血常規指標檢測對兒童病毒感染診斷的意義

[內容提要]本文旨在探討單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率檢測在兒童EBV病毒感染的應用價值。本文回顧性分析了本院2021年1月至2022年5月通過PCR熒光法檢測全血樣本中DNA呈陽性確診為EB病毒感染且年齡處于2～6歲的兒童共計160例。設置對照組為2～6歲未感染EB病毒的兒童77例。利用XN-10[B3]型血細胞分析儀計算單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率的數值進行統計學分析，使用ROC曲線分析比較單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率對EB病毒感染的臨床意義。單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率在EBV-DNA陽性組和對照組間差異均有統計學意義（P<0.05），陽性組單核細胞與淋巴細胞比率中位數水平明顯高于對照組水平，但陽性組中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率中位數水平低于對照組，兩組間平均血小板體積與血小板計數比率水平差異不明顯。單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率曲線下面積（AUC）分別為0.670、0.634、0.595、0.650，敏感度最大為中性粒細胞與淋巴細胞比率（68.9%），特異度最大為單核細胞比率與淋巴細胞（70.10%）。所以，本研究認為單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率四種炎癥指標，在考慮其ROC曲線面積和差異性的情況下，單核細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率在檢測兒童EB病毒感染中具有一定的臨床意義，單核細胞與淋巴細胞比率的臨床意義較之更大。

引言

EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）是引起兒童感染性疾病常見的病原體，可侵犯人體多個系統，臨床表現多樣，既可以引發傳染性單核細胞增多癥，又可導致慢性活動性EBV感染。目前，全球約有90%的人基本感染過該病毒。EBV的初次感染大多發生在兒童時期，感染后侵犯咽部上皮細胞及B淋巴細胞，隨之潛伏在機體內不會被免疫系統徹底清除，大多數患兒并無臨床癥狀，但當機體免疫功能低下時，EBV將再度活躍形成頻復感染。EBV首次感染高峰年齡存在地域差異，在發展中國家是以2～6歲年齡段為主，歐美等國家感染年齡則延遲，以青少年時期為主。淋巴細胞與單核細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率是臨床中較為重要的炎癥指標，本研究旨在探討單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率檢測在兒童EB病毒感染中的臨床意義。

一資料與方法

（一）一般資料

本研究采用回顧性分析復旦大學附屬兒科醫院2021年1月至2022年5月通過PCR熒光法檢測全血樣本中EB病毒DNA呈陽性確診為EB病毒感染且年齡處于2～6歲的兒童共計160例。設置對照組為2～6歲未感染EB病毒的兒童77例。

納入標準：所有病例組均與EBV診斷相符且EB病毒DNA呈陽性；年齡2～6歲；入院前未接受治療；臨床病例資料完整。

排除標準：重復住院的病例；細菌感染的病例；血液疾病的病例；肝臟疾病的病例；生長緩慢且發育異常的病例。

兩個組之間的性別差異無統計學意義（P>0.05）。

（二）儀器與試劑1儀器

XN-10[B3]型血細胞分析儀（日本希森美康公司）、臺式高速冷凍離心機（Eppendorf，5424R型）、干式恒溫器（杭州奧盛儀器有限公司，MK200型）、ABI Prism 7500擴增儀。

2試劑

EB病毒核酸擴增測定試劑盒（PCR熒光法）、血細胞分析儀配套希森美康公司試劑和染色液，中山大學達安基因股份有限公司。

（三）方法

按WS/T 661-2020《靜脈血液標本采集指南》相關內容采集靜脈全血，置于EDTA-K2抗凝管中，經上機檢測血細胞各參數，計算出單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率相應數值。

（四）統計學分析

采用SPSS20.0軟件進行分析。呈偏態分布計量資料以中位數（M）[四分位數（P25～P75）]表示，EBV病毒陽性組和對照組之間采用MannWhitney U檢驗比較，P<0.05有統計學意義。采用MedCalc軟件繪制受試者工作特征曲線，分析比較單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率對EBV病毒感染的臨床意義。

二結果

（一）EBV陽性與對照組單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率中位數（下四分位數，上四分位數）差異結果

陽性組入選160病例，單核細胞與淋巴細胞比率中位數為5.88（4.10～7.9）、中性粒細胞與淋巴細胞比率中位數為1.08（0.67～2.14）、血小板與淋巴細胞比率中位數為100.21（62.33～146.43）、平均血小板體積與血小板計數比率中位數為0.03（0.02～0.05）。

對照組入選77病例，單核細胞與淋巴細胞比率中位數為4.19（3.05～5.812）、中性粒細胞與淋巴細胞比率中位數為1.7（0.81～3.24）、血小板與淋巴細胞比率中位數為140.66（88.43～193.50）、平均血小板體積與血小板計數比率中位數為0.03（0.02～0.04）。

Z值分別為-4.241、-2.36、-3.613、-3.351。P值分別為0、0.018、0、0.001。

單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率在EBV-DNA陽性組和對照組間差異均有統計學意義（P<0.05），陽性組單核細胞與淋巴細胞比率中位數水平明顯高于對照組水平，但陽性組中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率中位數水平低于對照組，兩組間平均血小板體積與血小板計數比率水平差異不明顯。

（二）單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率四項指標對EBV病毒感染意義比較

為了分析比較單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率對EBV病毒感染的臨床意義，使用ROC曲線進行分析，結果如圖1，單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率曲線下面積（AUC）分別為0.670、0.634、0.595、0.650。根據約登指數計算出單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率的臨界值，從而計算出敏感度最大為中性粒細胞與淋巴細胞比率（68.90%），特異度最大為單核細胞比率與淋巴細胞（70.10%），如表1數值。

三討論

EB病毒是嗜淋巴細胞的雙鏈DNA病毒的一種，屬于皰疹病毒γ亞科，是兒科常見的感染性疾病病原體之一，可導致呼吸內道感染、傳染性單核細胞增多癥、頸部淋巴結炎及噬血細胞綜合征，也可有其他系統受累情況，且致病機制不明。EBV有5種抗原成分，分別為衣殼抗原、膜抗原、早期抗原、補體抗原（可溶性抗原S）和EB病毒核抗原，成年人抗病毒衣殼抗原（VAC）Ig G陽性率高達90%～95%，在我國學齡前兒童VCA-Ig G陽性率可達90%。根據EBV感染時間和感染后產生的特異性抗體譜，可將EBV感染分為原發性感染、潛伏感染和激活感染三種類型。

據研究表明，EBV感染機體后主要侵犯淋巴細胞，使淋巴細胞大量增殖。當EBV感染中異型淋巴細胞后，EBV通過病毒表面高度糖基化的包膜糖蛋白gp350/220與B細胞表面受體CR2結合使得病毒基因gp42能與B淋巴細胞表面的HLA-2類分子結合，從而啟動膜的融合過程，協助病毒逃避免疫系統的識別并成功侵入B淋巴細胞，同時引起T淋巴細胞和NK細胞一起釋放大量細胞因子，刺激淋巴細胞發生細胞毒效應，導致異型淋巴細胞百分比和淋巴細胞百分率反應性升高。血常規參數可以作為醫務人員可靠又便捷的輔助診斷手段。近年來，中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、單核細胞比率與淋巴細胞、平均血小板體積與血小板計數比率值已被用作新的炎癥標記物，用于各種傳染病、腫瘤、病毒感染等疾病的預測和評估，與單純中性粒細胞、淋巴細胞和血小板相比，單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率和平均血小板體積與血小板計數比率更穩定。本研究中，陽性組的單核細胞與淋巴細胞比率水平高于對照組，反觀中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率，則發現陽性組的水平均低于對照組，故認為單核細胞與淋巴細胞比率會隨著早期EBV感染呈正相關增高，中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率則會隨著淋巴細胞增多而呈負相關減少，平均血小板體積與血小板計數比率水平在兩組間差異并不明顯。

本研究中，關于單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率和平均血小板體積與血小板計數比率的ROC曲線面積，因單核細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率的曲線下面積大于0.6，可以作為用來檢測EBV感染的參考指標之一，三者中單核細胞與淋巴細胞比率的曲線下面積為0.670，參考價值高于其他兩項炎癥指標。

四結語

綜上所述，本研究認為單核細胞與淋巴細胞比率、中性粒細胞與淋巴細胞比率、血小板與淋巴細胞比率、平均血小板體積與血小板計數比率四種炎癥指標，在考慮其ROC曲線面積和差異性的情況下，單核細胞與淋巴細胞比率和血小板與淋巴細胞比率在檢測在兒童EB病毒感染中具有一定的臨床意義，單核細胞與淋巴細胞比率的臨床意義較之更大。

（作者單位系國家兒童醫學中心復旦大學附屬兒科醫院臨床檢驗中心，▲為通訊作者）

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