血清CXCL16、ANCA水平在變應性鼻炎中的變化及其臨床意義*

張玉杰,李佳慧,司宇光

北京市懷柔區中醫醫院:1.耳鼻喉科;2普外科,北京 101400

變應性鼻炎是一種慢性炎癥性免疫球蛋白E(IgE)介導的鼻黏膜疾病,由吸入季節性或常年過敏原引發,其典型癥狀包括打噴嚏、鼻漏、鼻癢、鼻塞和過敏性結膜炎癥狀等,且患病率不斷增加[1-2]。雖然變應性鼻炎本身并不危及患者生命,但會影響患者睡眠,造成其學習困難、工作表現和社會功能受損[3]。迄今為止,尚無用于監測變應性鼻炎患者的高效生物標志物,需要進行進一步的研究來識別和確認新生物標志物,以對變應性鼻炎患者進行更加準確的臨床診斷。CXC趨化因子配體16(CXCL16)屬于趨化因子α亞科,其N末端具有CXC基序,其在天然免疫屏障和自身免疫性疾病的發生和發展中都起著重要作用[4-5]。抗中性粒細胞胞質抗體(ANCA)是一組針對人中性粒細胞和單核細胞內細胞質抗原的自身抗體,主要在血管炎和炎癥性疾病患者中檢測[6]。ANCA與ANCA相關性血管炎、腎小球腎炎的發生發展密切相關,但目前鮮見其在變應性鼻炎相關疾病中的報道。本研究通過測定變應性鼻炎患者血清CXCL16、ANCA水平,分析二者在變應性鼻炎中的臨床診斷價值,為變應性鼻炎的診療提供一定依據。現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2022年1-12月在本院就診治療的變應性鼻炎患者84例(變應性鼻炎組)作為研究對象,其中男46例、女38例,年齡21～63歲,平均(43.15±12.07)歲。另選取同期在本院體檢的健康者80例作為對照組,其中男40例、女40例,年齡20～64歲,平均(42.56±11.85)歲。納入標準:(1)變應性鼻炎組均經臨床診斷確診為變應性鼻炎患者[7];(2)所有研究對象均無認知障礙和交流障礙。排除標準:(1)惡性腫瘤、嚴重心血管及其他內臟疾病;(2)患有特異性皮炎及其他過敏性疾病;(3)嚴重傳染性疾病或感染性疾病;(4)研究前30 d內具有鎮靜劑、抗組胺藥、免疫抑制劑、糖皮質激素等相關藥物治療史。本研究經醫院倫理委員會審查批準,所有研究對象均知情且同意。

1.2儀器與試劑 EnVision多功能酶標儀(美國PerkinElmer公司)、BS-600M全自動生化分析儀(深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司);KUBOTAKA-2200離心機(日本久保田公司)。人CXCL16酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒(上海酶研生物科技有限公司)、人ANCA ELISA試劑盒(江西艾博因生物科技有限公司)。

1.3方法

1.3.1臨床資料收集 收集所有研究對象的性別、年齡,以及采用全自動生化分析儀檢測炎癥因子[白細胞介素(IL)-4、IL-9、IL-13]和IgE水平的臨床資料。

1.3.2ELISA測定血清CXCL16、ANCA水平 采集變應性鼻炎患者就診當日和對照組體檢當日清晨空腹靜脈血3 mL,4 ℃冰箱保存,離心機5 000 r/min離心8 min,取上清液,-70 ℃冰箱低溫保存備用。根據人CXCL16 ELISA試劑盒、人ANCA ELISA試劑盒說明書配制CXCL16、ANCA標準品溶液,解凍血清樣本,多功能酶標儀測定CXCL16、ANCA標準品溶液及血清樣本在450 nm處的吸光度,繪制CXCL16、ANCA標準品回歸曲線。根據CXCL16、ANCA標準品回歸曲線方程,計算血清CXCL16、ANCA水平。

1.3.3變應性鼻炎病情程度評估 根據文獻[7]將變應性鼻炎患者分為輕度組44例和中重度組40例。輕度變應性鼻炎:臨床癥狀較輕,未對患者工作、學習、睡眠及生活造成顯著影響;中重度變應性鼻炎:臨床癥狀顯著或嚴重,嚴重影響患者日常工作和生活。

2 結 果

2.1變應性鼻炎組與對照組臨床資料比較 與對照組比較,變應性鼻炎組IL-4、IL-9、IL-13和IgE水平均顯著上升,差異有統計學意義(P<0.05);兩組性別和年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 變應性鼻炎組與對照組臨床資料比較

2.2變應性鼻炎組與對照組血清CXCL16、ANCA水平比較 與對照組比較,變應性鼻炎組血清CXCL16和ANCA水平均顯著上升,差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 變應性鼻炎組與對照組血清CXCL16、ANCA水平比較

2.3血清CXCL16、ANCA水平在診斷變應性鼻炎中的價值 以血清CXCL16、ANCA水平為檢驗變量,以研究對象是否為變應性鼻炎患者為狀態變量(是=1,否=0)繪制ROC曲線。ROC曲線分析結果顯示:血清CXCL16水平診斷研究對象為變應性鼻炎患者的曲線下面積(AUC)為0.897(95%CI:0.848～0.946),截斷值為3.19 ng/L,特異度為90.00%,靈敏度為76.19%;血清ANCA水平診斷研究對象為變應性鼻炎患者的AUC為0.844(95%CI:0.785～0.903),截斷值為127.63 ng/mL,特異度為83.75%,靈敏度為72.62%。血清CXCL16、ANCA聯合診斷研究對象是否為變應性鼻炎患者的AUC為0.959(95%CI:0.931～0.986),均優于各自單獨診斷(Z=2.164、3.474,P<0.05),特異度為93.75%,靈敏度為89.29%。見圖1。

圖1 血清CXCL16、ANCA水平診斷變應性鼻炎患者的ROC曲線

2.4不同嚴重程度變應性鼻炎患者血清CXCL16、ANCA水平比較 變應性鼻炎患者血清CXCL16、ANCA水平均隨患者病情嚴重程度加重而升高(P<0.05)。見表3。

表3 不同嚴重程度變應性鼻炎患者血清CXCL16、ANCA水平比較

2.5變應性鼻炎患者血清CXCL16、ANCA水平與炎癥因子及IgE相關性分析 Pearson相關分析結果顯示,變應性鼻炎患者血清CXCL16水平與IL-4、IL-9、IL-13及IgE均呈正相關(r=0.507、0.496、0.542、0.528,P<0.05);變應性鼻炎患者血清ANCA水平與IL-4、IL-9、IL-13及IgE也均呈正相關(r=0.511、0.504、0.535、0.519,P<0.05)。

2.6血清CXCL16、ANCA水平在診斷中重度變應性鼻炎中的價值 以血清CXCL16、ANCA水平為檢驗變量,以變應性鼻炎患者是否為中重度變應性鼻炎患者為狀態變量(是=1,否=0)繪制ROC曲線。ROC曲線分析結果顯示:血清CXCL16水平診斷變應性鼻炎患者為中重度變應性鼻炎患者的AUC為0.862(95%CI:0.786～0.937),截斷值為3.67 ng/L,特異度為88.64%,靈敏度為70.00%;血清ANCA水平診斷變應性鼻炎患者為中重度變應性鼻炎患者的AUC為0.832(95%CI:0.746～0.918),截斷值為163.33 ng/mL,特異度為62.50%,靈敏度為95.45%。血清CXCL16、ANCA聯合診斷變應性鼻炎患者是否為中重度變應性鼻炎患者的AUC為0.949(95%CI:0.905～0.992),均優于各自單獨診斷(Z=1.981、2.378,P<0.05),特異度為90.91%,靈敏度為90.00%。見圖2。

圖2 血清CXCL16、ANCA診斷中重度變應性鼻炎的ROC曲線

3 討 論

變應性鼻炎是由致敏個體暴露于常見吸入性變應原時由Ⅰ型變應反應誘發的疾病,由于炎癥因子促進Ⅰ型變應反應的發生發展,因此炎癥因子也與變應性鼻炎的發生密切相關[8]。變應性鼻炎患者鼻上皮屏障受損和變應原暴露可能在這種疾病中起主要作用,變應性鼻炎患者上皮屏障受損,給變應原侵入造成了有利條件,導致變應性鼻炎的易發性[9-10]。NUR HUSNA 等[11]和鄧小剛等[12]研究顯示,變應性鼻炎患者血清IL-4、IL-9、IL-13、IL-17及IgE水平均顯著升高,且血清IgE和IL-4、IL-17均呈正相關。有研究顯示,IL-4/IL-13軸在變應性鼻炎和哮喘的發病機制中發揮重要作用,通過抗IL-4Rα單克隆抗體治療可成功恢復變應性鼻炎患者上皮屏障的完整性和功能,且IL-4和IL-13可通過激活IL-4Rα/STAT6途徑誘導變應反應[13-15]。本研究結果發現,與對照組比較,變應性鼻炎組IL-4、IL-9、IL-13和IgE水平均顯著上升,差異有統計學意義(P<0.05),與以上研究結果相似[13-15]。該作用途徑可能是在外界變應原作用下,人體IgE水平上調,高水平IgE誘導Th細胞向Th2方向不斷分化,Th2細胞通過釋放IL-4、IL-9等相關炎癥因子,誘導變應性鼻炎發生[11]。

CXCL16是一種由炎癥細胞產生的趨化因子,包括長度分別為1.8 kb和2.5 kb的兩個轉錄本,其基因位于染色體17p13,與其他趨化因子的同源性較差[16]。CXCL16是一種化學引誘劑,可介導表達CXCR6的免疫細胞的募集進而誘發炎癥[5]。研究顯示,CXCL16在類風濕性關節炎、炎癥性腸病、痛風病等炎癥過程以及多種腫瘤疾病中起重要作用,其水平均呈升高趨勢[17-18]。本研究結果發現,與對照組比較,變應性鼻炎組血清CXCL16水平均顯著上升,差異有統計學意義(P<0.05),血清CXCL16水平診斷變應性鼻炎的AUC為0.897,且CXCL16水平隨病情的加重而升高,與同家族的CXCR4在變應性鼻炎中的研究結果相似[10],提示血清CXCL16水平在診斷變應性鼻炎疾病中具有一定價值。ZHENG等[10]研究顯示,CXCR4通過miR-125b/FoxP3軸調節變應性鼻炎中的上皮屏障功能影響進而變應性鼻炎的進展。本研究結果顯示,變應性鼻炎患者血清CXCL16水平與IL-4、IL-9、IL-13及IgE均呈正相關(r=0.507、0.496、0.542、0.528,P<0.05),提示血清CXCL16水平與變應性鼻炎的炎癥反應密切相關。進一步研究發現,血清CXCL16診斷中重度變應性鼻炎患者的AUC為0.862,特異度為88.64%,提示CXCL16對中重度變應性鼻炎具有一定的診斷價值。

ANCA是以單核細胞和中性粒細胞胞質為靶抗原的內源性抗體,其主要靶抗原是蛋白酶3和髓過氧化物酶,在多種疾病的發生發展中起到關鍵作用[19-20]。有研究顯示,ANCA在血管炎合并慢性鼻竇炎病例中具有較高的陽性率,檢測ANCA水平能夠對該疾病進行早期確診[21]。在閉塞性細支氣管炎患者中發現,ANCA隨其病情嚴重程度的減輕而下降,對其病情評估具有一定臨床意義[22]。本研究結果發現,與對照組比較,變應性鼻炎組血清ANCA水平均顯著上升,差異有統計學意義(P<0.05),血清ANCA水平診斷變應性鼻炎的AUC為0.844,且隨病情的加重而升高,與陳曉雯等[22]在閉塞性細支氣管炎中的研究結果相似,提示血清ANCA水平對變應性鼻炎的診斷具有一定價值。本研究結果顯示,血清CXCL16、ANCA聯合診斷變應性鼻炎的AUC為0.959,均優于各自單獨診斷,推測血清CXCL16、ANCA聯合在診斷變應性鼻炎疾病的發生中具有重要價值。本研究結果顯示,變應性鼻炎患者血清ANCA水平與IL-4、IL-9、IL-13及IgE也均呈正相關(r=0.511、0.504、0.535、0.519,P<0.05),血清ANCA診斷中重度變應性鼻炎患者的AUC為0.832,靈敏度為95.45%。提示ANCA在診斷中重度變應性鼻炎中具有一定價值。進一步研究發現,血清CXCL16、ANCA聯合診斷中重度變應性鼻炎患者的AUC為0.949,均優于各自單獨預測,特異度為90.91%,靈敏度為90.00%,二者聯合有望成為臨床診斷變應性鼻炎病情的有效指標。

綜上所述,變應性鼻炎患者血清CXCL16、ANCA水平均顯著上升,且隨患者病情加重而升高,二者在臨床診斷變應性鼻炎病情中具有一定潛在價值。本研究樣本數量有限,需要擴大樣本,進一步地驗證,并深入探究二者在變應性鼻炎中的具體作用機制。