膀胱癌組織中MYBL2、AGR2、PAX8及NR4A3表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性

馬冰冰

作者單位：450000 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院

膀胱癌為臨床常見的惡性腫瘤,具有較高的發(fā)生率與死亡率[1-2],其發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜,臨床并未徹底明晰,往往認(rèn)為與遺傳、環(huán)境等因素聯(lián)系緊密[3-4]。膀胱癌易復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移,且在患病初期多數(shù)患者無明顯癥狀,臨床診斷較為困難,患者預(yù)后較差[5]。因此,選擇與膀胱癌發(fā)生與發(fā)展的有關(guān)生物標(biāo)志物,于早期及時(shí)診斷出疾病,并施以個(gè)體化的治療,對于改善患者預(yù)后意義重大?；诖?本研究分析成髓細(xì)胞瘤轉(zhuǎn)錄因子第2亞型(MYBL2)、前梯度蛋白2(AGR2)、配對盒基因8(PAX8)、核受體亞家族4成員3(NR4A3)在膀胱癌組織內(nèi)的表達(dá)及與患者臨床病理特征、預(yù)后的關(guān)系。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021年1月至2022年2月本院收治的87例膀胱癌患者。納入標(biāo)準(zhǔn):經(jīng)病理檢查證實(shí);患者生命體征平穩(wěn);意識(shí)清晰,能夠正常交流;依從性良好。排除標(biāo)準(zhǔn):合并其它惡性腫瘤者;伴有凝血系統(tǒng)紊亂者;合并自身免疫性疾病者;存在肝腎功能衰竭者。所有患者中,男性53例,女性34例;年齡41～75歲,平均年齡(60.31±2.59)歲;腫瘤直徑1.3～4.8 cm,平均直徑(2.53±0.46)cm;臨床分期:50例Ⅰ～Ⅱ期,37例Ⅲ～Ⅳ期;分化程度:41例低分化,46例中、高分化;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移42例。

1.2 方法

收集所有患者的癌組織與癌旁正常組織(距離病灶邊緣≥3 cm),將其分別納入觀察組與對照組,以免疫組織化學(xué)法檢測MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表達(dá)。具體檢查步驟:運(yùn)用10%甲醇溶液持續(xù)固定上述標(biāo)本24 h,石蠟包埋,制作成4 μm切片;然后以檸檬酸鈉緩沖液開展抗原修復(fù),滴入3%過氧化氫溶液,在室溫條件下持續(xù)孵育15 min,然后以磷酸緩沖鹽溶液(PBS)洗滌3次;以10%的山羊血清在室溫環(huán)境下封存0.5 h,滴入一抗,次日以PBS洗滌3次,滴入二抗,再于室溫下孵育0.5 h,最后染色、脫水、封片、鏡檢。陽性評估依據(jù):①染色強(qiáng)度:不著色為0分;淡黃色為1分;棕黃色為2分;棕褐色為3分。②陽性表達(dá)率:陽性表達(dá)率在1%～10%間為1分;陽性表達(dá)率在>10%～50%間為2分;陽性表達(dá)率>50%為3分。兩者相乘>3分為陽性,相反則為陰性。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)癌組織及癌旁組織中MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3陽性表達(dá)差異。(2)MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表達(dá)與患者臨床病理特征間的關(guān)系:收集患者年齡、性別等資料,探究四者表達(dá)與各項(xiàng)特征間的關(guān)系。(3)MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表達(dá)與患者生存率的關(guān)系:隨訪1年,分析四者表達(dá)與患者生存率的聯(lián)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3陽性表達(dá)

癌組織中的MYBL2、AGR2、PAX8陽性表達(dá)率高于癌旁組織,NR4A3陽性表達(dá)率低于癌旁組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 組織中MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3的陽性表達(dá)情況(例,%)

2.2 MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表達(dá)與患者臨床病理特征間的關(guān)系

MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤直徑無關(guān),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與患者分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表達(dá)與患者臨床病理特征間的關(guān)系(例,%)

2.3 MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3表達(dá)與患者生存率的關(guān)系

隨訪1年,MYBL2、AGR2、PAX8陽性表達(dá)生存率分別為42.86%(18/42)、42.11%(16/38)、41.30%(19/46),低于陰性表達(dá)的66.67%(30/45)、65.31%(32/49)、70.73%(29/41);NR4A3陽性表達(dá)的生存率為77.78%(14/18),高于陰性表達(dá)的49.28%(34/69),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.979、4.658、7.590、4.689,P=0.026、0.031、0.006、0.030)。

3 討論

膀胱癌的患病率與致死率均處在較高水平,50歲以上男性為該病的高發(fā)群體[6]。近年,隨著各種致癌因素的增加,膀胱癌的患病人數(shù)急劇上漲。由于臨床并未徹底了解該病的發(fā)病機(jī)制,故積極探尋與疾病發(fā)生的分子生物標(biāo)志物用于指導(dǎo)臨床采取針對性治療,對于降低死亡率至關(guān)重要。

本研究結(jié)果顯示,癌組織的MYBL2、AGR2、PAX8陽性表達(dá)率高于癌旁組織,NR4A3陽性表達(dá)率低于癌旁組織;且四者表達(dá)與患者分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),由此可見,在膀胱癌患者癌組織內(nèi),上述MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3的表達(dá)處于異常,與疾病的發(fā)生、發(fā)展具有緊密聯(lián)系。分析原因認(rèn)為,MYBL2屬于高度保守的癌基因編碼轉(zhuǎn)錄因子,與細(xì)胞周期、細(xì)胞增殖分化等多種病理過程密切相關(guān)[7]。MYBL2的高表達(dá)會(huì)抑制因子DKK1調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin信號(hào)通路,從而影響膀胱癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移。AGR2是一種分泌或定位在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的蛋白,與外胚層、早期階段前后位的分化等具有緊密聯(lián)系[8]。AGR2的高表達(dá)會(huì)抑制p53磷酸化及其活性,使其失去調(diào)節(jié)細(xì)胞周期能力,進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生癌變。PAX8是轉(zhuǎn)錄因子配對盒基因家族內(nèi)的一員,可參與細(xì)胞增殖、免疫反應(yīng)等病理生理過程[9]。PAX8的高表達(dá)會(huì)減弱血管內(nèi)皮細(xì)胞與癌細(xì)胞間的粘附作用,進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移。NR4A3是抑癌基因,其表達(dá)在多種癌組織內(nèi)降低,當(dāng)其表達(dá)上升時(shí),能夠抑制癌細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移[10]。本研究結(jié)果還顯示,MYBL2、AGR2、PAX8表達(dá)越高,NR4A3表達(dá)越低,患者預(yù)后越差。

綜上所述,MYBL2、AGR2、PAX8、NR4A3在膀胱癌組織內(nèi)表達(dá)異常,且參與腫瘤的發(fā)生與發(fā)展,與患者預(yù)后存在緊密聯(lián)系。