復方苦參注射液對乙肝相關肝細胞癌患者化療效果及T細胞免疫的影響

呂新遠，戴兵，劉馳

南陽市中心醫院普通外科肝臟病區，南陽 473000

我國肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）約占原發性肝癌的90%，其中約80%以上HCC主要由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染所致［1］。多數HCC患者在疾病進展到中晚期時，才會出現肝區疼痛、肝大、腹水等典型癥狀，此時已無法進行外科手術治療，只能采用非手術治療［2］。隨著血管介入放射學的發展，介入治療技術以其微創、快速、安全和有效等優勢，在心腦血管、外周血管、腫瘤等領域取得了飛速發展。經導管動脈化療栓塞（transcatheter arterial chemoembolization，TACE）術是介入放射學最重要的基本技術之一，更是肝癌非手術治療的首選方法，但長期使用化療藥物可能出現藥物不良反應，影響患者預后［3］。中醫藥在防治放化療后的不良反應方面積累了豐富的臨床經驗，部分學者認為化療藥物藥性多峻烈，易困脾傷胃，脾失健運，胃失和降，運化失職［4］。在治療癌癥的過程中，中醫藥在不同階段可起到促進康復、抗復發轉移、增效減毒及提高生活質量等作用，現已被廣泛應用于臨床［5］。復方苦參注射液可清熱利濕、涼血解毒、散結止痛，該藥所含的苦參堿成份具有提高免疫功能的作用［6］。既往多項研究［7-8］報道，復方苦參注射液應用于腫瘤的輔助治療，可顯著提高患者的治療效果。因此推測復方苦參注射液可能通過改善腫瘤患者的免疫功能，提高化療效果。本研究旨在探討復方苦參注射液對HBV相關HCC患者化療效果及T細胞免疫功能的影響，以期為臨床治療HBV相關HCC提供更多的決策依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月～2021年12月期間于該院確診的106例HBV相關HCC患者作為研究對象，采用隨機數字表法分為對照組與觀察組，每組53例。對照組：男性28例，女性25例；年齡29～77歲，平均年齡（56.21±10.64）歲；CNLC分期：Ⅱ期者13例，Ⅲ期者24例，Ⅳ期者16例；卡諾夫斯凱計分（Kanofsky performance score，KPS）評分58～88分，平均KPS評分（70.94±7.01）分。觀察組：男性27例，女性26例；年齡34～75歲，平均年齡（58.28±8.89）歲；CNLC分期：Ⅱ期者14例，Ⅲ期者23例，Ⅳ期者16例；KPS評分57～84分，平均KPS評分（72.72±6.55）分。兩組一般資料比較無統計學差異（P＞0.05），具有可比性。本研究通過醫院倫理委員會審核批準，所有患者及家屬愿意配合完成本研究，并簽署知情同意書。

納入標準：①符合《原發性肝癌診療規范》（2017年版）［9］中HCC相關診斷標準，經影像學、病理檢查確診為HCC，且CNLC分期為Ⅱ～Ⅳ期者。②經實驗室檢查、病理學及影像學診斷為HBV感染者。③無法進行根治性手術治療者。④符合TACE術適應癥，且無相關禁忌癥者。⑤經醫生評估生存時間＞3個月者。⑥年齡＞18歲者。

排除標準：①存在嚴重心腦血管疾病者。②存在凝血功能障礙者。③存在免疫系統疾病者。④存在嚴重感染者。⑤對造影劑及局部麻醉藥物存在嚴重過敏者。⑥入組前1周使用過其他類似藥物治療者。⑥未能配合完成隨訪者。

1.2 研究方法

所有納入HBV相關HCC患者呈仰臥位，消毒鋪巾后，對股動脈穿刺點注入鹽酸利多卡因注射液（四川國瑞藥業有限責任公司，國藥準字H20055048，規格：10ml∶0.2g）3mg/kg進行局部麻醉，先行股動脈穿刺，置入導管于腹腔干造影見：脾動脈及肝總動脈顯影，肝右葉的腫瘤造影劑濃染。將導管引至肝總動脈近端，置入微導管及微導絲，將微導管引至右肝動脈的腫瘤供血動脈內，造影證實。緩慢注射化療藥物奧沙利鉑注射液［齊魯制藥（海南）有限公司，國藥準字H20203218，規格：40ml∶0.2g］100mg/m2，再次造影見：供血動脈栓塞良好，未見該動脈供應腫瘤。再將導管超選至供應瘤體的肝動脈分支，用碘化油注射液（煙臺魯銀藥業有限公司，國藥準字H37022398，規格：10ml）10～20ml加化療藥物行TACE術化療，直至所有供血動脈栓塞完畢。于右肝動脈最后造影：未見腫瘤染色。手術結束，拔除導管，腹股溝加壓包扎。每次介入治療間隔3～4周，連續進行2次介入治療。觀察組同時靜脈滴注復方苦參注射液（山西振東制藥股份有限公司，國藥準字Z14021231，規格：每支裝5ml）20ml/次，用氯化鈉注射液（辰欣藥業股份有限公司，國藥準字H20056758，規格：50ml∶0.45g）200ml稀釋后使用，qd。在介入術前2～3天起，持續給藥復方苦參注射液10天（全身用藥總量200ml為1個療程），所有患者持續2個療程。

1.3 觀察指標

1.3.1 臨床療效

治療2個療程后，所有入組HBV相關HCC患者參照實體瘤免疫相關療效評價標準（immune response evaluation criteria in solid tumors，iRECIST）［10］進行臨床療效評價：①完全緩解（complete response，CR）：非淋巴結病變完全消融，淋巴結短軸＜10mm，無新病灶。②部分緩解（partial response，PR）：腫瘤負荷減少≥30%。③疾病進展（progressive disease，PD）：存在新的可測量/不可測量病變，或相對于最低點，腫瘤負荷增加≥20%。④疾病穩定（stable disease，SD）：不符合CR/PR/PD標準者。客觀緩解率（objective response rate，ORR，%）=（CR+PR）例數/每組總例數×100%；疾病控制率（disease control rate，DCR，%）=（CR+PR+SD）例數/每組總例數×100%。

1.3.2 Child-Pugh肝功能分級

將患者5個指標（一般狀況、腹水、血清膽紅素、血清白蛋白濃度及凝血酶原時間）分別記1分、2分和3分，并將5個指標計分進行相加，總和5～15分。參照《內科疾病診斷標準》（第2版）［11］中相關標準評價患者Child-Pugh肝功能分級：5～6分為A級，7～9分為B級，≥10分為C級；分值越高，表示患者的肝功能越差。

1.3.3 肝癌標志物

分別于入院后第1天及治療2個療程后第1天采集兩組HBV相關HCC患者空腹靜脈血4ml，均分為2份，1份使用7060型全自動生化分析儀［日立（中國）有限公司］檢測α-L-巖藻糖苷酶（α-L-fucosidase，AFU）水平；1份使用Avanti JXN-26型高速冷凍離心機（貝克曼庫爾特有限公司，r=10cm），以3000r/min于4℃離心10min后，取血清。采用化學免疫法測定兩組患者血清甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）水平，試劑盒購自武漢華美生物工程有限公司。

1.3.4 免疫功能指標

分別于入院第1天及治療2個療程后第1天兩組HBV相關HCC患者空腹靜脈血2ml，使用FACSCantoⅡ分析型流式細胞儀（美國BD公司）檢測患者外周血T細胞亞群CD3+細胞、CD4+細胞、CD8+細胞水平，并計算CD4+/CD8+比值。

1.3.5 不良反應發生情況

觀察并記錄兩組HBV相關HCC患者介入治療后不良反應（發熱、頭痛、惡心、嘔吐、白細胞下降等）的發生情況。

1.4 統計學方法

應用SPSS 22.0軟件進行數據的統計分析。計量資料以±s表示，行t檢驗；計數資料以n（%）表示，行χ2檢驗；等級資料行秩和檢驗。P＜0.05為具有統計學差異。

2 結果

2.1 臨床療效

治療2個療程后，兩組患者ORR比較無統計學差異（P＞0.05）；觀察組患者DCR（86.79%）高于對照組（69.81%，P＜0.05）（表1）。

表1 兩組臨床療效比較 n=53，n（%）

2.2 Child-Pugh肝功能分級

治療前，兩組Child-Pugh肝功能A級、B級比例比較無統計學差異（P＞0.05）；治療后，觀察組Child-Pugh肝功能分級優于對照組（P＜0.05）（表2）。

表2 兩組Child-Pugh肝功能分級比較 n=53，n（%）

2.3 肝癌標志物

治療前，兩組AFU、AFP水平比較均無統計學差異（P＞0.05）；治療后，兩組AFU、AFP均降低（P＜0.05），且觀察組低于對照組（P＜0.05）（表3）。

表3 兩組肝癌標志物比較 n=53，±s

表3 兩組肝癌標志物比較 n=53，±s

AFU：α-L-巖藻糖苷酶；AFP：甲胎蛋白；與同組治療前比較，a：P＜0.05。下同

AFU（U/L） AFP（μg/L）治療前 治療后 治療前 治療后對照組 53.83±6.73 27.14±3.39a 410.45±50.18 220.47±40.06a觀察組 54.41±6.80 21.16±2.65a 420.17±50.15 170.46±30.18a t值 0.441 10.118 0.997 7.259 P值 0.660 ＜0.001 0.321 ＜0.001組別

2.4 免疫功能指標

治療前，兩組T細胞免疫功能指標比較均無統計學差異（P＞0.05）；治療后，兩組CD3+、CD4+水平及CD4+/CD8+比值均降低（P＜0.05），CD8+水平升高（P＜0.05）。但觀察組CD3+、CD4+水平及CD4+/CD8+比值高于對照組（P＜0.05），CD8+水平低于對照組（P＜0.05）（表4）。

表4 兩組T細胞免疫功能比較 n=53，±s

表4 兩組T細胞免疫功能比較 n=53，±s

CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后對照組 59.22±9.22組別51.46±1.46a 38.66±4.58 30.02±0.02a 30.31±0.31 38.58±4.07a 1.26±0.16 0.78±0.18a觀察組 58.38±8.38 0.97±0.23a t值 0.588 2.391 0.874 3.698 0.232 5.265 0.312 4.736 P值 0.558 0.019 0.384 ＜0.001 0.817 ＜0.001 0.756 ＜0.001 55.23±5.23a 37.89±4.49 33.15±3.15a 30.12±0.12 34.24±4.41a 1.27±0.17

2.5 不良反應發生情況

對照組患者介入治療術后出現發熱、頭痛、惡心及嘔吐各2例，白細胞下降6例；觀察組患者介入治療術后出現發熱、惡心及嘔吐各2例。觀察組不良反應發生率（11.32%）低于對照組（26.42%，χ2=3.944，P=0.047）。

3 討論

全球范圍內，肝癌的發病率呈持續上升趨勢，其在惡性腫瘤死亡風險排名中居前5位。HBV感染是全球性的公共衛生問題，全球有超過2.5億的HBV感染者，20%以上的HCC患者發病原因都與HBV相關［12］。由于HCC發病隱匿，病情進展較快，往往確診時已發展至中晚期，多數患者已無法耐受手術治療，只能選擇化療方式延長生存時間。TACE屬于一種微創介入化療手段，在臨床上不僅可用于治療肝臟出血，也可用于治療HCC。既往研究［13］報道，TACE治療HCC具有較好的近期療效。但同時也有研究［14］報道，TACE治療后，多數患者出現發熱、肝區疼痛等栓塞后綜合征問題，不利于患者預后。近年來，中西醫結合在中晚期惡性腫瘤的臨床研究取得了一定的成果，并在延緩疾病進展、減輕化療不良反應等方面具有顯著效果［15］。復方苦參注射液是臨床常用的抗腫瘤類中藥注射劑，主要成份為苦參和白土苓。苦參性寒、味苦，具有清熱燥濕的功效；白土苓性平，味甘、淡，具有解毒、除濕、通利關節的功效。研究表明，復方苦參注射液對乙型肝炎和肝癌具有一定的治療作用［16-17］。本研究結果發現，觀察組患者DCR（86.79%）高于對照組（69.81%，P＜0.05），提示復方苦參注射液聯合TACE輔助治療HBV相關HCC，可有效提高患者的化療效果。

既往研究［18］報道，TACE可能會造成肝損傷。本研究結果發現，經治療后，觀察組Child-Pugh肝功能分級優于對照組（P＜0.05），提示復方苦參注射液聯合TACE輔助治療HBV相關HCC，可緩解TACE造成的肝損傷，對肝臟具有一定的保護作用。分析其原因可能為苦參的主要藥理成份苦參堿具有降酶護肝、抗肝纖維化等藥理作用［19］。

由于肝癌患者外周血AFU水平明顯升高，因此其被認為是肝癌的腫瘤標記物［20］。AFP是一種糖蛋白，肝癌細胞可大量分泌AFP，因此也被認為是肝癌的腫瘤標記物［21］。本研究結果發現，經治療后，觀察組AFU、AFP水平低于對照組（P＜0.05），提示復方苦參注射液可與化療藥物產生協同作用，更好地控制腫瘤患者的病情進展，但其可能的作用機制尚未明確，后期仍需進行深入研究以進一步分析其作用機制。

肝癌患者體內T細胞免疫功能被抑制，從而使患者發生免疫功能障礙［22］。CD3+淋巴細胞代表全T淋巴細胞，其包括CD4+和CD8+；CD4+水平降低表明機體免疫功能低下，CD8+水平升高表明機體免疫功能低下。既往研究［23］報道，復方苦參注射液輔助治療，可有效改善晚期腫瘤患者的免疫功能。本研究中，經治療后，兩組CD3+、CD4+水平及CD4+/CD8+比值均降低（P＜0.05），CD8+水平升高（P＜0.05），但觀察組CD3+、CD4+水平及CD4+/CD8+比值高于對照組（P＜0.05），CD8+水平低于對照組（P＜0.05）。此外，本研究結果顯示，觀察組不良反應發生率（11.32%）低于對照組（26.42%，χ2=3.944，P=0.047）。以上結果提示復方苦參注射液聯合TACE輔助治療HBV相關HCC，可有效緩解化療導致的免疫功能損傷，減少不良反應的發生風險，分析可能與復方苦參注射液的主要藥理成份可提高機體免疫力有關［24-25］。

綜上所述，復方苦參注射液輔助TACE治療HBV相關HCC，可提高患者化療效果，調節患者T細胞免疫功能，降低不良反應的發生率。然而，本研究仍存在一定的局限性，如納入樣本量較少，且為單中心研究，可能會存在一定的數據偏倚，后期仍需進一步采用多中心、大樣本試驗進行深入探究。