高遷移率族蛋白1通過調控自噬因子P62調節心肌細胞纖維化

聶雅琴 烏日娜 金慧 張廣平 李永明 智利 薛仕煊 娜日格樂

心肌纖維化是多種心臟疾病、進展的重要環節，心肌細胞代謝異常、心肌肥厚、冠狀動脈硬化等因素均可導致心臟受損，引起心肌纖維化，造成心臟功能障礙，甚至威脅生命。心肌纖維化主要表現為心肌中膠原纖維過度沉積，膠原濃度和體積分數顯著升高，膠原類型不均衡及排列紊亂[1]。心肌纖維化參與各種心血管疾病的發生、進展過程，如充血性心力衰竭、高血壓性心臟病、心肌梗死、擴張型心肌病等。此外，在代謝性疾病中也可見到不同程度的心肌纖維化[2]。研究表明，自噬與心肌纖維化密切相關。自噬是溶酶體降解蛋白質的高度保守過程，對機體的生存、分化、發育和穩態至關重要[3]。高遷移率族蛋白1（HMGB1）為高度保守的核蛋白，廣泛分布于哺乳動物細胞中且含量豐富，平均10～15個核小體中含有1個HMGB1分子[4]。HMGB1可促進促炎癥因子產生，參與細胞增殖、分化、侵襲和自噬等過程[5]。本研究探討HMGB1通過調控自噬對心肌纖維化產生作用，以期為心肌纖維化的預防及臨床診治提供新方法。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

人心肌細胞AC16購于同派生物科技股份有限公司細胞庫。α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）抗體、Ⅰ型膠原蛋白（CollagenⅠ）抗體購于英國Abcam公司。HMGB1、微管相關蛋白1輕鏈3（LC3）-Ⅱ/LC3-Ⅰ、P62抗體、磷酸肌醇-3-激酶3（PIK3C3）抗體購于美國Sigma公司。哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、磷酸化mTOR（p-mTOR）抗體購于美國Cell Signaling Technology公司。

1.2 細胞培養

AC16細胞使用含10%胎牛血清、100 U/mL青霉素、100 U/mL鏈霉素的DMEM培養基（完全培養液）培養，置于37 ℃、5%CO2恒溫培養箱中，濕度為70%～80%?！?br>