血清Zonulin和Metrnl水平與糖尿病腎病患者病情及預后的關系

苗素芳, 張維娜, 張姣姣

(晉城市第二人民醫院檢驗科, 山西 晉城 048000)

糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)是常見的糖尿病并發癥之一,主要是由于機體長期處于高糖狀態引起腎臟微血管病變所致[1]。DN早期無明顯癥狀,隨著病情進展可表現為水腫、高血壓、大量蛋白尿等癥狀,部分患者可能合并糖尿病視網膜病變,嚴重者可發展至終末期腎病或死亡,嚴重影響患者生活質量[2-3]。與早期DN患者相比,晚期DN患者治療難度大,預后差。準確評估DN患者病情嚴重程度,有助于臨床醫生制定針對性的預防措施及治療方案,對改善患者預后具有重要意義[4]。血清連蛋白(Zonulin)是一種可調節腸道通透性的生理蛋白,參與多種疾病的發生與發展,如慢性炎癥性疾病、腸易激綜合征等[5-6]。神經膠質細胞分化調節因子樣因子(Meteorin-like,Metrnl)是一種脂肪肌動蛋白,在體內分布較為廣泛,參與機體內的多種生物學反應,如神經發育、抗炎、骨形成等[7]。本研究以DN患者為研究對象,探討血清Zonulin、Metrnl水平與此類患者病情嚴重程度及預后的相關性,為DN患者的預防及治療提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年1月至2020年1月晉城市第二人民醫院收治的146例DN患者為研究對象(研究組),另選取同時期收治的146例2型糖尿病(T2DM)患者為對照組。研究組男性73例,女性73例;年齡45～78歲,平均年齡(60.36±12.54)歲;糖尿病病程4～16年,平均病程(10.36±2.45)年;BMI 22.41～27.53 kg/m2,平均BMI(24.31±1.54)kg/m2。對照組男性71例,女性75例;年齡45～78歲,平均年齡(60.36±12.54)歲;糖尿病病程4～16年,平均病程(10.36±2.45)年;體質指數(BMI)22.36～27.42 kg/m2,平均BMI(24.36±1.48)kg/m2。兩組一般資料經比較,差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 納入與排除標準納入標準:(1)對照組均符合T2DM的診斷標準[8],研究組患者均符合DN診斷標準[9];(2)年齡≥18歲;(3)患者均知曉本研究內容,自愿參與本研究并簽署知情同意書。排除標準:(1)合并有自身免疫性疾病或惡性腫瘤、尿路感染;(2)其他原因引起的蛋白尿;(3)近期服用可影響腎功能的藥物;(4)合并其他腎臟疾病。本研究已獲得本院倫理委員會批準(倫理號:20176)。

1.3 ELISA法檢測患者血清Zonulin和Metml水平患者入院24 h內取其外周血4 mL,經離心后獲得血清,待測,其中血清Zonulin、Metml水平采用酶聯免疫吸附法檢測,具體檢測步驟嚴格遵守試劑盒說明書,試劑盒購于上海博湖生物科技有限公司。

1.4 血清Zonulin、Metrnl水平與DN患者病情的相關性分析收集可能影響DN患者預后不良的相關因素,包括性別、年齡、BMI、糖化血紅蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、空腹血糖(fasting blood glucose,FPG)、收縮壓、舒張壓、糖尿病病程、尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、胰島素抵抗指數(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)、Zonulin、Metrnl、24 h蛋白尿、總膽固醇(Total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、甘油三酯(Triacylglycerol,TG)、高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、白細胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白蛋白(Albumin,Alb)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、血管緊張素轉換酶抑制劑(ACEI)/血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(ARB)類藥物使用情況及降糖藥物使用情況等。

1.5 影響DN患者預后危險因素分析研究組患者根據Mogenson分期標準[10]進行分期:(1)早期DN:微量白蛋白尿30～300 mg/24 h或尿白蛋白/肌酐30～300 mg/g,腎小球濾過率(GFR)升高,部分患者可伴高血壓,血清肌酐水平正常。病理表現為腎小球體積增大,腎小球基底膜增厚,腎小管肥大,腎小管基底膜增厚。(2)中期DN:患者持續白蛋白尿(尿白蛋白定量> 300 mg/24 h或尿白蛋白/肌酐>300 mg/g)和(或)尿蛋白定量>0.5 g/24 h,GFR正常或開始下降,血清肌酐水平正常,多數患者出現高血壓、水腫。病理表現為不同程度的腎小球硬化,腎小球體積增大,系膜區增寬,基質增加,腎小球基底膜增厚,K-W結節形成,可見球囊滴,纖維蛋白帽,毛細血管袢微血管瘤,間質可見灶性纖維化,間質動脈透明變性及動脈硬化。(3)晚期DN:大量蛋白尿或腎病綜合征,出現腎功能不全,且隨病情進展,GFR進行性下降,最終進展至終末期腎臟病(end stage renal disease,ESRD),水腫及高血壓加重。病理表現為腎小球硬化較多,大量廢棄腎小球,未廢棄腎小球可表現為結節樣或系膜增生性病變,腎小管間質病變重,血管透明變性顯著。將早期DN患者納入早期DN組(76例),中晚期DN患者納入中晚期DN組(70例)。

對146例DN患者進行隨訪,以患者進入ESRD或死亡為終點事件,隨訪截止日期為2023年1月31日,采用電話隨訪和門診復查,將發生ESRD或死亡的患者納入預后不良組,反之納入預后良好組。

2 結果

2.1 兩組患者血清Zonulin和Metrnl水平比較研究組患者血清Zonulin水平高于對照組,Metrnl水平低于對照組,差異均具有統計學意義(P<0.001)。見表1。

表1 兩組患者血清Zonulin和Metrnl水平比較

2.2 早期和中晚期DN患者血清Zonulin及Metrnl水平比較中晚期DN組患者血清Zonulin水平高于早期DN組,Metrnl水平低于早期DN組,差異均具有統計學意義(P<0.001)。見表2。

表2 早期和中晚期DN患者血清Zonulin及Metrnl水平比較

2.3 血清Zonulin和Metrnl水平與DN患者病情的相關性Spearman相關性分析顯示,血清Zonulin水平與DN患者病情呈正相關(r=0.486,P<0.001),血清Metrnl水平與DN患者病情呈負相關(r=-0.493,P<0.001)。見圖1。

2.4 單因素分析影響DN患者預后不良的相關因素146例患者中,21例患者失訪,失訪率為14.38%(21/146),余125例患者中死亡12例,64例患者進展為ESRD,預后不良發生率為60.8%(76/125)。預后不良組與預后良好組患者性別構成比、年齡、BMI、HbA1c、FPG、收縮壓、舒張壓、糖尿病病程、HOMA-IR、24 h蛋白尿、TC、LDL-C、TG、HDL-C、ACEI/ARB類藥物使用情況、降糖藥物使用情況經比較,差異無統計學意義(P>0.05)。預后不良組患者BUN、Zonulin、Scr、IL-6水平高于預后良好組(P<0.001),Metrnl、Alb水平低于預后良好組(P<0.001)。見表3。

表3 單因素分析影響DN患者預后不良的相關因素

2.5 多因素分析影響DN患者預后不良的危險因素以DN患者預后不良為因變量(Y),將BUN、Zonulin、Metrnl、Alb、Scr、IL-6水平為自變量(X)進行Logistic回歸分析,結果顯示,血清Zonulin、Metrnl、Alb、L-6水平異常均是影響DN患者預后不良的危險因素(P<0.001)。見表4。

表4 多因素分析影響DN患者預后不良的危險因素

3 討論

近年來,隨著糖尿病發病率的升高,DN的發病率也隨之升高,嚴重影響患者生活質量。預計到2040年,全球DN患者將增至2.57億人[11]。既往研究顯示,與單純糖尿病患者相比,DN患者的治療更為棘手,死亡率高,且不同嚴重程度的DN患者治療方案及預后亦有所不同[12-13]。目前,蛋白尿和腎小球濾過率是評估DN病情及預測預后的主要指標,但該方式需要留取患者尿液,較為費時,加之檢測結果受時間和儲存溫度影響較大,限制了其在臨床中的應用[14]。鑒于此,尋找新的評估DN患者病情與預后的指標成為臨床醫生關注熱點。

Zonulin是一種代謝調節蛋白,在既往研究中多被用于評估腸黏膜屏障功能狀態[5]。但近年來發現Zonulin與炎癥性疾病的發生存在一定的關系,Saitogullari等[15]發現糖尿病前期患者急性高血糖期間,血清Zonulin水平明顯上調,影響患者腸道功能,因此認為腸道功能可能在血糖上調和糖尿病的發病機制中發揮著重要作用。Troisi等[16]研究顯示,對患有炎性疾病的患者應用Zonulin抑制劑,可明顯提高臨床療效。Metrnl是一種新的分泌型脂肪細胞因子,一般在運動或受到冷刺激時,機體內的脂肪組織會誘導其產生與分泌,可促進抗炎巨噬細胞的交替激活,發揮抗炎癥免疫反應的作用[17]。魏巍等[18]研究發現,合并冠心病的T2DM患者血清Metrnl水平低于單純T2DM患者,而單純T2DM患者血清Metrnl水平低于健康志愿者,且Metrnl水平變化與合并冠心病的T2DM患者冠脈病變程度呈負相關,認為Metrnl可能是通過激活AMP活化的蛋白激酶(AMPK)、過氧化物酶體增殖物激活受體δ(PPARδ)信號通路,抑制炎癥反應,而Metrnl水平降低后,導致炎癥反應加重,進而加速冠脈病變程度。炎癥可通過破壞血管內皮細胞功能參與糖尿病腎病的發生發展。Jung等[19]的研究顯示,Metrnl可通過核因子-κB信號通路抑制炎癥因子表達,保護血管內皮細胞功能。本研究結果表明,研究組患者血清Zonulin、Metrnl水平與對照組比較有明顯差異,提示血清Zonulin、Metrnl水平變化可能參與DN的發生。

本研究還分析了DN患者病情嚴重程度與血清Zonulin、Metrnl水平的相關性,結果顯示中晚期DN組患者血清Zonulin水平高于早期DN組,Metrnl水平低于早期DN組。表明血清Zonulin、Metrnl水平變化可能參與了DN病情進展。Spearman相關性分析顯示,血清Zonulin水平與DN患者病情嚴重程度呈正相關,血清Metrnl水平與DN患者病情嚴重程度呈負相關,均提示血清Zonulin、Metrnl水平變化與DN病情進展關系密切,是評估DN患者病情嚴重程度的潛在標志物。本研究結果還顯示,預后不良組患者BUN、Zonulin、Scr、IL-6水平高于預后良好組,Metrnl、Alb水平低于預后良好組,提示DN患者預后不良受多種因素的影響。Logistic回歸分析顯示,血清Zonulin、Metrnl、Alb、L-6水平異常均是影響DN患者預后不良的危險因素,表明血清Zonulin水平越高、Metrnl水平越低,DN患者預后越差。此外,DN患者預后還受Alb、L-6水平的影響,在臨床工作中應對上述指標變化引起足夠的重視。

綜上所述,DN患者血清Zonulin水平隨病情進展升高,Metrnl水平隨病情進展降低,Zonulin水平異常升高、Metrnl水平異常降低均是影響DN患者預后不良的獨立危險因素。