血清C反應蛋白、淀粉樣蛋白A及免疫球蛋白M聯合檢測對呼吸道合胞病毒感染嚴重程度的診斷效果

石明娟 中國科學院大學深圳醫院兒科,廣東省深圳市 518107

呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)主要累及鼻、喉、氣管、支氣管以及毛細支氣管,具有高度傳染性。RSV感染的癥狀表現因患兒年齡、健康狀況以及感染累及部位而異,多見于2歲以內小兒[1]。如果RSV感染累及支氣管尤其是毛細支氣管,癥狀常常較嚴重,可能出現局灶性肺不張、壞死性毛細支氣管炎,嚴重者可引起呼吸衰竭和心力衰竭[2]。因此,盡早診斷對改善患兒病情和預后至關重要。目前根據RSV感染的病情評估僅依據主觀的臨床表現,缺乏可信度較高的評估指標。研究表明,RSV患兒易聚集炎性因子,出現局部高水平的炎癥浸潤兒導致病情加重,使肺組織結構發生不可逆的變化[3]。本文將探討RSV檢測效能低下的原因,并研究血清C反應蛋白(CRP)、淀粉樣蛋白A(SAA)及免疫球蛋白M(IgM)與呼吸道合胞病毒感染病情程度的嚴重性,并進一步探討CRP、SAA、IgM聯合檢測診斷RSV的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院于2020年1月—2023年4月收治的110例呼吸道合胞病毒感染患兒作為觀察組,其中男66例,女44例,平均年齡(4.23±0.32)歲。納入標準:(1)存在咳嗽、鼻塞或流涕、輕度咽喉痛、耳痛等癥狀;(2)配合靜脈抽血者;(3)經病毒檢測證實為呼吸道合胞病毒感染;(4)年齡<10歲。排除標準:(1)合并其他病原體感染;(2)既往有免疫缺陷病史;(3)近1個月內有免疫抑制劑用藥史;(4)臨床資料不完整者;(5)既往有先天性心臟病史。并選取同時期110例健康體檢者作為對照組。根據《毛細支氣管炎診斷、治療與預防專家共識》判斷病情嚴重程度,將觀察組分為輕型(n=38)、中型(n=30)、重型(n=42)三個亞組。

1.2 方法 患兒于入院當日,所有研究對象于體檢當日在空腹狀態下采血,劑量為3mL,確保2h前沒有服用任何藥物的情況下進行采血。靜脈血混勻后用3 000r/min的轉速分離10min,得到血清,放置于-80℃冰箱中保存。選取酶標儀(BK-EL10C,濟南好徠寶醫療器材有限公司)檢測CRP、SAA、IgM水平。首先以1∶500的比例稀釋血液,于待測樣品孔、空白孔、標準孔分別滴入10μL血清、標準品和稀釋液。而后添加10μL酶聯物混勻,于45℃水浴箱放置30min后拿出甩干。蒸餾水洗滌后擦干,向每孔加入100μL TMB顯色液混勻,于45℃水浴箱放置20min。溫浴后拿出,向其加入100μL 終止液,溶液由藍變黃時讀取OD值,并繪畫曲線確定數值。比較不同病情程度患兒CRP、SAA、IgM水平。SAA試劑盒購于武漢純度生物有限公司,CRP試劑盒購于上海信裕生物科技有限公司,試劑盒購于上海科艾博生物有限公司。各組之間血清C反應蛋白、淀粉樣蛋白A及免疫球蛋白M水平,并將病情程度與血清C反應蛋白,淀粉樣蛋白A及免疫球蛋白水平作Pearson相關性分析。繪制曲線下面積分析單獨檢測和聯合檢測的應用價值。

2 結果

2.1 兩組血清CRP、SAA、IgM水平比較 觀察組CRP、SAA及IgM水平顯著高于對照組,差異具有統計學意義(P<0.05),見表1。

表1 兩組血清CRP、SAA、IgM水平比較

2.2 不同病情嚴重程度患兒血清CRP、SAA、IgM水平比較 重型組CRP、SAA及IgM水平顯著高于中型組,中型組CRP、SAA及IgM水平顯著高于輕型組,差異具有統計學意義(P<0.05),見表2。

表2 不同病情嚴重程度患兒血清CRP、SAA、IgM水平比較

2.3 血清CRP、SAA、IgM水平與病情程度的相關性比較 CRP、SAA及IgM水平與呼吸道合胞病毒感染病情程度成呈正相關性(r=0.652、0.489、0.258,P<0.001),CRP、SAA及IgM水平越高,患兒近期療效越差。

2.4 血清CRP、SAA、IgM水平對呼吸道合胞病毒感染的診斷價值 IgM、SAA、CRP及聯合診斷的曲線下面積為0.741、0.814、0.631、0.903,聯合檢測曲線下面積顯著大于單獨檢測,敏感度和特異度分別為94.0%和82.0%,見表3。

表3 血清CRP、SAA、IgM水平對呼吸道合胞病毒感染的診斷價值

3 討論

RSV感染起病急驟,患兒因自身免疫能力不成熟,抗感染能力弱,患病嚴重可引起中重度的呼吸困難甚至呼吸驟停。目前根據RSV感染的病情評估僅依據主觀的臨床表現,病原學指標診斷效能較低。現有多種研究表明,RSV感染患兒T細胞功能紊亂,體內細胞因子的變化可反映病情程度和治療效果[4]。CRP是一類急性時相反應蛋白,在正常機體水平低下,出現感染性疾病時,6～8h水平可陡劇上升,CRP降至正常水平時間較長,血漿濃度可長時間保持穩定,水平越高表示組織損傷程度越嚴重,較為準確地體現免疫屏障被破壞程度[5]。報道指出,SAA作為一種多基因編碼的急性敏感性反應蛋白,在感染急性期被免疫細胞大量合成釋放入血,感染3～6h后水平開始升高,病原體被清除后可降至正常水平。研究表明,RSV感染可觸發下呼吸道過度免疫反應,可通過各種免疫激活導致IgM水平升高[6]。

本文結果顯示,觀察組CRP、SAA及IgM水平顯著高于對照組,證實在RSV感染后CRP、SAA及IgM水平顯著升高。究其原因,SAA在受到RSV抗原的刺激后大量分泌入血,感染6h以內其含量可升高1 000倍;RSV感染可引起多器官損傷,并觸發巨噬細胞釋放炎性因子,導致CRP含量水平的提高;RSV作為抗原可刺激B細胞活化成熟,刺激特異性抗體大量釋放,進而提高IgM濃度,與相應RSV抗原結合生成多級別生物學效應,刺激機體產生氣道高反應性及炎癥。有學者的報道指出,RSV感染可出現SAA水平的升高,4～6h達到峰值,與本文結果相一致[7]。此外,本文重型組CRP、SAA及IgM水平顯著高于中型組,中型組CRP、SAA及IgM水平顯著高于輕型組,證實預后不良或病情危重患兒CRP、SAA及IgM水平更高。也有研究指出,SAA和CRP與感染性疾病中的嚴重程度呈正相關,與本文結果一致[8]。究其原因,CRP、SAA及IgM水平急劇升高時,免疫系統被激活后促進B細胞的表達,誘發過敏反應,導致氣道纖維化改變和慢性炎癥的發生,因此CRP、SAA及IgM大量或過度表達時并不是RSV后單純的應激行為,而是全程影響病理變化和免疫機制,CRP、SAA及IgM水平越高預示RSV病情越嚴重,與下呼吸道的不可逆損傷存在密切聯系。有學者的報道指出,CRP、SAA及IgM水平與呼吸道合胞病毒感染病情程度成正相關性,證實CRP、SAA及IgM水平越高,患兒近期療效越差[9]。本文結果顯示,聯合檢測曲線下面積顯著大于單獨檢測,證實聯合檢測針對病毒性感染有較高的診斷價值。究其原因,CRP水平升高多見于手術感染、惡性腫瘤、自身免疫性疾病等多種情況,單獨檢測某種疾病時特異性不高,且隨著炎癥反應被控制后數日CRP的高水平還未回落。而SAA半衰期短于CRP當病原體被清除后其數值可迅速降低。也有學者的研究顯示,SAA在兒童早期感染性診斷中的敏感性高達83%[10],與本文結果相符。

綜上所述,血清CRP、SAA及IgM聯合檢測可提高RSV的診斷效能,可高效評估RSV的病情嚴重程度,臨床意義顯著。