激酶ULK1對急性T淋巴細胞白血病細胞凋亡作用的研究

曹秀麗,黃 佩,馬金花,黃茂林,官亞寧,陳 艷,何志旭

(1.遵義醫科大學附屬醫院 小兒內科,貴州 遵義 563006;2.貴州省兒童醫院 小兒內科,貴州 遵義 563006;3.遵義醫科大學 組織損傷修復與再生醫學省部共建協同創新中心,貴州 遵義 563003)

急性T淋巴細胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)為一種由停滯在特定分化階段的 T 細胞前體轉化所致惡性血液系統腫瘤,目前主要以綜合化療為主,并在高風險病例中進行同種異體造血干細胞移植,仍有約20%～30%的兒童 和40%的成人患者復發[1]。因此,進一步了解其發病機制以改善治療效果及長期預后至關重要。UNC-51 樣激酶 1(Unc51-like autophagy activating kinase 1,ULK1)為一種自噬的起始蛋白,其正向和負向調節都可以根據情況保護腫瘤細胞免受過度自噬,其活性受AMP激活蛋白激酶(adenosine 5‘-monophosphate (AMP)-activated protein kinase,AMPK)的調節[2]。研究顯示,ULK1在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中存在高表達且促進AML的發生發展,MRT68921 HCl抑制ULK1以不依賴自噬方式誘導AML白血病細胞死亡[3]。Olivas-Aguirre等[4]予地塞米松干預T-ALL白血病細胞株引發了細胞線粒體斷裂,且誘導細胞發生線粒體自噬,而線粒體自噬在糖皮質激素耐藥 Jurkat 細胞株中充當一種促生存機制,但ULK1在T-ALL中的具體作用目前仍未完全闡明。鑒于此,本研究通過抑制和激活ULK1在T-ALL細胞株CEM-C7上的表達,進一步檢測細胞的凋亡情況,探討其發生凋亡的生物學行為具體途徑及與AMPKα/ULK1軸之間的關系。

1 材料與方法

1.1 細胞株、主要試劑及儀器 人T-ALL細胞株CEM-C7為四川大學華西醫院饋贈;ULK1激活劑LYN-1604(HY-101923B)、ULK1抑制劑MRT68921(HY-100006A)均從MedChemEepress公司購買;凋亡試劑盒(Annexin V-Alexa Fluor488/Pl Apoptosis Detection Kit)購自蘇州四正柏生物科技有限公司;Edu-488細胞增殖檢……