結(jié)腸癌組織中CXCR2的臨床表達(dá)意義

胡選亞 葉詠雪 楊叢家 徐錄梅

作者單位：473000 河南省南陽(yáng)市第一人民醫(yī)院

結(jié)腸癌是一種發(fā)生于結(jié)腸黏膜上皮的惡性腫瘤,早期常無(wú)癥狀,病情不斷進(jìn)展可誘發(fā)腹痛、便血、體重下降等,若不及時(shí)治療,會(huì)增加死亡風(fēng)險(xiǎn)[1-2]。手術(shù)為治療結(jié)腸癌主要方法,通過(guò)切除腫瘤組織,能夠阻止腫瘤繼續(xù)增殖及擴(kuò)散,以延長(zhǎng)患者生存時(shí)間[3-4]。但長(zhǎng)期隨訪發(fā)現(xiàn),仍有較多結(jié)腸癌患者預(yù)后欠佳,故還需尋找更為客觀的生物學(xué)指標(biāo),為結(jié)腸癌早期診斷、預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)提供參考。趨化因子是一類(lèi)由細(xì)胞分泌的信號(hào)蛋白或小細(xì)胞因子,在敗血癥、慢性炎癥及傷口愈合中起到重要作用,在惡性腫瘤中也存在一定異常表達(dá)。而CXC趨化因子受體2(CXCR2)為趨化因子CXC亞家族受體,臨床認(rèn)為其與特異性配體結(jié)合后,可激活細(xì)胞內(nèi)多種信號(hào)傳導(dǎo),以介導(dǎo)細(xì)胞參與疾病的生理、病理多個(gè)過(guò)程。相關(guān)研究顯示[5-6],CXCR2在乳腺癌、食管癌等多種惡性腫瘤中均存在較高表達(dá),與腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移等關(guān)系密切。但關(guān)于CXCR2在結(jié)腸癌中的臨床表達(dá)及臨床意義仍需進(jìn)一步明確。鑒于此,本研究分析結(jié)腸癌組織中CXCR2趨化因子受體的臨床表達(dá)意義。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年5月至2019年5月我院收治的73例結(jié)腸癌患者作為研究對(duì)象,其中男性42例,女性31例;年齡48～72歲,平均年齡(58.74±5.18)歲;體質(zhì)量指數(shù)18～28 kg/m2,平均體質(zhì)量指數(shù)(23.19±1.93)kg/m2;文化程度:26例高中及以上,47例初中及以下。納入標(biāo)準(zhǔn);均經(jīng)手術(shù)病理確診為結(jié)腸癌;精神狀態(tài)正常;患者及家屬簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn):存有肝腎功能衰竭;合并凝血功能障礙;存在急慢性感染;伴有其他惡性腫瘤;存在免疫功能障礙;預(yù)計(jì)生存期不足3個(gè)月。

1.2 方法

所有患者均經(jīng)手術(shù)采集病理標(biāo)本及癌旁標(biāo)本,經(jīng)福爾馬林固定、石蠟包埋切塊,保持病理切片厚度4 μm,之后開(kāi)展免疫組織化學(xué)檢測(cè)。具體操作為:先將標(biāo)本置于烤箱內(nèi)烘烤40 min,保持溫度65 ℃,之后常規(guī)脫蠟、梯度酒精水化,并以3%過(guò)氧化氫孵育,滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶;將切片置于93.8 ℃水浴缸內(nèi)進(jìn)行抗原修復(fù),水浴20 min,保溫15 min,水浴缸內(nèi)溶液為檸檬酸三鈉緩沖液;室溫下血清封閉1 h,PBS緩沖液沖洗3次,每次5 min,甩去PBS溶液后,滴加一抗,室溫下溫育30 min,再轉(zhuǎn)移至4 ℃冰箱內(nèi)過(guò)夜;再次使用PBS緩沖液沖洗3次,每次5 min;將PBS液甩去后,滴加二抗,室溫下溫育30 min,再以PBS緩沖液沖洗3次,每次5 min;甩去PSB液,滴加DAB溶液顯色3～6 min,顯微鏡下觀察顏色反應(yīng);自來(lái)水沖洗充分,蘇木精復(fù)染,鹽酸-酒精分化后PBS沖洗返藍(lán);最后梯度酒精脫水處理,二甲苯透明,并以常規(guī)樹(shù)脂封片后觀察。結(jié)果判斷:陽(yáng)性表達(dá)以染色強(qiáng)度及陽(yáng)性細(xì)胞比例綜合判斷,其中染色強(qiáng)度:0分為無(wú)色,1分為淡黃色,2分為棕黃色,3分為棕褐色;陽(yáng)性細(xì)胞比:0分為<5%,1分為5%～25%,2分為26%～50%,3分為51%～75%,4分為>75%;兩者乘積為0～3分為陰性,3分以上為陽(yáng)性。所有均開(kāi)展長(zhǎng)達(dá)3年隨訪,隨訪內(nèi)容為腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況,隨訪方式為電話隨訪及門(mén)診復(fù)查,并收集所有患者年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、腫瘤直徑等資料。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)比較腫瘤組織與癌旁組織內(nèi)CXCR2表達(dá)差異。(2)比較不同CXCR2表達(dá)患者年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、腫瘤直徑等的差異。(3)隨訪3年,比較不同CXCR2表達(dá)患者遠(yuǎn)期腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 CXCR2表達(dá)情況

腫瘤組織TIM-3陽(yáng)性表達(dá)率為75.34%(55/73),高于癌旁組織的10.96%(8/73),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=61.678,P=0.000)。

2.2 CXCR2表達(dá)與臨床病理特征間關(guān)系

腫瘤分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化程度、腫瘤直徑≥3 cm患者TIM-3表達(dá)陽(yáng)性率高于腫瘤分期Ⅰ～Ⅱ期、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中高分化程度、腫瘤直徑<3 cm患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 CXCR2表達(dá)與臨床病理特征間關(guān)系(例,%)

2.3 CXCR2表達(dá)與預(yù)后間的關(guān)系

隨訪3年,73例患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率為35.62%(26/73)。CXCR2陽(yáng)性表達(dá)組復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率為43.64%(24/55),高于CXCR2陰性表達(dá)組的11.11%(2/18),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.257,P=0.012)。

3 討論

結(jié)腸癌病因復(fù)雜,臨床認(rèn)為與遺傳、不良飲食、消化道疾病等相關(guān),多種因素長(zhǎng)期相互作用,可促使結(jié)腸黏膜組織出現(xiàn)增生性變化,久之還會(huì)引起癌基因與抑癌基因表達(dá)失調(diào),導(dǎo)致結(jié)腸癌的發(fā)生[7-8]。臨床治療結(jié)腸癌多以手術(shù)為主,病灶切除后可避免腫瘤持續(xù)擴(kuò)散及轉(zhuǎn)移,以改善患者預(yù)后[9-10]。但惡性腫瘤病情較為復(fù)雜,即使經(jīng)規(guī)范化治療后仍會(huì)出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移現(xiàn)象,降低遠(yuǎn)期生存率,故如何改善結(jié)腸癌患者預(yù)后成為臨床研究熱點(diǎn)。

隨著分子生物學(xué)研究的不斷深入,臨床發(fā)現(xiàn)越來(lái)越多的分子標(biāo)志物參與結(jié)腸癌的發(fā)生及發(fā)展,明確該類(lèi)分子標(biāo)志物在腫瘤生長(zhǎng)、侵襲及轉(zhuǎn)移中的作用,則可為臨床早期診治及評(píng)估患者預(yù)后提供參考。趨化因子受體在多種生理及病理過(guò)程中均存在一定作用,臨床認(rèn)為趨化因子及趨化因子受體與腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、侵襲存在密切關(guān)系。而CXCR2為重要趨化因子受體,幾乎能夠與所有ELR+的CXC類(lèi)趨化因子結(jié)合,近年也被檢出在多種惡性腫瘤組織中呈高達(dá)[11-12]。本研究結(jié)果顯示,腫瘤組織TIM-3陽(yáng)性表達(dá)率高于癌旁組織,腫瘤分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化程度、腫瘤直徑≥3 cm患者TIM-3表達(dá)陽(yáng)性率高于腫瘤分期Ⅰ～Ⅱ期、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、中高分化程度、腫瘤直徑<3 cm患者,CXCR2陽(yáng)性表達(dá)組復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率高于CXCR2陰性表達(dá)組。提示CXCR2在結(jié)腸癌中呈高表達(dá),且腫瘤分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、低分化程度、腫瘤直徑≥3 cm患者陽(yáng)性表達(dá)率更高,CXCR2表達(dá)水平能夠一定程度上預(yù)測(cè)患者預(yù)后,為臨床治療提供指導(dǎo)。其原因?yàn)镃XCR2能夠參與腫瘤發(fā)生及發(fā)展的多個(gè)過(guò)程,可與白介素-8、中性粒細(xì)胞活化蛋白-2、腫瘤生長(zhǎng)相關(guān)因子-1等多種趨化因子相結(jié)合,以介導(dǎo)產(chǎn)生多種生物效應(yīng),在腫瘤進(jìn)展的炎癥細(xì)胞化學(xué)誘導(dǎo)過(guò)程中發(fā)揮重要作用,可通過(guò)介導(dǎo)炎癥反應(yīng)來(lái)加快腫瘤發(fā)生、發(fā)展[13-14]。同時(shí),CXCR2與腫瘤血管生成存在密切關(guān)系,當(dāng)CXCR2表達(dá)水平較高時(shí),能夠結(jié)合相應(yīng)配體激活多種信號(hào)通路,使得細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2的磷酸化而促使EGR-1表達(dá)升高,經(jīng)該信號(hào)通路可促使腫瘤新生血管形成,為腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移提供充足養(yǎng)分[15]。因此,CXCR2表達(dá)高的患者普遍腫瘤分期高、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度低,而該類(lèi)因素又可直接對(duì)患者預(yù)后造成影響,增加術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn),臨床可將CXCR2作為治療的新靶點(diǎn)以完善抗腫瘤方案,改善患者預(yù)后。

綜上所述,CXCR2在結(jié)腸癌中呈高表達(dá),腫瘤分期高、分化程度低、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者陽(yáng)性表達(dá)率更高,能夠較好地預(yù)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況,可作為早期診治、預(yù)后評(píng)估的重要參考指標(biāo)。