血清中期因子、脂氧素A4、CXC趨化因子配體16聯合應用對過敏性紫癜患兒腎損害的預測價值

徐蘇娟,張繼明

1.陜西省咸陽彩虹醫院/咸陽市兒童醫院兒科,陜西咸陽 712021;2.西安啟迪兒童醫院檢驗科,陜西西安 710077

過敏性紫癜(HSP)是兒童時期常見的一種以小血管炎為主要病理性改變的全身綜合征,HSP小血管炎可累及皮膚、關節、腎臟和消化道等多個部位,盡管大多合并腎損害的HSP患兒病程呈自限性特征,但仍有部分HSP患兒可發展為慢性腎功能不全甚至腎衰竭,嚴重影響患兒預后[1]。腎活檢是評估腎臟損害的“金標準”,但其作為一種有創操作,存在取樣困難和患兒受到的痛苦大等缺點,因此有必要尋找侵襲性較小的實驗室指標。有研究表明,炎癥反應參與HSP腎損害發生發展[2]。中期因子(MK)是一種肝素結合生長因子,能通過調控免疫細胞促進炎癥反應[3]。脂氧素A4(LXA4)是一種內源性脂質介質,能結合多種細胞表面受體抑制炎癥反應[4]。CXC趨化因子配體16(CXCL16)是一種趨化因子,能通過激活炎癥細胞通路促進炎癥反應[5]。本研究旨在分析HSP患兒血清MK、LXA4、CXCL16水平變化,探討其對HSP患兒腎損害的預測價值,以期為HSP患兒腎損害防治提供參考依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月至2021年12月咸陽彩虹醫院(以下簡稱本院)收治的117例HSP患兒為HSP組,其中男66例,女51例;年齡1～14歲,平均(5.86±1.32)歲;體質量6.72～62.58 kg,平均(16.02±2.64)kg。納入標準:(1)HSP符合《兒童過敏性紫癜循證診治建議》[6]中的相關診斷標準,存在可觸性皮疹并伴有以下4條中的任意一條,①彌漫性腹痛,②任何部位活檢提示免疫球蛋白A1沉積,③關節炎/關節痛,④腎臟受損(血尿和/或蛋白尿);(2)年齡≤14歲;(3)首次發病和診治。排除標準:(1)合并川崎病、狼瘡血管炎等其他血管炎癥疾病;(2)合并血液系統疾病、免疫系統缺陷;(3)既往有腎功能損害;(4)合并嚴重內分泌疾病和其他重要臟器功能損害;(5)臨床資料不全或不能接受隨訪。另選取本院同期59例健康體檢志愿兒童為對照組,其中男33例,女26例;年齡1～14歲,平均(5.79±1.38)歲;體質量8.57～63.44 kg,平均(16.13.08±2.67)kg。兩組研究對象性別、年齡、體質量比較,差異均無統計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究患兒家屬知情并簽署知情同意書。本研究經本院醫學倫理委員會批準。

1.2方法

1.2.1資料收集 收集HSP患兒臨床資料,包括性別、年齡、體質量、確診時間(癥狀出現到醫院確診時間)、關節痛/關節炎及消化道出血、EB病毒(EBV)感染、呼吸道感染等情況。

1.2.2血清MK、LXA4、CXCL16水平檢測 收集所有研究對象入院次日空腹靜脈血3 mL(當天檢測),1 500 r/min離心10 min后取上層血清,采用酶聯免疫吸附試驗(武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司試劑盒,貨號:E-EL-H2297c、E-EL-0053c、E-EL-H6009)檢測血清MK、LXA4、CXCL16水平。

1.3腎損害診斷和分組 HSP患兒入院后參考《兒童過敏性紫癜循證診治建議》[6]接受治療:包括控制飲食、抗感染、皮疹治療、關節癥狀治療、胃腸道癥狀治療和糖皮質激素治療等。治療后通過門診復查隨訪6個月,統計腎損害發生情況。腎損害診斷標準[7]包括(1)血尿:肉眼血尿或1周內2次鏡下血尿(紅細胞≥3個/高倍視野);(2)蛋白尿:①1周內3次微量清蛋白高于正常值,②24 h尿蛋白定量>150 mg或尿蛋白/肌酐>0.2 mg/mg,③1周內3次尿常規尿蛋白陽性。符合血尿和/或蛋白尿的任意一項即診斷為腎損害。根據是否發生腎損害分為腎損害組和無腎損害組。

2 結 果

2.1HSP組與對照組血清MK、LXA4、CXCL16水平比較 HSP組血清MK、LXA4、CXCL16水平均高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 HSP組與對照組血清MK、LXA4、CXCL16水平比較

2.2HSP患兒腎損害的單因素分析 隨訪6個月,117例HSP患兒中發生腎損害35例(腎損害組),腎損害發生率為29.91%(35/117),其余82例為無腎損害組。腎損害組確診時間≥7 d、呼吸道感染患兒比例和血清MK、LXA4、CXCL16水平均高于無腎損害組(P<0.05)。但兩組性別、年齡、體質量及關節痛/關節炎、消化道出血、EBV感染患兒比例比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 HSP患兒腎損害的單因素分析[n(%)或或M(P25,P75)]

2.3HSP患兒腎損害的多因素Logistic回歸分析 以確診時間(≥7 d=1,<7 d=0)、呼吸道感染(有=1,無=0)、MK(連續變量,原值輸入)、LXA4(連續變量,原值輸入)、CXCL16(連續變量,原值輸入)為自變量,是否發生腎損害(是=1,否=0)為因變量進行多因素Logistic回歸分析。結果顯示,確診時間≥7 d、呼吸道感染和血清MK、LXA4、CXCL16水平升高均為HSP患兒腎損害的獨立危險因素(P<0.05)。見表3。

表3 HSP患兒腎損害的多因素Logistic回歸分析

2.4血清MK、LXA4、CXCL16水平對HSP患兒腎損害的預測價值 ROC曲線分析結果顯示,血清MK、LXA4、CXCL16水平聯合預測HSP患兒腎損害的曲線下面積(AUC)大于MK、LXA4、CXCL16單獨預測(Z=3.289、3.298、3.095,P<0.05)。見表4和圖1。

圖1 血清MK、LXA4、CXCL16水平預測HSP患兒腎損害的ROC曲線

表4 血清MK、LXA4、CXCL16水平對HSP患兒腎損害的預測價值

3 討 論

HSP是一種系統性小血管炎,主要因遺傳、免疫紊亂、感染等因素導致免疫球蛋白A1沉積小血管壁引起自身炎癥反應和組織損傷所致,其炎癥累及腎臟可導致腎臟損害[8]。本研究中,117例HSP患兒腎損害發生率為29.91%,與國內相關研究報道的15.0%～40.0%結果相符[9-10],說明HSP患兒腎損害發生率較高,及時預測腎損害發生情況對改善患兒預后具有重要意義。

炎癥反應是HSP腎損害發生、發展的重要機制之一,免疫球蛋白A1沉積所引起的自身炎癥反應能進一步損害腎細胞,導致腎臟功能損害[11]。MK是一種趨化因子,能通過直接作用或誘導B淋巴細胞增殖、T淋巴細胞活化、白細胞募集等促進局部炎癥細胞浸潤,參與炎癥反應發生、發展[12]。MK在腎臟中主要表達于近端腎小管上皮細胞,當出現炎癥和缺氧時能激活MK啟動子促進MK表達[13]。有研究報道,敲除小鼠MK表達能減少白細胞等炎癥細胞浸潤,改善腎缺血再灌注小鼠腎臟功能,同時MK能通過引起Th1/Th2失衡導致腎臟損害和纖維化[14-15]。本研究結果顯示,MK水平升高是HSP患兒腎損害的獨立危險因素,說明MK參與HSP患兒腎損害發生,分析原因是HSP患兒血管炎癥激活MK啟動子導致MK水平升高,而血清MK水平升高能促進T淋巴細胞活化,引起腎小球炎癥和損傷,導致腎損害發生[16]。

LXA4是脂氧素家族重要成員,可結合細胞表面的LXA4受體使自身活化,具有廣泛的舒張血管、拮抗炎癥反應和促進炎癥消退的作用[17]。金波等[18]研究顯示,LXA4能抑制腎小管細胞凋亡,減少急性腎損害。GUO等[19]研究顯示,上調LXA4能通過抑制炎癥信號通路抑制腎臟炎癥和損傷。本研究結果顯示,血清LXA4水平升高,這與LXA4具有抗炎作用機制的結果不符,考慮與LXA4表達上調具有內源性保護作用有關。有研究報道,LXA4水平在腎損傷模型中升高[18]。本研究結果顯示,血清LXA4水平升高是HSP患兒腎損害的獨立危險因素,分析原因是血清LXA4水平越高反映HSP患兒炎癥反應越嚴重,間接反映腎小球炎癥反應和損傷加重[20]。

趨化因子是一類具有誘導附近反應細胞定向趨化能力的小細胞因子,其分布和表達異常可導致人體細胞免疫功能紊亂,激活和促進炎癥反應[21]。CXCL16是一種新型趨化因子,當炎癥存在時能直接刺激趨化因子信號使CXCL16大量表達,并與炎癥細胞和趨化細胞相互作用,促進炎癥反應發展[21]。遲磊等[22]研究顯示,抑制CXCL16能阻斷下游核轉錄因子κB信號通路活化,抑制腎細胞炎癥反應和凋亡。CHEN等[23]研究顯示,抑制CXCL16表達水平可阻斷細胞外調節蛋白激酶1/2信號通路,進而抑制腎足細胞增殖、遷移和凋亡。本研究結果顯示,血清CXCL16水平升高是HSP患兒腎損害的獨立危險因素,說明CXCL16參與HSP患兒腎損害發生,分析原因是HSP患兒血管炎癥激活使CXCL16大量釋放,隨著血清CXCL16水平升高能促進多條信號通路活化,加重腎細胞炎癥反應,導致腎損害風險增加[24]。

本研究結果還顯示,確診時間≥7 d和呼吸道感染也是HSP患兒腎損害的獨立危險因素,分析原因是確診時間越長,反映HSP患兒受到的血管炎癥損害越長,因此腎損害風險越高;呼吸道感染則會進一步破壞HSP患兒免疫系統,使免疫復合物大量聚集于腎臟,導致腎損害風險增加[25]。本研究中消化道出血并非HSP患兒腎損害的影響因素,這與李艷等[10]報道結果相反,分析原因可能與納入研究對象個體差異或樣本量存在差異有關。最后本研究通過繪制ROC曲線分析發現,血清MK、LXA4、CXCL16水平分別為0.31、0.89、2.99 ng/mL時,預測HSP患兒腎損害的AUC分別為0.786、0.781、0.783,提示血清MK、LXA4、CXCL16或可成為HSP患兒腎損害的輔助預測指標,且上述3項指標聯合預測HSP患兒腎損害的AUC顯著增加至0.926,說明聯合檢測血清MK、LXA4、CXCL16水平能提升HSP患兒腎損害的預測價值。

綜上所述,HSP患兒血清MK、LXA4、CXCL16水平升高,是腎損害發生的獨立危險因素,可能成為HSP患兒腎損害的輔助預測指標,且三者聯合預測的價值更高。但本研究年齡范圍略窄,關于MK、LXA4、CXCL16與成人HSP的關系還需進一步研究,同時本研究結果也需前瞻性多中心研究驗證。