同型半胱氨酸聯合葉酸代謝相關酶基因在妊娠期高血壓疾病中的臨床價值*

黃國平,徐 梅,陳月華,王 軍,金 華,葉 強△

四川省自貢市婦幼保健院:1.檢驗科;2.產科,四川自貢 643000

妊娠期高血壓疾病(HDP)是孕產婦妊娠期發病率最高的并發癥之一,主要包括妊娠高血壓和先兆子癇,表現為高血壓、蛋白尿、水腫,并伴有嚴重肝腎功能損害、胎盤早剝和死產等,是孕產婦和胎兒死亡的主要原因[1]。研究表明先兆子癇和妊娠高血壓在全球的發病率分別為1.8%～4.4%和0.2%～9.2%[2],在我國HDP發病率為9.2%～10.1%[3]。研究發現妊娠并發癥可能是女性未來患心血管疾病最早的臨床標志之一,HDP患者晚年心血管疾病及慢性高血壓的發病率顯著高于健康孕婦[4-5],且HDP患者子女的基礎血壓和心血管疾病的長期發病率更高[6]。HDP對妊娠期女性和社會造成嚴重負擔,但HDP的發病機制尚不清楚。

同型半胱氨酸(Hcy)是蛋氨酸代謝的中間產物,正常情況下妊娠期女性的Hcy水平會逐漸下降至孕前的50.0%～60.0%,然后保持相對較低的水平直至分娩[7]。當Hcy代謝酶存在異常缺陷,如亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)C677T或蛋氨酸合成酶(MTR)A2756G發生突變,使Hcy代謝酶活性明顯下降將導致高Hcy血癥,有研究發現葉酸代謝MTHFR C677T和MTR A2756G多態性與血Hcy水平呈正相關[8],并且葉酸代謝基因多態性與不明原因復發性流產及孕婦先兆子癇相關[9-10]。MARUTA等[11]的研究表明妊娠早期Hcy>7.2 μmol/L與HDP的發生相關。但Hcy代謝酶異常突變與高Hcy血癥在HDP中是否扮演重要角色尚不清楚。本研究從葉酸代謝MTHFR和MTR基因多態性和Hcy水平的關系著手,分析二者在HDP中的臨床意義,旨在為該病的臨床診治提供參考依據。

1 資料和方法

1.1一般資料 將2021年11月至2022年8月在自貢市婦幼保健院(以下簡稱本院)建檔并定期產檢的65例HDP孕婦作為HDP組,平均年齡(28.2±4.7)歲,平均孕周(38.4±1.3)周,平均收縮壓(140.0±16.0)mm Hg,平均舒張壓(89.0±7.0)mm Hg。另選取同期在本院健康體檢的80例健康孕婦作為正常妊娠組,平均年齡(27.3±4.2)歲,平均孕周(38.1±1.4)周,平均收縮壓(128.0±14.0)mm Hg,平均舒張壓(81.0±5.0)mm Hg。納入標準:(1)妊娠期高血壓疾病診斷參照《妊娠期高血壓疾病診治指南(2015)》[12]中相關診斷標準;(2)臨床資料完整;(3)單胎、初產婦;(4)無精神疾病;(5)近期未服用激素類藥物。排除標準:(1)合并感染性疾病;(2)合并嚴重的臟器功能障礙;(3)合并原發性高血壓、糖尿病;(4)合并心臟病;(5)合并血液系統疾病、甲狀腺疾病、免疫系統疾病、過敏史。兩組研究對象年齡、孕周、收縮壓、舒張壓比較,差異均無統計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究經本院醫學倫理委員會審批。所有研究對象簽署知情同意書。

1.2方法 孕婦入院后采集空腹靜脈抗凝血,以3 500 r/min離心10 min,采用全自動生化分析儀(邁瑞CL-2000)檢測血清Hcy、肝功能、腎功能和血脂6項;采用奧丞生物的胎盤生長因子(PLGF)檢測試劑盒檢測PLGF水平;采用全自動凝血分析儀檢測(日本積水CP3000)檢測凝血功能水平;采用重慶鼎潤血栓彈力圖試驗(活化凝血)試劑(凝固法)檢測血栓彈力圖。取3 mL的24 h尿液,以3 500 r/min離心5 min,采用全自動生化分析儀檢測24 h尿總蛋白定量(24 h UP)水平;采用西安天隆微測序儀檢測葉酸代謝相關酶基因MTHFR 677C>T、MTHFR 1298A>C和MTRR 66A>G的多態性,并根據檢測基因位點功能、純合、雜合及出現頻率,將患者葉酸代謝障礙風險分為未發現風險、低度風險、中度風險、高度風險4個風險等級。

2 結 果

2.1對照組和HDP組血清Hcy、PLGF、腎功能、肝功能和血脂水平比較 與對照組比較,HDP組Hcy水平顯著升高,而PLGF、尿酸(UA)及堿性磷酸酶(ALP)水平顯著降低,差異均有統計學意義(P<0.05);而兩組肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)及天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)水平比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 對照組和HDP組血清Hcy、PLGF、腎功能、肝功能和血脂水平比較

2.2對照組和HDP組凝血功能和血栓彈力圖比較 與對照組比較,HDP組凝血酶時間(TT)顯著延長,血栓彈力圖中兩側曲線的最寬距離(MA)顯著增大,差異均有統計學意義(P<0.05);而兩組凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、D-二聚體(DD)水平及血栓彈力圖中的反應時間(R)、凝固時間(K)、α角度(Angle)比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 對照組和HDP組凝血功能和血栓彈力圖水平比較

2.3對照組和HDP組葉酸代謝障礙風險等級比較 HDP組孕婦葉酸代謝障礙風險(低度+中度+高度)比例(81.6%)顯著高于對照組(61.5%),未發現風險比例(18.4%)顯著低于對照組(38.5%),差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 對照組和HDP組葉酸代謝障礙風險等級[n(%)]

2.4對照組和HDP組葉酸代謝相關酶基因MTHFR的多態性比較 分析MTHFR677C>T基因型分布發現,對照組和HDP組攜帶C等位基因的頻率分別為74.4%和56.9%,攜帶T等位基因的頻率分別為25.6%和43.1%,兩組C、T等位基因頻率比較,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表4。分析MTHFR 1298A>C基因型分布差異發現,對照組和HDP組攜帶A等位基因的頻率分別為70.0%和80.0%,攜帶C等位基因的頻率分別為30.0%和20.0%,兩組攜帶A、C等位基因的頻率比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。見表5。

表4 對照組和HDP組葉酸代謝相關酶基因MTHFR677C>T位點基因型分布和等位基因頻率比較[n(%)]

表5 對照組和HDP組葉酸代謝相關酶基因MTHFR1298A>C位點基因型分布和等位基因頻率比較[n(%)]

2.5對照組和HDP組葉酸代謝相關酶基因MTRR多態性比較 分析MTHFR 1298A>C基因型分布發現,對照組和HDP組攜帶A等位基因的頻率分別為80.6%和77.7%,攜帶G等位基因的頻率分別為19.4%和22.3%,兩組攜帶A、G等位基因的頻率比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。見表6。

表6 對照組和HDP組葉酸代謝相關酶基因MTRR 66A>G位點基因型分布和等位基因頻率比較[n(%)]

2.6HDP孕婦葉酸代謝障礙未發現風險組和風險組間Hcy、PLGF、24 h UP和UA水平比較 根據是否發生葉酸代謝障礙,將HDP組孕婦分為葉酸代謝障礙未發現風險組(n=12)和風險組(n=53)。風險組的Hcy、24 h UP及UA水平顯著高于未發現風險組,而PLGF水平顯著低于未發現風險組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表7。

表7 HDP孕婦葉酸代謝障礙未發現風險組和風險組Hcy、PLGF、24 h UP和UA水平比較

2.7HDP組中Hcy與PLGF水平的相關性分析 Spearman相關性分析結果表明,HDP組中Hcy水平與PLGF水平呈顯著負相關(r=-0.543,P<0.05)。

3 討 論

HDP常伴有嚴重的并發癥,嚴重威脅母嬰的安全。本研究結果表明與對照組比較,HDP組ALP、UA水平顯著升高、TT延長,血栓彈力圖中兩側曲線的MA增大,說明HDP孕婦伴有肝功能和腎功能損害、凝血功能和血栓彈力圖異常。孕婦在妊娠期特別是孕晚期出現高凝狀態是機體為了避免產后大出血的自我保護機制,但HDP孕婦較普通孕婦出現更為極端的血液高凝狀態伴繼發性纖溶亢進,將會大大增加HDP孕婦出現血栓和出血的風險[13]。需要加大對HDP孕婦凝血和血栓彈力圖的監測,便于早期發現問題并及時進行干預。

Hcy是蛋氨酸代謝的中間產物,在人體內主要有2種代謝途徑:(1)在葉酸和維生素B12的輔助作用下重新合成蛋氨酸。(2)在維生素B6依賴酶支持下形成半胱氨酸[14]。當Hcy代謝酶異常缺陷如MTHFR或MTR突變時,Hcy代謝酶活性明顯下降將造成高Hcy血癥。有研究發現MTHFR C677T和MTR-A2756G多態性與孕婦先兆子癇相關[10]。本研究結果發現,HDP組MTHFR677C>T位點中攜帶T等位基因的頻率顯著高于對照組,而MTHFR1298A>C位點中攜帶C等位基因的頻率及MTRR66A>G位點中攜帶G等位基因的頻率與對照組比較,差異均無統計學意義(P>0.05),表明HDP患者葉酸代謝障礙風險的主要原因與MTHFR677C>T位點的突變有關,與胡勤等[15]的研究結果MTHFR 677C>T基因型與妊娠期高血壓的發生有關、其基因多態性增加了患妊娠期高血壓的風險、而MTHFR1298A>C和MTRR66A>G基因型與妊娠期高血壓的發生無關相符合。

有研究表明MTHFR 677C>T和MTR2756A>G多態性與血清Hcy水平正相關[8];MARUTA等[11]的研究表明妊娠早期Hcy水平>7.2 μmol/L與HDP的發生相關。PLGF是一種胎盤源性因子,具有調節并滋養內皮細胞的功能。對于疑似先兆子癇且孕周<35周的孕婦,篩查陽性(PLGF<100 pg/mL),對2周內發生的先兆子癇具有96.0%的靈敏度和98.0%的陰性預測值[16]。本研究結果中HDP組Hcy水平顯著高于對照組,而PLGF水平顯著低于對照組,且Hcy水平與PLGF水平呈顯著負相關,表明Hcy水平在HDP中升高,可通過檢測PLGF、Hcy水平對子癇患者進行盡早干預和處理,從而保護孕婦和胎兒的健康。

MTHFR677C>T基因多態性與中國漢族先兆子癇孕婦的腎功能受損相關,基因多態性是中國漢族先兆子癇孕婦腎功能受損的獨立危險因素[17]。本研究中HDP患者葉酸代謝障礙風險的原因主要與MTHFR677C>T位點的突變有關,且在HDP患者中,葉酸代謝障礙風險組患者的Hcy、24 h UP和UA水平較葉酸代謝未發現風險組患者更高,表明HDP葉酸代謝障礙風險的患者血清Hcy進一步升高,其腎功能受損情況更嚴重,與YUN等[17]的研究結論吻合。此外,Hcy可激活氧化應激反應損傷血管內皮細胞,導致高血壓和冠心病,是心血管疾病的獨立危險因素[18]。

綜上所述,在HDP中,MTHFR677C>T基因突變使葉酸代謝障礙從而導致高Hcy血癥,高水平血清Hcy可能通過激活氧化應激反應損傷胎盤血管內皮細胞并導致HDP的進展。未來應進一步研究其中的發病機制及Hcy與PLGF在HDP中的作用,為HDP的治療提供有價值的方向。