張睿祺?張哲?陳東?方微

【摘要】目的 研究慢性胃炎病理特征與Ⅰ型幽門螺桿菌（Ⅰ-Hp）、Ⅱ型幽門螺桿菌（Ⅱ-Hp）的關(guān)系及臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 選取胃黏膜活檢診斷為慢性胃炎的樣本2 583例，采用熒光定量PCR法檢測(cè)Hp并進(jìn)行分型，分析Ⅰ-Hp、Ⅱ-Hp與慢性胃炎的炎性反應(yīng)程度、活動(dòng)度、腸上皮化生及淋巴濾泡形成之間的關(guān)系。結(jié)果 慢性胃炎的炎性反應(yīng)程度、活動(dòng)度、腸上皮化生在Ⅰ-Hp、Ⅱ-Hp感染中均存在差異，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.05）。炎癥活動(dòng)度為Ⅰ-Hp感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P < 0.05）。結(jié)論 Ⅰ-Hp和Ⅱ-Hp感染在慢性胃炎炎性反應(yīng)程度、活動(dòng)度、腸上皮化生中表現(xiàn)有所差異。活動(dòng)性炎癥提示可能存在Ⅰ-Hp感染。

【關(guān)鍵詞】 幽門螺桿菌；分型；慢性胃炎；病理特征；活動(dòng)性炎癥

Value of pathological features of chronic gastritis for typing of Helicobacter pylori Zhang Ruiqi，Zhang Zhe，Chen Dong，F(xiàn)ang Wei. Department of Pathology， Beijing Anzhen Hospital， Capital University of Medical Science， Beijing 100029， China

Corresponding author，Chen Dong， E-mail： azchengdong@163.com

【Abstract】Objective To assess the relationship between pathological features of chronic gastritis and typeⅠHelicobacter pylori （Ⅰ-Hp） and typeⅡ Helicobacter pylori （Ⅱ-Hp） and the value in clinical application. Methods 2 583 samples were selected from patients diagnosed with chronic gastritis by gastric mucosal biopsy. Hp was detected and typed by fluorescence quantitative PCR.? The relationship betweenⅠ-Hp andⅡ-Hp， and the degree of inflammatory response， activity， intestinal metaplasia and lymphatic follicular formation in chronic gastritis was analyzed. Results There were significant differences in inflammatory response， activity and intestinal metaplasia in chronic gastritis betweenⅠ-Hp andⅡ-Hp infection （all P < 0.05）. Inflammatory activity was an independent risk factor forⅠ-Hp infection （P < 0.05）. Conclusions Ⅰ-Hp andⅡ-Hp infection have different manifestations in inflammatory response， activity and intestinal metaplasia in chronic gastritis. Active inflammation suggests the potential incidence of Ⅰ-Hp infection.

【Key words】Helicobacter pylori； Typing； Chronic gastritis； Pathological feature； Active inflammation

幽門螺桿菌（Hp）是一類致癌細(xì)菌，與慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌、胃黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤的發(fā)生密切相關(guān)［1-3］。近年來研究發(fā)現(xiàn)Hp感染除危害消化系統(tǒng)外，與肥胖、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病存在相關(guān)性［4-5］。Hp菌株存在不同的基因型，導(dǎo)致患者感染后出現(xiàn)不同的臨床表現(xiàn)及病理改變。Ⅰ-Hp、Ⅱ-Hp均表達(dá)尿素酶基因（Ure），而空泡細(xì)胞毒素（VacA）和細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白（CagA）僅在Ⅰ-Hp中表達(dá)［6］。目前對(duì)于Hp分型的檢測(cè)方法多采用血清學(xué)檢測(cè)或熒光定量PCR法，兩種方法均通過判斷VacA和CagA的表達(dá)對(duì)Hp進(jìn)行分型，而不同的Hp分型采取不同的治療措施。因Ⅰ-Hp的強(qiáng)致病性，感染患者應(yīng)及時(shí)進(jìn)行根除性治療，而對(duì)于致病性較弱的Ⅱ-Hp感染且無癥狀的患者暫不需進(jìn)行根除性治療［7］。本研究主要討論慢性胃炎病理特征與Ⅰ-Hp、Ⅱ-Hp感染的關(guān)系，并總結(jié)慢性胃炎患者是否感染Ⅰ-Hp時(shí)病理特征的差異，推測(cè)診斷Ⅰ-Hp感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，旨在為臨床診療工作提供參考依據(jù)。

材料與方法

一、材 料

選取首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院病理科2021年病理診斷為慢性胃炎的胃黏膜活組織檢查（活檢）標(biāo)本，排除其中合并其他胃腸道疾病者；近2周使用PPI、胃黏膜保護(hù)劑等藥物者；合并肝腎功能障礙者；自身免疫性疾病者。其結(jié)果判讀根據(jù)2017年《第五次全國(guó)幽門螺桿菌感染處理共識(shí)報(bào)告》的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí)［8］。病理診斷經(jīng)兩位病理醫(yī)師雙盲法閱片診斷，有異議者再經(jīng)高一級(jí)職稱醫(yī)師復(fù)查后納入實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)范圍內(nèi)。采用熒光定量PCR法檢測(cè)Hp感染情況，并進(jìn)行分型。共收集

2 583例樣本，其中男1 172 例，女1 411例，年齡（42.39±14.27）歲。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過（審批號(hào)：2023167X）。

二、儀器和試劑

北京新基永康生物科技有限公司幽門螺桿菌核酸檢測(cè)試劑盒及Ⅰ型幽門螺桿菌核酸檢測(cè)試劑盒、山東厚生博泰生物技術(shù)有限公司石蠟樣本DNA提取試劑盒；ABI7500全自動(dòng)熒光定量PCR儀。

三、熒光定量PCR檢測(cè)Hp

標(biāo)本切片：每例標(biāo)本切取10 μm左右的石蠟組織薄片10張，放入潔凈的Ep管中，每例標(biāo)本切取后，均用毛筆刷干凈，嚴(yán)防交叉污染。DNA提取：使用山東厚生博泰生物技術(shù)有限公司石蠟樣本DNA提取試劑盒進(jìn)行DNA提取。Hp鑒定及分型檢測(cè)：按照試劑盒說明書進(jìn)行加樣。使用熒光定量PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增。結(jié)果判讀：兩種試劑盒均利用受試者操作特征（ROC）曲線法確定陽(yáng)性判斷值為35.00。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 26.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，組間比較及兩兩比較采用χ 2檢驗(yàn)或 Fisher確切概率法。趨勢(shì)檢驗(yàn)采用Mantel-Haenszel χ 2檢驗(yàn)。在分析慢性胃炎患者Ⅰ-Hp感染危險(xiǎn)因素時(shí)，先通過單因素分析，將P < 0.05的變量納入多因素分析，后采用多因素Logistic 回歸分析得出獨(dú)立危險(xiǎn)因素。P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

一、慢性胃炎患者Hp感染情況

2 583例慢性胃炎患者，經(jīng)熒光定量PCR法檢測(cè)，Hp感染者為982例，陽(yáng)性率為38.02%；Ⅰ-Hp感染者為874例，陽(yáng)性率為33.84%；Ⅱ-Hp感染者為108例，陽(yáng)性率為4.18%。見圖1。

二、慢性胃炎病理特征與Hp感染的關(guān)系

慢性胃炎的炎性反應(yīng)程度、活動(dòng)度、腸上皮化生及淋巴濾泡的形成均與Hp感染具有相關(guān)性，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.05），且炎性反應(yīng)程度、活動(dòng)度、腸上皮化生與Hp感染呈線性相關(guān)（P均< 0.05）。見表1。其中炎性反應(yīng)程度各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.05）；炎癥活動(dòng)度除輕度活動(dòng)與重度活動(dòng)Hp感染比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P = 0.074）外，其他各組兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.05）；未發(fā)生腸上皮化生者與輕度腸上皮化生者及輕度腸上皮化生者與中度腸上皮化生者比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.05）。

三、慢性胃炎病理特征與Hp分型的關(guān)系

慢性胃炎的炎性反應(yīng)程度、活動(dòng)度、腸上皮化生在Ⅰ-Hp、Ⅱ-Hp感染中存在差異，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.05）。其中炎性反應(yīng)程度、活動(dòng)度與Ⅰ-Hp感染存在線性關(guān)系（P < 0.05）。見表2。兩兩比較各組結(jié)果提示，炎性反應(yīng)程度中，輕度炎癥與中度炎癥及重度炎癥2組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.05）；炎癥活動(dòng)度中，不活動(dòng)者與輕、中、重度活動(dòng)者比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；腸上皮化生中，未發(fā)生腸上皮化生者與中度腸上皮化生者及中度腸上皮化生者與重度腸上皮化生者兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見表2。

四、慢性胃炎患者Ⅰ-Hp感染危險(xiǎn)因素分析

單因素分析顯示，慢性胃炎的炎性反應(yīng)程度、活動(dòng)度及腸上皮化生程度均與Ⅰ-Hp感染存在相關(guān)性（P < 0.05），將三者納入多因素Logistic回歸分析，結(jié)果提示炎癥活動(dòng)度為Ⅰ-Hp感染的影響因素（P < 0.05）。見表3。

討論

Hp可引起多種消化系統(tǒng)疾病，其嚴(yán)重程度及臨床轉(zhuǎn)歸與Hp不同的毒力因子表達(dá)、機(jī)體的免疫能力以及外界環(huán)境因素有關(guān)［9］。根據(jù)VacA、CagA的表達(dá)情況將Hp分為Ⅰ-Hp和Ⅱ-Hp。兩種類型的Hp臨床表現(xiàn)及治療方法有所不同，因此研究Hp感染時(shí)不同類型菌株所致的胃黏膜病理特征的改變對(duì)于多種消化系統(tǒng)疾病的診斷及預(yù)后具有重要意義，且可為Hp感染的病理診斷與分型提供數(shù)據(jù)支持。

當(dāng)患者感染Hp后，Hp釋放的特異性抗原導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生大量的炎性趨化因子，胃黏膜中的中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，引發(fā)胃黏膜炎癥免疫反應(yīng)［10］。本研究中慢性胃炎的炎性反應(yīng)程度、活動(dòng)度、腸上皮化生及淋巴濾泡的形成均與Hp感染具有相關(guān)性。其中炎性反應(yīng)程度、活動(dòng)度及腸上皮化生與Hp感染存在線性關(guān)系。

CagA和VacA是用于鑒別Ⅰ-Hp感染的重要毒力因子。國(guó)外長(zhǎng)期隨訪的隊(duì)列研究顯示，CagA和VacA雙陽(yáng)性菌株感染者發(fā)生胃癌病變的風(fēng)險(xiǎn)是CagA和VacA雙陰性菌株感染者的4.8倍［11］。CagA是已被證實(shí)的癌性蛋白，與胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。CagA可刺激上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化、加速細(xì)胞增長(zhǎng)，有促進(jìn)胃黏膜上皮細(xì)胞發(fā)生變異的可能［12］。另有文獻(xiàn)報(bào)道，CagA可以異常激化ERK信號(hào)通路，抑制胃癌細(xì)胞凋亡，促進(jìn)增殖［13］。VacA能夠通過多種機(jī)制促進(jìn)胃黏膜病變的發(fā)生［14-15］。本研究中Ⅰ-Hp感染者為847例，陽(yáng)性率為33.84%，占Hp感染者的86.25%。與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果相近［16］。Ⅱ-Hp感染最重要的毒力因子為Ure，其分解尿素產(chǎn)生為NH4和CO2，NH4中和胃酸，創(chuàng)造局部中性環(huán)境，使Hp能定植于胃內(nèi)［17］。本研究結(jié)果顯示，慢性胃炎的炎性反應(yīng)程度、活動(dòng)度、腸上皮化生在Ⅰ-Hp、Ⅱ-Hp感染中存在差異，其中隨著炎性反應(yīng)程度、活動(dòng)度的加重，Ⅰ-Hp感染占比逐漸遞增，重度腸上皮化生患者均為Ⅰ-Hp感染。

有文獻(xiàn)報(bào)道，Ure的毒力低于CagA及VacA，其致病性可能主要在初始定植起重要作用，CagA 和VacA則與黏膜損害的嚴(yán)重程度相關(guān)［18］。因此對(duì)于Hp分型的鑒定十分重要。本研究發(fā)現(xiàn)炎癥活動(dòng)度為慢性胃炎患者Ⅰ-Hp感染的獨(dú)立影響因素，且為危險(xiǎn)因素。因此對(duì)于慢性活動(dòng)性胃炎患者高度提示Ⅰ-Hp感染。

綜上所述，Hp是胃炎的主要病因，慢性胃炎患者的病程發(fā)展也與Hp感染密切相關(guān)。慢性胃炎患者炎性反應(yīng)程度、活動(dòng)度、腸上皮化生在Ⅰ-Hp、Ⅱ-Hp感染中存在差異。慢性胃炎出現(xiàn)活動(dòng)性炎癥時(shí)可提示Ⅰ-Hp感染。

參 考 文 獻(xiàn)

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（收稿日期：2023-06-25）

（本文編輯：楊江瑜）