高滲環(huán)境調(diào)控鈣黏蛋白表達并影響擬胚體分化*

許健宜， 吳引弟， 方麗君， 蔣虹婧， 孫盱衡， 劉 青， 肖 聰， 林展翼△

［1華南理工大學醫(yī)學院，廣東 廣州 510006，2南方醫(yī)科大學附屬廣東省人民醫(yī)院（廣東省醫(yī)學科學院），廣東 廣州 510180］

誘導多能干細胞具有多功能的分化潛力和倫理優(yōu)勢，已成為多種疾病（如退行性疾病、心肌損傷、骨組織再生等）治療與研究的潛在種子細胞來源［1-3］。擬胚體（embryoid body， EB）是多能干細胞在懸浮培養(yǎng)中形成的三維細胞聚集體［4］，可以響應生物力學信號［4］，編程為特定細胞譜系，對心肌細胞［5］、神經(jīng)細胞［6］和血管細胞［7］等依賴于初始EB 步驟的定向分化至關重要。然而，誘導多能干細胞廣泛臨床應用的挑戰(zhàn)之一是高效地引導其進入特定譜系，因為單純依賴EB 的自發(fā)分化常導致分化多樣性不可控［8］。越來越多的研究者開始關注EB 分化影響因素的研究，希望通過理清各種體外影響因素的規(guī)模化調(diào)控，實現(xiàn)EB的可擴展和可重復分化［9］。

細胞外環(huán)境中的物理信號，例如力學刺激［10］、幾何形狀和剛度等［4，9］，對于譜系規(guī)范有著重要影響。另外已有研究表明，細胞大小和細胞形態(tài)對細胞狀態(tài)和分化表型有著顯著影響［11-13］，由于滲透壓能夠直接影響細胞的大小和形態(tài)，因此，本研究考慮環(huán)境中滲透壓也是規(guī)范化調(diào)控過程中必不可少的因素之一。聚 乙 二 醇300（polhethylene glycol 300， PEG 300）是一種非離子型的水漿性聚合物，已被用于改變培養(yǎng)液滲透壓，GUO 等［14］研究者表明，添加2%的PEG 300后，細胞大小和力學在2 min內(nèi)達到平衡，并且無明顯的細胞毒性。但對于培養(yǎng)液中的滲透壓對EB的分化影響尚不明確。……