牛肝片吸蟲病治療的藥效試驗

肝片吸收病是牦牛養(yǎng)殖期間發(fā)生流行率相對較高的一類體內(nèi)寄生蟲疾病，是由肝片吸蟲科、肝片吸蟲屬的肝片吸蟲寄生在肝臟和膽管組織當中所引發(fā)的一種慢性消耗性疾病。肝片吸蟲病發(fā)病初期階段，由于癥狀不是很明顯，再加上很多牧民群眾對該類寄生蟲病的認知不到位，不能夠及時發(fā)現(xiàn)，及時處理患病牛，臨床用藥過程中也會存在諸多不當之處。由于長時間使用同一種驅蟲類藥物或者根本不對牛進行有效的驅蟲，當受到寄生蟲感染之后，不能夠及時控制病情，從而造成該類疾病在養(yǎng)殖場中周期性的傳播蔓延。為了進一步篩選出用于牛肝片吸蟲病的治療藥物，提升藥物治療成效，于2020年的3月從青海省湟中縣8個發(fā)病的牦牛養(yǎng)殖場當中選擇經(jīng)過確診患有肝片吸蟲病的牦牛80頭，按照隨機原則將其劃分成4個組別，分別選擇使用阿苯達唑、三氯苯達唑、硝氯酚驅蟲藥物進行驅蟲治療，進一步分析三種驅蟲類藥物用藥之后的治愈效果，篩選出最佳的治療藥物，提高肝片吸蟲病的防治成效。

肝片吸蟲病是一種慢性接觸性傳染性疾病，在牧區(qū)呈現(xiàn)出周期性流行的態(tài)勢，發(fā)病周期較長，發(fā)病較為緩慢，主要以營養(yǎng)消耗為主，發(fā)病階段患病牛主要表現(xiàn)為嚴重的生長障礙，身體逐漸消瘦，生長發(fā)育不良，甚至會衰竭死亡。從當前肝片吸蟲病的發(fā)生流行情況來看，感染和發(fā)病都存在一定的季節(jié)性態(tài)勢，夏秋季節(jié)牦牛在地勢地洼的地帶頻繁的放牧與淡水螺頻繁的接觸，就會吃入囊蚴。寄生蟲在感染初期階段由于數(shù)量不多，再加上致病性相對較差，通常不會表現(xiàn)出明顯的臨床特征，隨著寄生蟲的進一步生長并轉移到肝臟和膽管組織當中產(chǎn)生危害，牦牛才會表現(xiàn)出特征性的臨床癥狀。因此肝片吸蟲病一般在夏秋季節(jié)呈現(xiàn)出急性感染，冬春季節(jié)才會表現(xiàn)出典型的臨床癥狀。另外寄生蟲在繁殖生長過程中會產(chǎn)生大量的毒素，導致牦牛出現(xiàn)不同程度的中毒，并且很容易激發(fā)感染其他傳染性疾病，如果不能夠采取針對性的驅蟲措施，很容易造成牦牛死亡，給養(yǎng)殖戶帶來較為嚴重的經(jīng)濟負擔。現(xiàn)階段牦牛肝片吸蟲病主要以服用體內(nèi)驅蟲藥物為主，但很多養(yǎng)殖戶為了達到驅蟲效果或者驅蟲，存在盲目性，普遍存在不規(guī)范用藥，甚至不使用藥物進行驅蟲，一方面造成了病原產(chǎn)生了耐藥性，延誤了最佳的治療時機，另一方面導致患病牛的癥狀逐漸加重，逐漸衰竭死亡。為了篩選出高效的治療藥物，為治療肝片吸蟲病奠定了基礎，本次研究選擇了三種驅蟲藥物開展治療試驗，現(xiàn)將具體研究內(nèi)容介紹如下：

一、試驗材料與方法

1、試驗藥物

本次試驗過程中共涉及到三種驅蟲類藥物，分別是阿苯達唑、三氯苯達唑和硝氯酚，上述三種驅蟲類藥物都來自于當?shù)孬F醫(yī)站提供，藥物在有效期內(nèi)。按照藥物的使用說明書，上述三種藥物的使用劑量分別為12mg/kg體重，12mg/kg體重和3.2mg/kg體重，一次口服量，間隔7天之后再用藥一次，連續(xù)用藥兩個療程。

2、試驗動物選擇

本次驗收于2020年3月從青海省湟中區(qū)的8個牦牛養(yǎng)殖場當中篩選出經(jīng)過確診患有肝片吸蟲病的牦牛共80頭，按照隨機原則將其劃分成4個組，分別命名為處理一組，處理二組，處理三組和對照組，處理一組到處理三組分別選擇使用阿苯達唑、三氯苯達唑和硝氯酚進行驅蟲處理，對照組牦牛不選擇使用藥物進行全程處理。本次試驗過程中，各個組別牦牛的體重，年齡以及性別之間的差異有可比性但不具備統(tǒng)計學差異。在臨床治療試驗期間試驗，各個組別的牦牛除了藥物的使用劑量不同，使用種類不同之外，其他養(yǎng)殖管理保持一致，將牛安置在專用的圈舍當中，保持環(huán)境干燥整潔，向牛提供營養(yǎng)價值全面的飼料和飲用水。將定期對圈舍進行清掃，及時清除糞便進行堆積發(fā)酵處理切斷病原的傳播渠道，每天觀察記錄牛群的精神狀態(tài)，采食情況。

3、疾病診斷

（1）流程特點

牦牛肝片吸蟲病又被稱為肝蛭病，是由肝片吸蟲寄生在牦牛的肝臟膽管組織當中所引發(fā)的一種急慢性的寄生蟲疾病，臨床上患病牦牛主要以急慢性的肝炎、膽管炎、膽囊炎為主，同時還會伴隨全身性的中毒和營養(yǎng)障礙，會對牦牛的健康生長構成嚴重的威脅。肝片吸蟲的蟲體呈現(xiàn)棕紅色，長度在20～75mm，寬度在10～13mm，在膽管當中會產(chǎn)生大量的寄生蟲蟲卵，會隨著糞便排出體外，溫暖潮濕的條件下會孵化成毛蚴，毛蚴在水體當中遇到中間宿主椎實螺之后就會在椎實螺體內(nèi)發(fā)育成尾蚴，毛蚴到尾蚴的發(fā)育時間長達50～80天，一個毛蚴最后可以發(fā)育成100個以上的尾蚴，尾蚴脫離螺體之后，很快就會形成囊蚴，囊蚴附著在牧草或者游動在水中，牛在放牧過程中接觸了有囊蚴的牧草或者飲用了含有囊蚴的污水之后就會受到感染囊蚴最終會進入到膽管組織當中發(fā)育成成蟲，一般需要2～4年才能夠完成整個發(fā)育過程，成蟲的壽命在3～5年。從當前牦牛肝片吸蟲病的發(fā)生流行現(xiàn)狀來看，該種疾病會存在出典型的季節(jié)性流行的態(tài)勢，夏秋季節(jié)牦牛會進入到感染的高峰期，但是不會表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀，進入冬春季節(jié)之后，由于青綠飼料供給不足，飼料營養(yǎng)價值相對較差，牦牛身體抵抗能力下降，再加上大量寄生蟲的繁殖生長，才會表現(xiàn)出特征性的臨床癥狀。通過對發(fā)病養(yǎng)殖場進行進一步的調查，可以發(fā)現(xiàn)牦牛的總體感染率能夠達到50%以上，由于農(nóng)牧民群眾堅持放牧養(yǎng)殖方式，夏秋季節(jié)牦牛在地勢低洼的地帶采食牧草或者飲水之后，極容易受到寄生蟲的感染，進入冬春季節(jié)之后會出現(xiàn)典型的臨床癥狀，導致養(yǎng)殖場周年出現(xiàn)肝片吸蟲病，很難徹底凈化處理。

（2）臨床表現(xiàn)和病理特征

肝片吸蟲在膽管生長發(fā)育過程中，會不斷的刺激膽管壁，導致管壁出現(xiàn)嚴重病變，使得管腔逐漸狹窄，膽汁分泌量顯著降低，影響到牦牛的正常消化，寄生蟲成蟲在膽管內(nèi)寄生時會堵塞膽管，導致膽汁淤積，引發(fā)急性癥狀。患病牛表現(xiàn)為突然出現(xiàn)臨床癥狀，體溫顯著升高，從鼻腔當中流出大量的粘液，呼吸頻率逐漸加快，全身出現(xiàn)水腫現(xiàn)象，不能正常采食和反芻，典型的特征是發(fā)病快，死亡快，死亡率有時能夠達到40%。年齡較大或者寄生蟲數(shù)量相對較少時，牦牛大多表現(xiàn)為慢性發(fā)病經(jīng)過，身體逐漸消瘦貧，出現(xiàn)嚴重的貧血現(xiàn)象，牛毛干燥，失去光澤，精神萎靡不振，走路無力，衰竭死亡。通過解剖處理能夠發(fā)現(xiàn)膽管當中會蓄積，有很多呈現(xiàn)扁平柳葉狀的蟲體，在顯微鏡下觀察蟲體，能夠發(fā)現(xiàn)前端明顯寬于后端呈現(xiàn)圓錐狀。肝臟出現(xiàn)炎癥病變顯著腫大，內(nèi)部會存在出血，膽管顯著擴張，膽管粗糙不堪，肝被膜表面存在絨毛狀的纖維素性滲出物沉積。透過被膜能夠看到1～2mm的暗紅色的蟲道，有時會突出于肝臟組織表面。有的患病牛發(fā)病時間相對較長，死亡之后肝臟發(fā)炎，顏色呈現(xiàn)深紅色或者深褐色。

（3）疾病診斷

牦牛肝片行蟲病診斷相對較為簡單，通過觀察寄生蟲蟲體能夠對病情做出初步診斷。為了保證診斷的準確性，采集患病牛排出的新鮮糞便5g放到100mL的燒杯當中，加入30mL的清水，用玻璃棒充分混合均勻之后形成糊狀，然后再加入30mL的清水從過濾篩過濾到另一個燒杯當中，然后加入配置好的明礬水溶液30mL，靜置15分鐘，舍去上層清液，再加入明礬水30mL，靜置10分鐘，如此反復多次，直到上層清液變得清澈為止。最后將上層的液體去除，剩下10mL的沉淀物，用吸管吸取0.1mL分別滴加到兩張載玻片上，蓋上蓋波片，在低倍顯微鏡下觀察可以發(fā)現(xiàn)寄生蟲蟲卵個體較大，外觀呈現(xiàn)橢圓形，金黃色，卵內(nèi)部充滿了卵細胞和一個胚細胞。結合分離到的寄生蟲成蟲和寄生蟲蟲卵的形態(tài)與寄生蟲圖譜做出有效的對比，可以判定為肝片吸蟲感染引發(fā)的肝片吸蟲病。

4、療效評價

在驅蟲之前采集患病牛的新鮮糞便，采用試驗室診斷方法，統(tǒng)計各個組別患病牛試驗前的蟲卵數(shù)量，驅蟲14天之后，再次采集患病牛的新鮮糞便，進一步統(tǒng)計驅蟲之后的糞便中寄生蟲蟲卵的數(shù)量，計算蟲卵的減少率。蟲卵減少率=（驅蟲前的從軟-驅蟲后的蟲卵）/驅蟲前的蟲卵×100%。通過觀察牛群的日常，采食精神狀態(tài)，腹瀉情況來判定臨床治療效果。用藥之后，患病牛仍然出現(xiàn)嚴重的腹瀉，身體消瘦貧血下頜水腫，糞便當中能夠檢查到大量的寄生蟲蟲卵表示無效。患病牛到呼吸，體溫和心率恢復正常，腹瀉停止，食欲未恢復到正常水平表示有效。患病牛的呼吸，體溫和心率正常，腹瀉停止，食欲精神狀態(tài)，逐漸恢復表示顯效。治愈率=有效率+顯效率。

5、數(shù)據(jù)統(tǒng)計

試驗組和對照組的數(shù)據(jù)選擇使用平均差±標準差的形式進行表示，使用Excel2003收集各種數(shù)據(jù)信息制作成表格，然后使用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行方差分析，P＞0.05表示組件對比差異性不顯著，P＜0.05表示組間對比差異性顯著，P＜0.01表示組間對比差異極其顯著。

二、結果

1、治療前后糞便當中寄生蟲蟲卵數(shù)量

治療前后處理組對照組患病牛糞便當中寄生蟲蟲卵的數(shù)量如表1所示。根據(jù)表1數(shù)據(jù)可以看出4個主別的患病牛在治療之前糞便當中的蟲卵差異性不顯著，且三種藥物對牦牛肝片心重并都具有治療作用，處理一組到處理三組蟲卵減少率分別達到了，其中已處理二組的效果最好，其次是處理一組，最差的是處理三組，試驗一組到試驗三組與對照組相比差異性達到了極其顯著標準（P＜0.01），三個組別之間對比差異性顯著（P＜0.05）。詳細情況如表一所示。

2、驅蟲效果

處理組別和對照組別的驅蟲效果如下：處理一組：有效5頭，顯效13頭，無效2頭，治愈率90%；處理二組：有效9頭，顯效10頭，無效1頭，治愈率95%；處理三組：有效13頭，顯效3頭，無效5頭，治愈率75%；對照組：有效20頭，顯效20頭，無效0頭，治愈率0%，根據(jù)以上數(shù)據(jù)可以看出，阿苯達唑、三氯苯達唑和硝氯酚三種驅蟲類藥物都能夠有效的驅殺患病牛體內(nèi)的肝片吸蟲，在不同組別的驅蟲效果會存在一定的差異性，三氯苯達唑的驅蟲效果要顯著高于阿苯達唑處理組別和硝氯芬處理組別，說明在進行牦牛肝片吸蟲病處理過程中，三氯苯達唑的驅蟲效果最好，其次是阿苯達唑，最差的是硝氯酚。在今后驅蟲處理過程中可以推廣應用三氯苯達唑和阿苯達唑交替用藥，提升驅蟲成效，避免病原產(chǎn)生耐藥性。

三、討論

肝片吸蟲病是牦牛養(yǎng)殖領域長發(fā)病和高發(fā)病發(fā)病具有一定的隱蔽性，并且發(fā)病周期較長，一旦出現(xiàn)將很難清理，經(jīng)常會周期性的發(fā)生流行，對牦牛的健康生產(chǎn)構成嚴重的威脅。通過近幾年對該類疾病的發(fā)生流行情況進行進一步的調查分析，能夠發(fā)現(xiàn)一旦進入雨季或者溫暖天氣到來之后，環(huán)境當中的淡水螺就會大量繁殖，為肝片吸蟲病的傳播感染提供了可能。傳統(tǒng)放牧養(yǎng)殖以及放牧場地選擇不當是導致肝片吸蟲病發(fā)生流行的重要原因，再加上很多牧民群眾對驅蟲處理的重視程度不高，驅蟲不科學，或者不對牛群進行驅蟲處理，一旦有一只牦牛受到病原入侵，就會通過糞便向外排出大量的病原，使得肝片吸蟲的傳播范圍逐漸擴大，嚴重影響到牦牛的健康生長，防控該種疾病不能松懈。

當前基層地區(qū)的牧民群眾在進行肝片吸蟲病驅蟲處理過程中，主要以硝氯酚為主，但在驅蟲處理過程中，很多群眾不注重做好藥物的更新?lián)Q代工作，長時間使用同種藥物，同時還存在大劑量使用藥物的現(xiàn)象，使得病原的耐藥性逐漸增強，藥物的防控效果逐漸變差。通過本次研究可以看出阿苯達唑、三氯苯達唑和硝氯芬對驅殺肝片吸蟲都具有一定的效果，其中以處理二組和處理一組的驅殺效果最好，尤其是處理二組的治愈率最高。硝氯酚雖然具有一定的治療成效，但有研究結果表明該種藥物的長期使用很容易造成病原耐藥性，并且該類藥物還存在一定的毒性，基層地區(qū)的很多養(yǎng)殖戶一味的追求驅蟲效果，往往會大劑量的應用，給患病牛造蟲嚴重的威脅，經(jīng)常會引發(fā)中毒死亡。而阿苯達唑過量應用會導致動物出現(xiàn)遲發(fā)性的神經(jīng)癥狀和消化道反應，導致患病牛精神狀態(tài)逐漸變差，四肢癱瘓，甚至會口吐白沫，用藥不達標之后還會引發(fā)腹瀉等異常反應。三氯苯達唑對牛羊等大型的牲畜，動物的毒副作用相對較小，同時在動物體內(nèi)的代謝速度相對較快，動物體內(nèi)殘留量較少，相較于阿苯達唑和硝氯酚，更加適合于肝片吸蟲病的驅蟲治療。所以結合當前的藥物治療成效以及驅殺效果，在今后肝片吸蟲病驅蟲處理過程中，推薦選擇使用三氯苯達唑并交替應用阿苯達唑藥物，降低硝氯酚的使用頻率。另外對于基層地區(qū)的牧民群眾來講，為了降低肝片吸蟲病所造成的經(jīng)濟損失，實現(xiàn)對該類疾病的有效凈化處理，還需要提前采取措施進行有效的預防，飼養(yǎng)管理過程中結合肝片吸蟲病的發(fā)生流行特點，每年至少進行三次以上的體內(nèi)驅蟲，并且要指導農(nóng)牧民群眾科學更換放牧地點，避免長時間在地勢低洼地帶放牧，放牧前應該做好淡水螺的消滅處理工作，減少環(huán)境當中的中間傳播途徑，從而保障牦牛養(yǎng)殖安全。

綜上所述，肝片吸蟲病是牧區(qū)牦牛養(yǎng)殖領域常發(fā)病和高發(fā)病，呈現(xiàn)出季節(jié)性感染和季節(jié)性發(fā)病流行的態(tài)勢，年齡較小的犢牛往往會表現(xiàn)出急性發(fā)病結果造成的死亡率相對較高，會給農(nóng)牧民群眾造成較為嚴重的經(jīng)濟損失。為了更好的降低肝片吸蟲病造成的嚴重危害，一方面要掌握該種疾病的傳播流行現(xiàn)狀，另一方面要科學的篩選出敏感藥物，進行針對性的驅蟲處理，并加強對養(yǎng)殖管理人員的專業(yè)知識培訓，指導農(nóng)牧民群眾科學用藥，合理驅蟲，將該類疾病造成的危害盡量降低到最小程度，確保養(yǎng)殖安全

（作者單位：811600 青海省西寧市湟中區(qū)多巴鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站）