IgG抗-G聯合抗-D、抗-C混合抗體引起Rh(-)患者交叉配血不合1例

黃中海

安徽省蚌埠市第二人民醫(yī)院輸血科,安徽蚌埠 233000

Rh血型系統是非常復雜、最具多態(tài)性的一個血液系統,重要性僅次于ABO血型系統,其中與臨床密切相關的抗原主要有5個:RhD、RhC、RhE、Rhc和Rhe,這5種抗原均有較強的免疫抗原性,能夠刺激機體產生意外抗體,其中RhD抗原性最強,抗-D抗體是引起溶血性輸血反應和新生兒溶血病的重要影響因素[1-3]。2000年版《臨床輸血技術規(guī)范》僅要求對Rh血型系統的RhD抗原進行常規(guī)檢測,對RhC、RhE、Rhc、Rhe抗原未做要求,臨床采用隨機配血原則,導致抗-C、抗-c、抗-E、抗-e等抗體產生的報道不斷增多,常引起交叉配血不合、輸血不良反應及新生兒溶血病[4],筆者在近期工作中發(fā)現了1例由免疫球蛋白G(IgG)抗-G聯合抗-D、抗-C混合抗體引起Rh(-)患者交叉配血不合,現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 患者,男,52歲,于2022年6月17日在本院診斷為“急性闌尾炎”,擬行手術治療,術前常規(guī)備血。患者一般情況良好,有過一次輸血史。輸血前檢查該患者為A型,RhD陰性,抗體篩查陽性。因本院無常規(guī)備RhD陰性血液,遂向當地中心血站申請,血站提供去白紅細胞懸液2袋,與患者交叉配血均不合,故對患者血清的抗體特異性及血站提供的2袋血液進行Rh血型分型鑒定。

1.2試劑與儀器 ABO血型鑒定卡(長春博訊生物技術有限公司,批號:20211205);ABO血型反定型紅細胞(上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司,批號:20225323);抗體篩選細胞(上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司,批號:20227019);抗球蛋白微柱凝膠抗體篩查卡(長春博訊生物技術有限公司,批號:20211204);抗球蛋白微柱凝膠交叉配血卡(長春博訊生物技術有限公司,批號:20210901);抗體鑒定細胞(長春博訊生物技術有限公司,批號:20220501);酸放散試劑盒(長春博訊生物技術有限公司,批號:20220201);Rh血型抗原檢測卡(長春博訊生物技術有限公司,批號:20211201)。OLABO恒溫數顯水浴鍋(山東博科生物科技有限公司,型號:HH-2),血型血清學專用離心機(長春博研科學儀器有限責任公司,型號:TD-3A),免疫微柱孵育器(長春博研科學儀器有限責任公司,型號FYQ)。

1.3方法 血型鑒定、抗體特異性鑒定及抗體效價測定采用微柱凝膠法卡式法,抗體篩查采用微柱凝膠法卡式法及鹽水法,抗-D、抗-C、抗-G的鑒定采用文獻[5]提供的思路進行兩步吸收放散試驗,按照說明書進行操作:第一步用4號壓積譜細胞(Dccee)同體積與患者血漿37 ℃孵育2 h,期間每隔20 min混勻一次,取孵育后上清液和4號譜細胞進行微柱凝膠法間接抗人球蛋白試驗(IAT),直到反應為陰性,此時如有抗-D、抗-G均已吸收完全,將吸收后的上清液與5號譜細胞(dCcee)進行IAT,反應有凝集,說明上清液有抗-C;再將吸收后的4號譜細胞進行放散,放散液與4號譜細胞和5號譜細胞進行IAT,結果均有凝集,說明放散下來的抗體不但和RhD抗原反應,也和RhC抗原反應,符合抗-G的特點。第二步用5號譜細胞吸收患者血漿,取孵育后上清液與5號譜細胞進行IAT,直到反應為陰性,此時如有抗-C、抗-G均已吸收完全,吸收后的上清液與4號譜細胞有凝集,說明上清液有抗-D;再將吸收后的5號譜細胞進行放散,放散液與4號譜細胞和5號譜細胞均有凝集,再次證明有抗-G。通過吸收放散試驗,可確定患者的意外抗體為抗-G、抗-D和抗-C的混合物。

2 結 果

2.1血型、抗體篩查及鑒定結果 患者血型為A型,Rh分型為dccee。血站提供的2份供血者血型為A型,Rh分型分為dCcee和dCCee。患者抗體篩查及鹽水法鑒定結果均為陰性,卡式法血型鑒定結果顯示患者可能有IgG抗-D、抗-C兩種抗體,無法確定是否有抗-G。

2.2抗-D、抗-C、抗-G的鑒定結果 采用兩步吸收放散的方法,確定患者的意外抗體為抗-G、抗-D和抗-C的混合物。

2.3抗-C、抗-D和抗-G效價測定 用5號譜細胞和第一步吸收后的上清液微柱凝膠卡式法測得抗-C效價為8;用4號譜細胞和第二步吸收后的上清液微柱凝膠卡式法測得抗-D效價為16;用5號譜細胞對第一步的放散液進行吸收后,放散下來即為抗-G,和11號譜細胞(DCCEE)微柱凝膠卡式法測得抗-G效價為4。

3 討 論

本例患者在輸血前抗體篩查卡式法鑒定結果為陽性,鹽水法鑒定結果為陰性,確定其抗體性質為IgG類。從抗體鑒定結果可以看到,凡是含有RhD或RhC抗原的譜細胞均有凝集,說明有抗-D和抗-C兩種抗體,但無法確定是否有抗-G。G抗原為Rh血型系統抗原,最初由ALLEN和TIPPET在1958年報道,RhD和RhCE的C等位基因外顯子2編碼的Ser103是G抗原的活性關鍵,通常RhD及RhC陽性紅細胞上都有G抗原存在[6],抗-G可與抗-D和(或)抗-C陽性的紅細胞反應,在臨床上易誤認為抗-D或抗-C,但不能被分離為抗-C和抗-D[7]。理論上抗-G可以用rG/dce或r″G/dce的紅細胞通過吸收放散法進行鑒定,但此類細胞極難獲得,因此常采用兩步吸收放散試驗來鑒定抗-G[8]。筆者通過兩步吸收放散試驗,確定患者血漿中意外抗體為Rh血型系統的抗-G、抗-D和抗-C的混合物。

Rh血型系統是ABO血型系統外最復雜和最具有臨床意義的血型系統,截至目前已增至56個抗原,Rh血型系統意外抗體導致的血型鑒定正反不符、交叉配血不合及新生兒ABO溶血病在臨床上占大多數[9],一般是通過胎母血型不合的多次妊娠、輸血、注射及器官移植等免疫刺激產生的IgG型抗體[10]。本研究患者30多年前在鄉(xiāng)下衛(wèi)生院輸過一次血,因此筆者推斷其血中的抗-G、抗-D和抗-C,可能是由那次輸血誘發(fā),紅細胞同種抗原暴露后是否產生同種抗體準確的機制仍不清楚。有研究認為與抗原密度的高低、人類HLA等位基因及多種免疫細胞的調節(jié)作用和受體的炎癥狀態(tài)、免疫耐受情況都有關系[11-14],有的人雖然多次輸過不相容的血液,但都未產生同種抗體,而有的人僅輸血一次便可誘發(fā)多種抗體[15]。目前為止,還沒有發(fā)現哪一種檢測項目能把這種易于免疫應答者篩選出來,本研究案例僅輸血一次就產生多種抗體,且時隔30多年仍維持抗-G、抗-D、抗-C效價分別為4、16和8,這樣的效價足以引起遲發(fā)型輸血反應。向東等[16]報道,引起免疫性溶血性輸血反應的抗體80%是效價≤4的弱抗體。本研究患者為中年患者,身體情況尚好,最后未輸血康復出院。

綜上所述,意外抗體是導致交叉配血不合的常見原因,輸血前抗體篩查是保證臨床輸血安全重要手段。