血清CYR61、NCAM-1在急性腦梗死表達水平及對預后的預測價值

張士杰 王秋菊 盛文達

河南省鄭州市第九人民醫院神經內科 450053

急性腦梗死是由于腦血管閉塞導致局部腦血灌注中斷所致,已成為當今嚴重威脅人類健康的疾病之一,給家庭和社會造成沉重負擔。因此,早期準確評估急性腦梗死病情及預后,對于指導臨床治療和合理配置藥物具有重要意義。富含半胱氨酸蛋白61(CYR61)也被稱為CCN1,是CCN蛋白家族的成員。大量數據表明CYR61參與血管生成、胚胎發育和組織修復過程[1]。神經細胞黏附分子-1(NCAM-1)是一種細胞黏附分子,它在膠質細胞和神經元中表達,與細胞因子和離子通道在神經元生長和細胞相互作用中發揮作用[2]。但目前關于CYR61、NCAM-1在急性腦梗死疾病中表達尚不明確。基于此,本文通過檢測CYR61及NCAM-1在血清中水平,初步探討二者與疾病嚴重程度和預后的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021年1月—2022年6月本院收治的156例急性腦梗死患者為觀察對象,其中男96例,女60例,年齡(62.35±4.12)歲,收縮壓(127.55±8.51)mmHg(1mmHg=0.133kPa),舒張壓(76.46±4.53)mmHg。根據美國國立衛生研究院卒中量表(NIHSS)評分將患者分為輕度組(≤15分,49例)、中度組(16～30分,62例)和重度組(≥31分,45例)。同期選取于本院進行健康體檢120例志愿者作為對照組,經頭顱磁共振成像證實沒有急性腦梗死,其中男63例,女57例,年齡(61.64±3.35)歲,收縮壓(125.62±8.69)mmHg,舒張壓(75.62±4.69)mmHg。兩組一般資料比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。納入標準:(1)急性腦梗死患者診斷參考《中國急性缺血性腦卒中診療指南2018》[3],并通過頭顱計算機X線斷層掃描或磁共振成像檢查佐證;(2)年齡18～80歲;(3)所有入選患者均為首次卒中,既往無嚴重神經功能障礙史;(4)腦梗死發病時間≤72 h;(5)患者及其家屬簽署知情同意書。排除標準:(1)意識受損,生命體征不穩定;(2)嚴重癡呆,精神失常不能配合;(3)孕婦;(4)在急診室接受靜脈溶栓治療的患者;(5)患者年齡<18歲。本研究經過醫院道德倫理委員會批準通過。

1.2 標本采集及指標監測 健康人群于體檢當日,患者在禁食1晚后,于6:00—7:00之間采集血液樣本,并將其放入5ml Eppendorf(EP)試管中。2 500g/min離心12min。分離血清并以1～2ml等份保存于-80℃。采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定血清CYR61、NCAM-1水平。

1.3 隨訪 記錄急性腦梗死患者自入院起2個月內的預后情況,出院患者采用電話或者門診方式進行隨訪,根據改良Rankin量表(mRS)將患者分為預后不良組(分值≥3分,75例)和預后良好組(分值<3分,81例),量表總分值0～6分。

2 結果

2.1 兩組血清CYR61、NCAM-1水平比較 研究組血清CYR61水平較對照組升高[(10.39±2.24)μg/L VS (4.56±1.05)μg/L,t=26.362,P<0.05],NCAM-1水平較對照組降低[(169.36±36.31)ng/ml VS (212.55±48.58)ng/ml,t=8.453,P<0.05)]。

2.2 研究組不同病情程度患者血清CYR61、NCAM-1水平比較 三組患者血清CYR61水平顯示:重度組>中度組>輕度組(P<0.05),而血清NCAM-1水平顯示:重度組<中度組<輕度組(P<0.05)。見表1。

表1 不同病情程度患者血清CYR61、NCAM-1水平比較

2.3 血清CYR61、NCAM-1表達與疾病嚴重程度的相關性分析 Spearman法分析結果顯示,急性腦梗死患者血清中CYR61水平與疾病嚴重程度呈顯著正相關(r=0.825,P<0.05),NCAM-1水平與病情嚴重程度呈顯著負相關(r=-0.584,P<0.05)。見圖1。

圖1 血清表達與病情嚴重程度相關性分析

2.4 不同預后患者血清中CYR61、NCAM-1水平比較 預后不良組患者血清中NCAM-1水平較預后良好組患者降低[(7.05±1.95)μg/L VS (14.01±2.56)μg/L,t=13.065,P<0.05],而CYR61水平較高[(197.76±41.75)ng/ml VS(138.69±30.44)ng/ml,t=10.030,P<0.05]。

2.5 血清中CYR61、NCAM-1水平對預后不良的預測價值 血清CYR61、NCAM-1水平預測預后不良的AUC分別為0.910(95%CI:0.853～0.950)、0.892(95%CI:0.832～0.936),最佳截斷值分別為10.42μg/L,153.68ng/ml,對應的敏感度分別為86.67%、76.00%,特異度分別為88.89%、88.89%,聯合預測的AUC為0.955(95%CI:0.910～0.982),敏感度為89.33%,特異度為87.65%。見圖2。與單獨指標比較,CYR61聯合NCAM-1預測預后不良AUC升高。

圖2 血清CYR61、NCAM-1水平預測預后不良的ROC曲線

3 討論

目前主要依靠臨床表現、影像學診斷急性腦梗死,但部分患者患病24h后無明顯影像學改變,且偏頭痛、癲癇發作等疾病癥狀與腦卒中相似,影響病情診斷。如果可早期檢測患者血液中特定生物標記物可能有助于在緊急情況下進行診斷,特別是對于缺乏CT或MRI掃描儀小型醫療機構。

NCAM-1也被稱為CD56,具有參與細胞間信息傳導、維持內皮細胞屏障的功能。曾偉雄等人[4]研究表明冠心病患者血清NCAM-1水平與冠狀動脈的病變嚴重程度密切相關,一定程度上反映心肌損傷的嚴重程度。本文中NCAM-1在急性腦梗死患者血清中表達降低,隨著病情嚴重程度及預后的加重逐漸降低,可見其與病情嚴重程度及預后呈負相關,可能作為反映急性腦梗死病情進展的潛在血清指標之一,其作用機制可能為在血管病理情況下,如動脈粥樣硬化,ICAM-1等黏附分子被內皮細胞誘導表達,破壞了內皮屏障的穩定性以及功能障礙,并促使內皮功能失調,進一步促進動脈粥樣硬化的形成。結果還顯示,預后不良的患者血清NCAM-1水平較存活患者降低,表明NCAM-1水平降低與急性腦梗死不良預后相關,可作為短期預后預測的早期指標,以便醫師在臨床中動態檢測指標變化,及時予以有效治療措施,改善患者預后。

CYR61是一種細胞外基質蛋白,在組織修復、發育、細胞黏附、遷移及增殖等多種生理功能中發揮作用。研究表明,CYR61過表達與乳腺癌、胃癌及口腔癌等癌細胞侵襲有關[5]。此外,CYR61通過參與炎癥微環境的調控,介導炎癥疾病、自身免疫性疾病的發展過程,被認為是一種新的促炎因子[6]。正常情況下,CYR61低表達可維持機體生理需求,然而炎癥因子、生長因子和機械張力刺激等因素可導致CYR61合成增加。高表達CYR61分泌到細胞外基質后,與細胞膜上多種整合素受體結合,發揮多種生物學功能[7]。本研究中,與健康志愿者相比,患者血清CYR61水平上調,隨著病情加重及預后不良發生逐漸升高,提示CYR61與急性腦梗死病情及預后均關系密切,其作用機制可能為CYR61通過促進單核細胞、巨噬細胞等對血管內皮細胞的黏附作用,增強血管平滑肌細胞的遷移及增殖能力及各種促炎因子的分泌,從而參與疾病發展進程。此外,急性腦梗死患者血清中CYR61、NCAM-1表達與疾病嚴重程度均具有相關性,進一步表明兩者與疾病的發生發展進程關系密切。且血清CYR61、NCAM-1聯合使用AUC為0.955,顯著高于單項檢測,還可提高預測敏感性。因此,兩者聯合可預示患者預后不良,具有足夠特異性。

綜上所述,在急性腦梗死患者血清中CYR61水平升高,NCAM-1水平降低,二者聯合檢測可能作為預測急性腦梗死功能結局的潛在生物標志物。但本研究納入病例數較少,且來自同一中心,后續將完善實驗,并更深一步分析兩者在急性腦梗死疾病中的具體作用機制。