水蛭凍干粉與微粉的研究進展

王文祎 楊瑤珺▲ 趙衛濤

1.北京中醫藥大學中藥學院，北京 102488；2.華治醫藥 （云南）有限公司，云南昆明 650199

水蛭為水蛭科動物螞蟥（Whitmania pigraWhitman.）、水蛭（Hirudo nipponicaWhitman.）或柳葉螞蟥（Whitmania acranulataWhitman.）的干燥全體。三者分別亦稱寬體金線蛭、日本醫蛭、尖細金線蛭，是我國常用的動物類中藥，具有破血通經、逐瘀消癥的功效，主要用于治療血瘀經閉、癥瘕痞塊、中風偏癱等[1]。研究表明，蛋白多肽類成分是水蛭的主要活性成分，具有抗腫瘤、抗血栓、抗動脈粥樣硬化等功效[2]。而炮制過程中的溫度上升會導致蛋白質變性，可能導致水蛭炮制后抗凝活性下降[3]。而飲片（藥材）的粒度是影響其有效成分釋放的主要因素之一[4]，隨著制藥技術和設備的不斷更新和發展以及人們對藥品質量效果要求的日益提高，越來越多新興技術應用到中藥的炮制中，而近年來中藥凍干粉和超微粉也成為研究和使用的熱點。

凍干技術又稱真空冷凍干燥技術。由于在低溫真空條件下進行[5]，利用升華使水蒸氣逸出[6]，可最大限度地減少化學反應，避免生物和微生物退化降解[7-8]，可有效避免物料所含熱敏性成分的破壞，對其長期保存、提升質量、降低成本等方面也有積極作用[9]。中藥微粉又稱中藥超微粉，但是目前《中華人民共和國藥典》對于中藥超微粉并沒有明確定義，也沒有明確的粒徑范圍。有研究認為微粉粒徑應為＜45 μm，也有認為其粒徑一般在1～75 μm。因其改變了原有物理性質，相較于傳統飲片有體外溶出度多，體內有效藥物濃度較高等優勢[10-11]。

本文對以上兩種形式的水蛭粉的研究情況進行綜述，為水蛭在凍干和超微炮制品的進一步研究和使用提供參考。

1 水蛭凍干粉

早在2008年，韓志等[12]已對水蛭的真空冷凍干燥展開研究，建立了一套凍干流程，但因其選擇的水蛭品種為藥典并未收錄且不常用的寬水蛭（Hirudo breviformis），也并未對凍干之后炮制品的抗凝活性進行測定比較，因此后續還有待更多的研究來驗證這一體系。

隨后，水蛭凍干粉更多以粉針劑的形式被學者們研究。鐘山等[13]制備了螞蟥凍干粉針并建立其質量控制方法，可更好地改善螞蟥多肽這一活性物質的保存和質量提升。徐長根等[14]建立了檢測水蛭凍干粉針劑指紋圖譜HPLC的方法，為其質量監控提供了依據。張玉娟等[15]證明了實驗室自制的水蛭低肽與重組水蛭素的藥理活性相似，是作用很強的凝血酶特異性抑制劑，且低肽的分子量與水蛭素存在差異，應是一種新發現的肽類，具有良好應用前景。

魯增輝等[16]從炮制的角度研究了日本醫蛭超低溫凍干品、鮮品和曬干品的抗凝活性差異，凍干品抗凝活性可達（2974±160） U/g（U為抗凝血酶活性單位），鮮品達（380±174）U/g，曬干品為（111±10）U/g。雖然這一結果可充分表明凍干品形式的水蛭可很好保留其有效活性成分，但相較于《中華人民共和國藥典》16 U/g的判定標準[1]，以及相關研究對于日本醫蛭抗凝活性檢測結果[17-18]來看，結果差異較大，其操作方法和滴定環節有待進一步驗證。丁釗等[18]為日本醫蛭凍干粉建立了一套系統的質量評價標準。楊帆等[19]研究了水蛭凍干粉對糖尿病腎病模型大鼠腎組織損傷的保護及其對瘀血阻絡證相關指標的干預作用；蔣倩倩[20]評價了水蛭凍干粉的急性毒性，比較水蛭凍干粉及水蛭飲片對急性血瘀證大鼠的作用，均取得較好的實驗效果。

專利方面，也有許多企業和科研院所對水蛭凍干粉的實踐應用做出新的嘗試，關于水蛭素凍干粉用于骨關節疼痛外用膏[21]、功能性勃起功能障礙制劑[22]、預防或治療神經系統疾病研究[23]等發明專利不斷被公開。

除疾病的治療研究外，水蛭凍干粉還被廣泛應用到醫美行業的研發中，對于祛皺美白生肌、除痘祛瘢、護發健發等方面也均有涉及[24-25]。

2 水蛭（超）微粉

鄭國玲等[26]研究了水蛭微粉對原發性高血壓患者和急性腦梗死患者血漿血管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF）和血小板α-顆粒膜蛋白140（α-granular membrane protein，GMP-140）的影響，認為微粉治療組有更好的效果。劉瑾等[27]考察了水蛭微粉對實驗性動脈粥樣硬化模型兔血脂水平影響；王志剛[28-29]等也研究了水蛭超微粉對大耳白兔抗氧化功能和血液流變學的影響，以及血脂代謝的影響；趙耀光等[30]開展了水蛭超微粉調節兔肝臟脂代謝相關酶活性研究；而王留等[31]考察了水蛭超微粉對調節兔肝臟脂代謝的作用研究和影響。以上實驗結果均表明超微粉形式的水蛭飲片較對照組有更好的效果。

除藥理藥效外，還有學者從水蛭超微粉的規格優勢和炮制方法展開研究。牛愛軍等[32]考察了大鼠超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde， MDA）等指標，認為水蛭微粉較粗粉在改善腦缺血梗死損傷，提高臨床療效有更明顯的優勢。隋在云等[33]也通過對比水蛭水煎劑、普通粉和微粉的不同劑量考察了其對急性血瘀大鼠vWF、全血黏度等指標影響，認為水蛭微粉能夠改善急性血瘀模型大鼠血液流變性，具有顯著的活血化瘀作用。林曉珊等[34]對水蛭煎劑、普通散劑和超微粉作用于小鼠抗凝血、抗血栓進行比較，認為超微粉規格藥效最強，且氣味和口感也得到明顯的改善。相似的研究也可參考張中華等[35]探討炮制與超微粉碎技術對水蛭藥效影響的研究。

專利方面，也有機構對高活性直接口服水蛭微粉的制造工藝[36]、祛皺美白的水蛭超微粉化妝品及其制備方法[37]以及治療心腦血管疾病的水蛭微粉制劑及制備方法[38]等領域進行專利申請的探索。

3 總結與展望

通過以上的成果整理可以看出，關于水蛭凍干粉和超微粉的研究項目主要來源于高校院所的基金項目，以及企業自發的科研立項。從研究方向來看，高校院所側重的多為實驗動物的藥理研究以及炮制工藝差別帶來的優勢對比研究，科研成果以學術論文為主；而企業主導或參與的課題更多傾向于面向擴大水蛭凍干粉和超微粉的應用領域，將其以更多形式應用到更多的場景中去，科研成果以發明或實用新型專利為主。對于水蛭這類活血化瘀中藥，凍干粉和超微粉算是一種新的飲片形式和規格。隨著中藥現代化的不斷發展，以及中藥新資源的不斷發現，將會對水蛭的進一步研究和良性發展奠定良好的基礎。