.034

肺癌為呼吸系統最常見的惡性腫瘤，我國惡性腫瘤中肺癌發病率及死亡率位居首位，且發病率仍呈逐年上升的進展趨勢[1-2]。其中大部分為非小細胞肺癌，占80%以上，該病早期不易察覺，多數患者確診時已步入中晚期。晚期非小細胞肺癌患者5年生存率較低，且具較高復發率[3]。病理活檢是非小細胞肺癌確診的金標準，但其具有一定創傷性，并可能引發相關并發癥，臨床中受到一定限制。腫瘤標志物可作為早期診斷肺癌的輔助手段已成為專家共識，血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）為促血管生成因子，在多種惡性腫瘤的發展中有重要作用[4]。長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）參與腫瘤發生發展過程，且其可穩定存在于血清中。相關研究已證實，lncRNA H19、lncRNA DANCR、lncRNA ANRIL在胃癌、前列腺癌、甲狀腺癌等惡性腫瘤中表達水平升高，并與腫瘤的侵襲、遠處轉移和復發密切相關[5-7]。故本研究現探究非小細胞肺癌患者血清lncRNA及VEGF的表達變化及相關性，并報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年1月—2023年5月武漢科技大學附屬天佑醫院收治的90例非小細胞肺癌患者為觀察組。納入標準：非小細胞肺癌符合相關診斷標準[8]，經病理學及影像檢查確診；未接受放化療治療；生存期評估大于3個月；依從性良好。排除標準：合并其他惡性腫瘤；有心肌梗死、腦梗死病史；合并心力衰竭、高血壓、糖尿病；妊娠期或哺乳期；臨床資料不完整。選取本院同時期收治的40例肺部良性病變患者為對照組。納入標準：經病理確診為肺部良性病變；依從性良好；臨床資料完整。排除標準：惡性腫瘤；心肌梗死、腦梗死病史；合并心力衰竭、高血壓、糖尿病；妊娠期或哺乳期。本次研究經本院醫學倫理學委員會批準。患者和/或家屬均知情同意本研究。

1.2 方法

采集兩組研究對象的晨起空腹血，采集量為5.0 mL，離心半徑10 cm，按照每分鐘3 500 r的速度離心10 min，取血清采用實時熒光定量PCR法進行lncRNA H19、lncRNA DANCR及lncRNA ANRIL的檢測。首先進行總RNA的提取，檢測總RNA的濃度及純度，反轉錄處理后，定量PCR檢測，每個樣本重復測量3次取平均值，以2-ΔΔCt進行上述指標相對表達量的計算；另取血標本5.0 mL，按照每分鐘3 500 r的速度離心10 min，取血清采用酶聯免疫吸附法進行VEGF（VEGF-A、VEGF-C及VEGF-D）的定量檢測。上述檢測均由兩名專業人員嚴格按照操作標準及步驟進行。

1.3 觀察指標

統計及比較兩組血清lncRNA（lncRNA H19、lncRNA DANCR及lncRNA ANRIL）及VEGF（VEGF-A、VEGF-C及VEGF-D）的表達情況，并比較觀察組不同性別、年齡、疾病分期、分化程度及淋巴結轉移情況患者的血清lncRNA及VEGF表達水平，采用Pearson相關性分析非小細胞肺癌患者上述血清lncRNA與VEGF的相關性。

1.4 統計學處理

本研究中的數據檢驗軟件為SPSS 23.0。計數資料以率（%）表示，進行字2檢驗處理；計量資料以（x±s）表示，兩組間進行獨立樣本t檢驗處理，多組間比較采用重復測量方差分析，相關性分析則采用Pearson相關性分析。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組基線資料比較

觀察組男52例，女38例；年齡40～78歲，平均（59.91±11.63）歲；<65歲50例，≥65歲40例。

對照組男23例，女17例，年齡41～77歲，平均（59.96±11.35）歲；<65歲22例，≥65歲18例。

兩組性別與年齡比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組血清lncRNA表達比較

觀察組血清lncRNA表達均顯著高于對照組（P<0.05）；觀察組中不同性別、年齡及分化程度患者的血清lncRNA表達比較，差異均無統計學意義（P>0.05），但不同疾病分期及淋巴結轉移情況患者的血清lncRNA表達比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表1、表2。

2.3 兩組VEGF表達比較

觀察組血清VEGF表達均顯著高于對照組（P<0.05）；觀察組中不同性別、年齡及分化程度患者的血清VEGF表達比較，差異均無統計學意義（P>0.05），但不同疾病分期及淋巴結轉移情況患者的血清VEGF表達比較，差異均有統計學意義（P<0.05）。見表3、表4。

2.4 非小細胞肺癌患者血清lncRNA與VEGF的相關性分析

Pearson相關性分析顯示，非小細胞肺癌患者血清lncRNA與VEGF均呈正相關（P<0.05），見表5。

3 討論

非小細胞肺癌是肺癌常見類型，起病早期較隱匿，據相關研究統計，約有2/3的非小細胞肺癌在中晚期確診[9]。晚期非小細胞肺癌術后生存率仍較低，因此，關于非小細胞肺癌發生發展相關指標的研究具有重要臨床價值。

惡性腫瘤發生發展的過程中，VEGF是已被證實與惡性腫瘤發展密切相關的指標，VEGF-A、VEGF-C及VEGF-D作為其亞型，在惡性腫瘤新生血管形成中具有促進作用，同時其可使毛細血管通透性增加，而這也是腫瘤增殖、轉移等的重要原因[10]。lncRNA作為近年來臨床研究較熱的項目[11-13]，其在調控細胞周期及細胞分化方面具有積極的作用，而其中的lncRNA H19、lncRNA DANCR及lncRNA ANRIL，在肺癌患者中多呈現高表達，且有研究認為其對惡性腫瘤的部分miR及VEGF具有一定的調控作用[14-16]，但是其與非小細胞肺癌患者上述VEGF亞型的關系研究較為匱乏，因此仍有較大的研究空間。

本研究結果顯示，非小細胞肺癌患者lncRNA H19、lncRNA DANCR、lncRNA ANRIL及VEGF的表達均顯著高肺部良性病變患者（P<0.05），提示lncRNA H19、lncRNA DANCR、lncRNA ANRIL及VEGF與非小細胞肺癌發生有一定關系。同時不同疾病分期及淋巴結轉移情況的非小細胞肺癌患者lncRNA與VEGF存在顯著差異（P<0.05），說明lncRNA H19、lncRNA DANCR及lncRNA ANRIL及VEGF在非小細胞肺癌發展中也起著重要作用。經Pearson相關性分析發現，非小細胞肺癌患者的血清lncRNA與VEGF均呈正相關（P<0.05），因此肯定了上述血液指標在非小細胞肺癌患者中的表達變化及相關性。分析原因，lncRNA H19、lncRNA DANCR及lncRNA ANRIL等lncRNA不僅對腫瘤細胞的細胞周期具有一定影響[17-18]，且對于血管生成能力具有增強作用，而這也是腫瘤增殖及血管生成的重要影響因素，與之相關的上述VEGF亞型表達隨之變化[19-20]。

綜上所述，非小細胞肺癌患者lncRNA H19、lncRNA DANCR及lncRNA ANRIL及VEGF均呈現高表達狀態，且上述lncRNA與VEGF均呈正相關性，在非小細胞肺癌患者早期診斷中具有一定價值。

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（收稿日期：2023-10-23） （本文編輯：陳韻）