覆盆子及其易混品桉葉懸鉤子的鑒別

鄧雯姬，楊潔瑜（廣州市藥品檢驗所，廣州 510160）

覆盆子（RubuschingiiHu）始載于《神農本草經》，原藥材為薔薇科的華東覆盆子，以其果實入藥，主要分布在江西、浙江、安徽等地，是益腎固精常用的中藥材[1-2]。覆盆子主要成分為黃酮類、甾類和萜類，這類物質臨床藥理作用多為抗菌、抗炎、抗癌、抗氧化[3-5]。此外覆盆子還含有酚酸活性成分[6]，中醫理論記載性味酸能縮、能澀，固臨床上治療漏尿遺尿、陽痿遺精效果顯著[7]。由于用藥范圍廣，市場需求量大，其采收和臨床應用常出現易混品混淆誤用的情況。目前已有很多研究對覆盆子的易混品進行鑒別，如綿果懸鉤子[8]、山莓[9]、樹莓[10]、毛栓莓[11]等。但未有對其易混品桉葉懸鉤子相關的研究。桉葉懸鉤子RubuseucalyptusFocke，藥材名為軟覆盆子，來源于薔薇科植物的干燥果實，主要分布陜西、甘肅、四川等地。現收載于四川省中藥材標準（2010年版），但該標準僅對軟覆盆子的整體性狀及粉末顯微特征進行鑒別，且以文字形式記載。

本文運用體式顯微鏡比較覆盆子及軟覆盆子的外觀形態和內在結構的區別，并采用光學顯微鏡觀察兩者橫切面和粉末的顯微特征，從宏觀到微觀對兩者開展比較研究，為兩藥的鑒別提供參考依據。

1 材料

1.1 儀器

富士S8100 數碼相機（日本富士公司）；奧林巴斯BX53型顯微鏡和奧林巴斯SZ61型體式顯微鏡（日本奧林巴斯株式會社）。

1.2 藥材

收集了不同產地的樣品，經鑒定分別為薔薇科植物華東覆盆子RubuschingiiHu的干燥果實和薔薇科植物桉葉懸鉤子RubuseucalyptusFocke的干燥果實，具體信息見表1。

表1 樣品信息Tab 1 Information of samples

2 方法

2.1 性狀鑒別

2.1.1 藥材表面性狀 藥材除去雜質后，選取不同規格大小置于附有標尺的拍攝臺上，日光下觀察其自然形態，并用數碼相機記錄外觀特征。

2.1.2 聚合果表面特征 選取中等大小具有代表性的藥材置于在載物臺上，應用體式顯微鏡觀察藥材不同面（正面、底面、頂面、橫切面）的性質特征，并用數碼成像系統記錄影像數據。

2.1.3 小核果表面特征 摘取中等大小具有代表性的小核果，應用體式顯微鏡觀察藥材不同面（正面、外側面、內側面、橫切面）的性質特征，并用數碼成像系統記錄影像數據。

2.2 顯微鑒別

2.2.1 橫切面鑒別 藥材泡水軟化后，用吸水紙擦掉附在藥材表面的水分，將藥材固定于切割板上，用刀片進行切制。切制后的薄片放置載玻片上，用滴管滴加少量水合氯醛，稍放置，置于加熱板上透化，該步驟重復1～2次，冷卻至室溫后用稀甘油封片，置于奧林巴斯BX53型顯微鏡下觀察并用數碼成像系統記錄特征。

2.2.2 粉末鑒別 取粉碎后的藥材過五號篩，蘸取細粉于載玻片上均勻展開，按“2.2.1”項下透化步驟操作，冷卻后蓋上蓋玻片，置于奧林巴斯BX53型顯微鏡下觀察并用數碼成像系統記錄特征。

3 結果

3.1 性狀特征

3.1.1 聚合果特征 覆盆子整體為黃綠或淡棕色，表面密被灰白色茸毛，由眾多半月形的小核果聚合而成，聚合果手摸有茸毛感，呈類圓錐形，高0.6～1.3 cm，直徑0.6～1.1 cm。質輕較硬。氣味偏酸、澀。體式顯微鏡下，正面觀察覆盆子聚合果，呈類圓形或類三角形；底面觀中心凹入，殘存萼片，宿萼短于聚合果，下有果梗痕；頂面觀呈類圓形。橫切面類圓形，中部花托類圓形，其四周圍繞眾多小核果。詳見圖1A。

圖1 樣品性狀特征圖Fig 1 Characteristics of samples

桉葉懸鉤子與覆盆子相似，大小規格相等，為灰綠色或灰褐色類圓錐形的聚合果，表面密被灰白色茸毛，有棕褐色花絲附著表面，高0.5～1.3 cm，直徑0.4～1.5 cm。質輕較硬，手摸茸毛感，氣味酸澀。體式顯微鏡下正面觀多呈類圓三角形；底面觀中心深凹成孔，無萼片；頂面觀呈類圓形。橫切面類圓形，密被茸毛，花托中空，四周圍繞眾多小核果。詳見圖1B。

3.1.2 小核果特征 覆盆子小核果為黃棕色，高2.0～2.5 mm，直徑0.7～1.3 mm，表面有明顯的橫紋。正面觀為半月形，整體網格狀紋凹陷明顯，具絲絹光澤，頂端鈍圓密被茸毛，底部略尖較光滑。外側面中央隆起有一棱線向兩端彎曲，棱線上附著茸毛。內側面光滑，幾乎無茸毛。橫切類橢圓形兩端略尖，種子一枚，位于中心。種子半透明類橢圓形，約占小核果的三分之二。詳見圖2A。

圖2 小核果特征圖Fig 2 Characteristics of Fructus

桉葉懸鉤子為灰綠色，表面密被眾多灰白色長茸毛，附著棕色花絲，高2.0～2.7 mm，直徑0.9～1.5 mm，無橫紋。正面觀為半月形，網格狀紋凹陷，全身密被茸毛。外側面中央隆起有一棱線向兩端彎曲，密被茸毛。內側面茸毛眾多。斷面類橢圓形兩端略尖，種子一枚，位于中心。種子較小，半透明扁橢圓形。詳見圖2B。

3.2 顯微特征

3.2.1 橫切面顯微特征 覆盆子外果皮表皮細胞呈類方形，外被角質層，單列切向延長，外緣波狀彎曲。表皮細胞向外突起形成非腺毛。中果皮細胞數列，外側細胞略切向延長，常見草酸鈣簇晶。維管束外韌型，位于內果皮脊狀突起的外側，四周有纖維及網紋細胞圍繞[12]。內果皮壁厚木化，為20余列纖維脊狀突起，內外纖維層交錯排列。種皮表皮細胞黃棕色，單列呈類方形。子葉細胞中含糊粉粒、草酸鈣簇晶及脂肪油滴。胚乳細胞含大量脂肪油滴及糊粉粒（見圖3）。

圖3 樣品橫切圖Fig 3 Cross-cutting characteristics of samples

桉葉懸鉤子外果皮表皮細胞呈類方形，單列切向延長，外被角質層。向外突起的非腺毛長而彎曲。中果皮細胞數列，常見草酸鈣簇晶。維管束外韌型，位于內果皮脊狀突起的外側，四周有纖維，網紋細胞偶見。內果皮壁厚木化，為20余列纖維脊狀突起，內外纖維層交錯排列。種皮表皮細胞黃棕色，單列呈類方形。子葉細胞中含糊粉粒、草酸鈣簇晶及脂肪油滴。胚乳細胞含大量脂肪油滴及糊粉粒（見圖3）。

3.2.2 粉末顯微特征 覆盆子粉末呈棕黃色。非腺毛長60～450 μm，多為單細胞，壁厚木化，長60～450 μm，表面具雙螺紋，常見非腺毛脫落，基部表面觀似石細胞呈類圓形，殘留于表皮層，直徑約25 μm。草酸鈣簇晶棱角明顯，單個散落或存在中果皮細胞中，直徑18～50 μm。網紋細胞直徑5～26 μm，表面觀長梭形或橢圓形。果皮纖維無色或黃色，縱橫交錯或斜向排列成片存在。種皮表皮細胞無色或淡黃色，類多角形壁薄細波狀彎曲，多成片存在，有的胞腔可見淺棕色顆粒狀物。子葉細胞無色或黃色，富含脂肪油滴和糊粉粒，并可見細小簇晶（見圖4）。

桉葉懸鉤子粉末灰綠色。非腺毛壁厚木化，胞腔線形或不明顯，表面無螺紋。其大多碎斷，長60～1000 μm，平直或彎曲，常脫落殘留形如石細胞狀的基部埋于表皮層。草酸鈣簇晶棱角明顯，單個散落或存在中果皮細胞中，直徑15～50 μm。網紋細胞直徑5～20 μm，表面觀長梭形或橢圓形。果皮纖維無色或黃色，縱橫交錯或斜向排列成片存在。種皮表皮細胞無色或淡黃色，類多角形壁薄細波狀彎曲，多成片存在，有的胞腔可見淺棕色顆粒狀物。子葉細胞無色或黃色，富含脂肪油滴和糊粉粒，并可見眾多細小簇晶散在?；ǚ哿｜S棕色，類圓形，壁微厚內含顆粒狀物（見圖4）。

4 討論

覆盆子為常用的補益中藥，標準收載于《中國藥典》，其易混品較多。相關文獻主要在鑒別綿果懸鉤子、山莓、樹莓等，目前暫無文獻研究其易混品桉葉懸鉤子。桉葉懸鉤子現收載于四川省中藥材標準（2010年版），但該標準僅為文字描述，且無桉葉懸鉤子顯微橫切面鑒別。本文補充了桉葉懸鉤子顯微橫切面的研究，并提供了豐富的外觀形狀、內在結構、粉末特征等彩圖。

通過研究比較發現，兩者性狀鑒別要點為：覆盆子聚合果基面觀中心微凹入，殘存萼片，宿萼短于聚合果，下有果梗痕，斷面實心；小核果表面有橫紋，頂端密被茸毛，底部較光滑無毛。而桉葉懸鉤子基面觀中心深凹成孔，無萼片，斷面中空；小核果表面無橫紋，全身密被茸毛。橫切顯微特征，覆盆子外韌型維管束四周圍繞網紋細胞；而桉葉懸鉤子外韌型維管束偶見網紋細胞。粉末顯微特征，覆盆子非腺毛較短且平直，表面有螺紋；桉葉懸鉤子非腺毛長而彎曲，無螺紋。桉葉懸鉤子顯微粉末特征雖含花粉粒，但《本草綱目》[13]記載“覆盆以四五月熟”，現代相關研究[14]也指出覆盆子的最佳采收期為4～5月，而4～5月正為桉葉懸鉤子的花期，故花粉粒不能作為區別兩者的要點。兩者差異區別要點見表2。

表2 覆盆子和桉葉懸鉤子鑒別要點Tab 2 Characteristics identification of Rubus chingii Hu and Rubus eucalyptus Focke

本文通過研究覆盆子及與其易混淆品桉葉懸鉤子的生藥學特征，比較兩者外觀性狀、內在構造和顯微特征的區別點，研究結果為桉葉懸鉤子的鑒別提供了依據，有利于提高軟覆盆子的質量標準，也為鑒別覆盆子及與其易混淆品桉葉懸鉤子提供依據。此外，本文運用體式顯微鏡和光學顯微鏡，達到了圖像化描述的效果。通過數字圖像化能更好地了解藥材外觀形狀及內在結構，對智能識別藥材有重要意義。