眼瞼基底細胞癌組織中SIRT1、JAK2表達及其臨床意義

鄭 博 郅 瑛 杜 蕊

眼瞼基底細胞癌發病速度較為緩慢,且惡性程度和轉移性較低,因此早期診斷誤診和漏診的可能性極大,但若不能及時進行治療,一旦病情進展至晚期,極有可能導致患者喪失眼球,從而影響患者的正常生活,同時還會加大治療的挑戰性[1]。因此及時尋找有效的分子靶標,在眼瞼基底細胞癌診斷和防治中可發揮出至關重要的作用。沉默信息調節因子1(silence information regulator 1,SIRT1)可通過去乙酰化的方式對基因表達進行調控,從而促進或抑制腫瘤進展[2]。酪氨酸蛋白激酶信號傳導系統在促進腫瘤的發生、發展中具有重要意義,酪氨酸蛋白激酶-2(Janus kinase-2,JAK2)作為JAK家族的一員,其表達不僅對腫瘤的發生、發展有影響,還有可能影響患者的預后[3]。基于此,本文就眼瞼基底細胞癌組織中SIRT1、JAK2的表達及臨床意義進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

根據納入、排除標準,于2017年5月至2022年5月選取經病理檢查證實為眼瞼基底細胞癌且經手術切除保留的癌組織蠟塊70例作為觀察組,男性37例、女性33例;年齡20～78歲,平均(54.56±5.34)歲。另將其同期切除的癌旁組織蠟塊70例作為對照組,男性39例、女性31例;年齡21～80歲,平均(55.22±5.16)歲。兩組基本資料比較差異不顯著(P>0.05)。本次研究已獲得醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

采用免疫組化SP法檢測:對兩組組織標本進行切面,厚度為4 μm,置于60 ℃烤箱內烤1 h,脫蠟、水化(無水乙醇、體積分數95%、85%、70%乙醇),滴入過氧化氫阻斷過氧化酶,PBS清洗,封閉液封閉,滴入一抗SIRT1、JAK2,置于4 ℃環境中一夜,PBS清洗,滴入二抗孵育(45 min),DAB顯色,10%蘇木精復染,乙醇脫水,經二甲苯透明、封片,于顯微鏡下觀察。SIRT1、JAK2陽性表達參照染色指數(staining index,SI)評估。SI為染色強度與陽性細胞百分比評分乘積。評分標準:0分表示無染色;1分表示淺黃色;2分表示棕黃色;3分表示棕褐色。(-):SI<3分;(+):SI=3分:(++):SI>3,<6分;(+++):SI≥6分。(-)、(+)表示低表達,(++)、(+++)表示高表達。

1.3 觀察指標

(1)比較眼瞼基底細胞癌組織的SIRT1、JAK2表達陽性率。(2)分析SIRT1、JAK2表達與眼瞼基底細胞癌組織臨床病理特征的關系,并分析其相關性,包括性別、年齡(≥60歲、<60歲)、增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)增殖指數(≥25%、<25%)、腫瘤直徑(≥3 cm、<3 cm)、病理分型(結節型、潰瘍型、浸潤型、硬斑病樣型)、TNM分期(Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期)。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 眼瞼基底細胞癌組織中SIRT1、JAK2表達情況

眼瞼基底細胞癌組織中SIRT1、JAK2表達陽性率明顯高于癌旁組織(P<0.05),見表1。

表1 眼瞼基底細胞癌組織SIRT1、JAK2表達情況/例

2.2 SIRT1、JAK2表達與眼瞼基底細胞癌組織臨床病理特征的關系

SIRT1低表達和SIRT1高表達與眼瞼基底細胞癌患者性別、復發率無關(P>0.05),與患者年齡、PCNA增殖指數、腫瘤直徑、病理分型相關(P<0.05);JAK2低表達和SIRT1高表達與眼瞼基底細胞癌患者性別、年齡、PCNA增殖指數、腫瘤直徑、病理分型、有無脈管浸潤、復發無關(P>0.05),與TNM分期相關(P<0.05),見表2。

表2 SIRT1、JAK2表達與眼瞼基底細胞癌臨床病理特征的關系(例,%)

2.3 眼瞼基底細胞癌臨床病理特征與SIRT1、JAK2表達的相關性

SIRT1表達與眼瞼基底細胞癌患者年齡、PCNA增殖指數、腫瘤直徑、病理分型呈正相關性;JAK2表達與眼瞼基底細胞癌組織TNM分期呈正相關性(P<0.05),見表3。

表3 眼瞼基底細胞癌臨床病理特征與SIRT1、JAK2表達的相關性

3 討論

3.1 眼瞼基底細胞癌組織SIRT1的表達及臨床意義

SIRT1是一種賴氨酸脫乙酰基酶,具有組蛋白去乙酰化和乙酰化活性,可對轉錄水平中對一些基因的表達或沉默進行調節,同時還能通過促進上皮間質化的方式作為癌癥轉移的關鍵調節劑。魯強等[4]學者的研究認為,利用慢病毒介導的RNA干擾技術對SIRT1靶向沉默,可通過p53/p21途徑抑制RL95-2細胞增殖、非錨定依賴性、遷移及侵襲,可見SIRT1與腫瘤的發生、發展均存在一定關聯。本次研究結果顯示,與癌旁組織相比,眼瞼基底細胞癌組織的SIRT1表達陽性率更高,SIRT1表達與眼瞼基底細胞癌組織年齡、PCNA增殖指數、腫瘤直徑、病理分型呈正相關性。提示SIRT1表達水平與眼瞼基底細胞癌的發生、發展存在密切關聯,推測眼瞼基底細胞癌可能是眼瞼基底細胞癌診斷與治療的有效參照指標。劉法等[5]的研究也發現,眼瞼基底細胞癌組織中SIRT1的陽性表達率顯著比皮膚基底細胞乳頭狀瘤組織高,經Spearman法分析后發現,眼瞼基底細胞癌組織中SIRT1蛋白表達具有正相關性,且SIRT1在眼瞼基底細胞癌組織中的表達與患者年齡、PCNA增殖指數、腫瘤長徑和腫瘤病理分型有關,與本次研究結果一致。

3.2 眼瞼基底細胞癌組織JAK2的表達及臨床意義

JAK在細胞因子信號傳遞中具有重要作用,可在細胞因子受體與相應配基結合后活化,并對另一種信號蛋白分子STAT進行激活,進而誘導目的基因表達。目前有相關研究認為JAK/STAT與多種腫瘤的發生發展均存在一定關聯,因此臨床多通過抑制JAK/STAT通路的方式抑制癌癥進展[6]。袁前超等[7]的研究認為,敲低TCF7通過抑制JAK/STAT通路活化的方式,可在一定程度上抑制肺癌細胞的增殖能力。另外,賈茗博等[8]也發現,利用氯化兩面針堿抑制膠質瘤細胞上皮-間質轉化,其抑制作用可通過JAK/STAT3信號通路實現。JAK2是JAK家族的一員,與腫瘤的發生、發展均存在一定關聯,但目前國內對于JAK2表達與眼瞼基底細胞癌組織臨床病理特征關系的相關研究較為缺乏。本次研究發現,相較于癌旁組織而言,眼瞼基底細胞癌組織的JAK2表達陽性率更高,JAK2表達與眼瞼基底細胞癌組織TNM分期呈正相關性。提示JAK2表達水平在促進眼瞼基底細胞癌發生、發展方面具有重要意義。

綜上所述,SIRT1、JAK2在眼瞼基底細胞癌組織中呈高表達,與患者的年齡、PCNA增殖指數、腫瘤直徑、病理分型、TNM分期存在一定關聯,在診斷眼瞼基底細胞癌方面具有重要意義。