乙肝相關肝癌患者血清中癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平對TACE術后預后的預測價值分析*

周 陽,尹 星,付 民,常 歡,邢艷麗,李毅星,尹先哲

河南省南陽市第二人民醫院腫瘤科,河南南陽 473000

肝癌是目前臨床上較為常見的惡性腫瘤,我國肝癌在所有癌癥疾病中的病死率高居第2位,發病率則高居第4位,男性群體肝癌發病率及病死率均高于女性群體[1-3]。相關研究報道指出,肝癌疾病的發生發展與其是否感染乙型肝炎(簡稱乙肝)病毒或丙型肝炎病毒具有密切關系,大多數確診的患者均為乙肝相關肝癌,乙肝相關肝癌也受到國內外醫學專家的重視[4]。目前治療乙肝相關肝癌的方法多為肝動脈化療栓塞術(TACE),能夠在一定程度上延長患者的生存時間,尤其是對于中晚期肝癌患者,但仍有部分患者術后發生復發轉移,預后較差。目前臨床上對乙肝相關肝癌患者預后的評估多以影像學檢查聯合血清甲胎蛋白(AFP)檢測為主,但用AFP評估患者預后的靈敏度較低[5]。因此,積極探索較高特異度和靈敏度的血清腫瘤標志物對于改善乙肝相關性肝癌患者的預后評估具有重要意義。已有臨床研究結果表明,血清中癌基因[增殖相關基因(C-myc)、轉化基因(N-ras)、絲/蘇氨酸激酶1(PLK1)、成纖維細胞生長因子2(FGF2)]蛋白水平在肝癌患者中異常升高,提示血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平可能參與肝癌疾病的發生、發展[6]。基于此,本研究對127例乙肝相關肝癌患者的臨床資料進行分析,旨在探討乙肝相關肝癌患者TACE術前血清中癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平對其TACE術后預后的評估價值。現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院于2016年7月至2021年1月收治的乙肝相關肝癌患者127例作為研究對象。年齡37～78歲,平均(61.62±9.53)歲,男75例,女52例;TNM分期Ⅰ期28例,Ⅱ期22例,Ⅲ期43例,Ⅳ期34例。納入標準:(1)符合乙肝相關肝癌的診斷標準[7];(2)年齡≥18歲;(3)均為無法接受外科根治性手術而選擇TACE治療;(4)肝臟儲備功能:Child-Pugh分級為A級或B級。排除標準:(1)合并惡性腫瘤;(2)存在TACE禁忌證;(3)合并嚴重腹水;(4)妊娠或哺乳期;(5)存在嚴重凝血功能障礙;(6)臨床資料缺失;(7)隨訪途中退出本研究。研究對象均志愿參加且知情同意本研究,符合《赫爾辛基宣言》的倫理學準則,本研究通過本院醫學倫理委員會審批。

1.2方法

1.2.1TACE治療方法 使用賽丁格(Seldinger)法經皮穿刺,利用短導絲置入導管鞘,在X線引導下,將導管選擇性插入乙肝相關肝癌患者的腫瘤供血動脈后進行造影。以明確腫瘤周圍血管分布及腫瘤的位置、數目、大小,將化療藥物(奧沙利鉑60 mg/m2及氟尿嘧啶750 mg/m2)稀釋液及40%碘化油(15～25 mL)緩慢注入至腫瘤的主要供血動脈內,然后使用明膠海綿顆粒栓塞完成栓塞以盡可能阻斷患者的腫瘤血供。

1.2.2臨床資料收集 對127例乙肝相關肝癌患者TACE術前的臨床資料進行收集,包括年齡、性別、體重指數(BMI)、TNM分期、有無高血壓史、有無糖尿病史、有無吸煙史、有無飲酒史、腫瘤最大徑、腫瘤數目、有無門靜脈轉移、有無腹腔轉移、介入治療次數和Child-Pugh分級;以及血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平(采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法測定),儀器采用Epoch2型酶標儀(美國Biotek公司),試劑盒購自北京鼎國生物有限公司。

1.3隨訪記錄 采用門診、電話、微信等方法對乙肝相關肝癌患者進行隨訪,隨訪截止時間為2022年8月。以乙肝相關肝癌患者首次接受TACE治療后為研究起點,患者死亡或隨訪截止為研究終點。記錄乙肝相關肝癌患者在隨訪期間的總生存情況,且根據乙肝相關肝癌患者的生存結局將其分為死亡組及存活組。

2 結 果

2.1影響乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的單因素分析 隨訪期間,乙肝相關肝癌患者TACE術后死亡59例,病死率為46.46%。單因素分析結果顯示,TNM分期、糖尿病史、飲酒史、門靜脈轉移、腹腔轉移、Child-Pugh分級及血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平均是影響乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的相關危險因素(均P<0.05)。見表1。

表1 影響乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的單因素分析

2.2影響乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的多因素Cox回歸分析 乙肝相關肝癌患者TACE術后生存情況為因變量,將影響乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的相關危險因素(TNM分期、糖尿病史、飲酒史、門靜脈轉移、腹腔轉移、Child-Pugh分級及血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平)為自變量,對乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的多因素Cox回歸分析,變量具體賦值為;生存情況(存活=0,死亡=1)、TNM分期(Ⅰ～Ⅱ期=0,Ⅲ～Ⅳ期=1)、糖尿病史(無=0,有=1)、飲酒史(無=0,有=1)、門靜脈轉移(無=0,有=1)、腹腔轉移(無=0,有=1)、Child-Pugh分級(A級=0,B級=1)、血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平均為實測值。

多因素Cox回歸分析結果提示,TNM分期Ⅲ～Ⅳ期(HR=2.998,95%CI:1.239～7.257)、有門靜脈轉移(HR=3.737,95%CI:1.941～7.193)、有腹腔轉移(HR=3.482,95%CI:1.709～7.097)、Child-Pugh分級B級(HR=2.587,95%CI:1.045～6.406)、高血清癌基因C-myc蛋白水平(HR=1.224,95%CI:1.090～1.374)、高血清癌基因N-ras蛋白水平(HR=1.218,95%CI:1.097～1.353)、高血清癌基因PLK1蛋白水平(HR=1.237,95%CI:1.110～1.379)、高血清癌基因FGF2蛋白水平(HR=1.141,95%CI:1.060～1.228)均是影響乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的獨立危險因素(均P<0.05)。見表2。

表2 影響乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的多因素Cox回歸分析

2.3血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平對乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的預測價值 血清癌基因PLK1蛋白水平對乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的預測價值較高(AUC=0.906,95%CI:0.854～0.958),血清癌基因N-ras蛋白水平對乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的預測價值較低(AUC=0.777,95%CI:0.697～0.856)。見表3、圖1。

圖1 血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平對乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的ROC曲線

表3 不同血清癌基因蛋白對乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的預測價值

2.4血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平與乙肝相關肝癌患者TACE術后預后生存的關系 以ROC曲線結果中的截斷值為截點,將血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平分為高表達組(C-myc>17.260 pg/mL、N-ras>18.375 pg/mL、PLK1>13.970 pg/mL、FGF2>20.675 pg/mL)和低表達組(C-myc≤17.260 pg/mL、N-ras≤18.375 pg/mL、PLK1≤13.970 pg/mL、FGF2≤20.675 pg/mL)。血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平低表達組的總生存率均明顯高于血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平高表達組,差異有統計學意義(均P<0.001)。見圖2。

注:A為血清癌基因C-myc蛋白水平與乙肝相關肝癌患者TACE術后預后生存的關系;B為血清癌基因N-ras蛋白水平與乙肝相關肝癌患者TACE術后預后生存的關系;C為血清癌基因PLK1蛋白水平與乙肝相關肝癌患者TACE術后預后生存的關系;D為血清癌基因FGF2蛋白水平與乙肝相關肝癌患者TACE術后預后生存的關系。

3 討 論

肝癌是全球每年超過50萬人的死亡原因,我國每年新發確診的肝癌患者約占全世界的50%[8-9]。對于無法外科治療的肝癌患者,TACE已成為首選治療方案,將化療藥物混合在碘油中,使腫瘤細胞與化療藥物之間的靶向接觸時間得以延長以提升療效,且不良反應少[10-11]。AFP在肝癌患者預后評估中具有重要意義,但相關研究指出,我國約有40%的原發性肝癌患者AFP檢測結果為陰性,TACE術后預后評估有待提升[12]。近年研究表明,當肝癌患者癌基因及抑癌基因抑制或活化發生異常時,會導致組織細胞增殖不受控制演變為腫瘤[13]。因此,本研究探索血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平與乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的關系。

本研究單因素及多因素Cox回歸分析結果提示,高血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平均是影響乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的獨立危險因素(均P<0.05)。血清癌基因C-myc蛋白是肝癌細胞重要的癌基因之一,血清癌基因C-myc蛋白信號可顯著抑制肝癌細胞鐵死亡過程[14-15]。姬媛媛等[16]指出,血清癌基因N-ras蛋白主要是借助G蛋白偶聯受體信號分子傳導路徑來發揮自身的生物學效應,血清癌基因N-ras水平的高表達可為癌變的腫瘤細胞提供較為舒適的生長環境,其異常表達被視作是肝癌患者體內病灶發生惡性轉化的較早分子水平轉變,血清癌基因N-ras水平的高表達往往預示著腫瘤的惡性分化程度較強。近年也有研究報道指出,PLK1具有阻礙細胞凋亡方面、誘導DNA完整性的檢修及DNA合成的作用[17-18]。陳虹瑛等[19]指出,在正常肝臟中PLK1多為不表達或低表達,而在46%的肝癌中呈現高表達,提示高血清癌基因PLK1蛋白水平的乙肝相關肝癌患者的TACE術后預后較差,可能是對患者體內組織細胞的有絲分裂過程進行調控,使患者體內惡性腫瘤細胞得到進一步發展。JIMENEZ-PASCUAL等[20]指出,作為腫瘤生長促進因子一員中的血清癌基因FGF2可在多種惡性腫瘤組織中呈現高表達狀態。陳昶舟等[21]研究結果表明,通過對肝癌患者細胞系中的血清癌基因FGF2 mRNA轉錄過程進行抑制,可顯著改善肝癌患者的預后。這可能是血清癌基因FGF2參與患者體內組織細胞的有絲分裂和腫瘤細胞血管生成過程,從而影響細胞分化和基因表達,使機體組織穩態受到破壞,促進腫瘤細胞的生長、侵襲[22]。本研究的多因素Cox回歸分析結果也表示,TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、有門靜脈轉移、有腹腔轉移及Child-Pugh分級B級均獨立影響乙肝相關肝癌患者TACE術后預后情況(均P<0.05),與既往研究結果類似[23-24]。

綜上所述,高血清癌基因C-myc、N-ras、PLK1、FGF2蛋白水平均是影響乙肝相關肝癌患者TACE術后預后的獨立危險因素,對乙肝相關肝癌患者預后生存分析具有一定的預測價值。