嘧霉胺和多菌靈對枇杷貯藏保鮮效果及殘留降解研究

◎ 李賢賓，付 巖，王全勝，吳銀良

（1.農業農村部農藥檢定所，北京 100025；2.寧波市農業科學研究院，浙江 寧波 315043）

枇杷是我國南方特色水果之一，果實滋味鮮美，營養豐富[1-2]。枇杷采后易衰老變質，且容易感染病害，限制了枇杷果實的貯藏期，從而造成經濟損失[3-4]。為延長果實的貯藏期，常用的保鮮方法有低溫冷藏法、氣調包裝法和化學試劑保鮮法等[5]。其中常使用多菌靈、苯菌靈等化學殺菌劑處理果實來防治采后炭疽病、灰霉病等，抑制腐爛病害發生，但使用化學殺菌劑容易帶來殘留問題，特別是不規范使用，使采后產品質量安全存在潛在風險[6-7]。目前，在梨[8]、柑橘[9-10]等貯藏過程中常用的多菌靈殘留情況有較多研究，但在枇杷上報道較少，本文針對枇杷貯藏過程中多菌靈和嘧霉胺的使用安全性及保鮮效果進行了比較研究。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

嘧霉胺（1 000 μg·mL-1）、多菌靈（純度99%）（德國Dr. Ehrenstorfer GmbH 公司）；氯化鈉（分析純，國藥集團）；乙腈（色譜純，德國默克）；有機濾膜（0.22 μm，北京迪馬）。

1.2 儀器與設備

超高效液相色譜- 串聯質譜儀（Waters Xevo TQ-S，美國Waters 公司）；Waters ACQUITY UPLC BEH C18柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm，美國Waters公司）；Vortex Genius 3 漩渦儀（德國IKA 公司）；3K15 離心機（德國Sigma 公司）；電子天平（瑞士Mettler Toledo 公司）。

1.3 實驗方法

1.3.1 實驗設計

依據農藥產品施藥說明及相關文獻報道，400 g·L-1嘧霉胺懸浮劑防治灰霉病推薦使用濃度為1 000 ～1 500 倍液，50%多菌靈可濕性粉劑用于枇杷采后病害防治推薦制劑用藥量為1 000 倍液。因此多菌靈和嘧霉胺2 種殺菌劑均設1 000 倍液處理，嘧霉胺另設1 500 倍液處理，每個處理重復3 次。將無腐爛的枇杷果實分成3 組，按照不同處理浸果1 min，晾干后裝入塑料筐，底部墊上無塵紙；實驗設2 個溫度組，低溫組（6±2）℃和常溫組（25±2）℃，濕度均設置為90%～95%，按照0 d、3 d、7 d、14 d、21 d 和28 d 取樣，測定枇杷全果和果肉中2 種殺菌劑的殘留量及保鮮效果。

1.3.2 樣品前處理

稱取全果/果肉樣品5 g（精確至0.01 g）置于塑料離心管中，加入15.0 mL 乙腈，350 r·min-1振蕩提取0.5 h 后，加入氯化鈉（5 g）振蕩1 min，再離心（9 500 r·min-1）3 min。吸取上清液0.3 mL 至另一試管中并加入0.7 mL 純水混合均勻，使用濾膜過濾后供超高效液相色譜-串聯質譜儀測定。

1.3.3 儀器條件

（1）色譜條件。色譜柱Waters ACQUITY UPLC BEH C18柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）， 流 動 相A 相為純水，B 相為乙腈。洗脫條件見表1，流速為0.30 mL·min-1，柱溫為35 ℃，進樣體積為10.0 μL。

表1 流動相梯度洗脫條件表

（2）質譜條件。離子源為電噴霧離子源；掃描方式：正離子掃描；檢測方式：多重反應監測模式，具體參數見表2。毛細管電壓為2.5 kV，離子源溫度為150 ℃，霧化氣溫度為500 ℃。

表2 多重反應監測條件表

2 結果與分析

2.1 方法學驗證

2.1.1 線性范圍

采用枇杷全果和果肉基質加標，外標法定量。在上述儀器條件下對標準基質工作溶液進樣檢測，當進樣濃度為0.000 5 ～0.500 0 mg·L-1時，MS 響應值（峰面積）與進樣濃度均呈良好線性關系（相關系數＞0.99）。

2.1.2 準確度與精密度

如表3 所示，嘧霉胺和多菌靈在枇杷全果和果肉中的添加濃度均為0.01 ～2.00 mg·kg-1。在枇杷果肉中，嘧霉胺回收率為92%～99%，多菌靈回收率為89%～101%；在枇杷全果中，嘧霉胺回收率為94% ～103%，多菌靈回收率為93% ～105%。嘧霉胺和多菌靈在枇杷果肉和全果中的添加濃度為0.01 ～2.00 mg·kg-1時，相對標準偏差最大為5.9%。在上述條件下，嘧霉胺和多菌靈在枇杷果肉、全果中的最小檢出量均為5.0×10-12g，最低檢出濃度均為0.01 mg·kg-1。

表3 平均回收率和相對標準偏差表

2.2 嘧霉胺在枇杷中的殘留降解及保鮮效果

如 表4 和 表5 所 示， 經1 000 倍 和1 500 倍稀釋嘧霉胺處理后，在枇杷全果中初始沉積量為0.82 ～1.23 mg·kg-1，之后隨時間延長而下降，浸藥后前7 d 嘧霉胺快速降解，之后進入緩慢降解過程，28 d時殘留量為0.22 ～0.48 mg·kg-1。常溫處理組全果中嘧霉胺半衰期為12 ～13 d，低溫處理組全果中嘧霉胺半衰期為18 ～19 d。

表4 400 g·L-1 嘧霉胺懸浮劑稀釋1 000 倍液在貯藏枇杷中的殘留量及保鮮效果表

表5 400 g·L-1 嘧霉胺懸浮劑稀釋1 500 倍液在貯藏枇杷中的殘留量及保鮮效果表

枇杷經1 500 倍嘧霉胺浸藥后，果肉中嘧霉胺含量始終低于0.05 mg·kg-1；0 ～14 d 果肉中嘧霉胺殘留量逐漸增加，之后緩慢下降，在用藥28 d 后，果肉中殘留量為0.028 ～0.037 mg·kg-1。嘧霉胺高濃度處理組比低濃度處理組保鮮效果更好。此外，低溫貯藏比常溫貯藏保鮮時間長一些，14 d 以內低溫貯藏的枇杷果實，好果率都在90%以上。

2.3 多菌靈在枇杷中的殘留降解及保鮮效果

經多菌靈1 000 倍液浸藥后，枇杷全果和果肉中多菌靈殘留如表6 所示。多菌靈在枇杷果肉中含量呈現先增后減的變化趨勢，浸藥后14 d 果肉中多菌靈達到峰值，隨后逐漸降低，28 d 時果肉中多菌靈含量為0.037 ～0.038 mg·kg-1。常溫處理組全果中多菌靈半衰期為34 d，低溫處理組全果中多菌靈半衰期為39 d。浸藥后的枇杷全果多菌靈含量處于較低含量水平，其最高含量小于0.3 mg·kg-1。以1 000 倍液的多菌靈溶液浸果處理的枇杷，全果中多菌靈殘留量較嘧霉胺低，但果肉中多菌靈含量與嘧霉胺含量接近，可能與多菌靈的內吸性強有關。多菌靈處理組好果率比嘧霉胺處理組低，這可能與病菌對多菌靈的耐藥性高有關。

表6 多菌靈稀釋1 000 倍液在貯藏枇杷中的殘留量及保鮮效果表

3 結論

本研究結果表明，嘧霉胺浸藥處理28 d 內的枇杷貯藏保鮮效果優于多菌靈，且使用后降解半衰期更短。殘留動態實驗表明，嘧霉胺在枇杷全果中的降解半衰期為12 ～19 d，多菌靈半衰期為34 ～39 d。各處理的枇杷果肉中殘留含量均呈先增后減趨勢，浸藥后約14 d 達到峰值后逐漸減少。實驗處理中，整個貯藏期殘留量均未超過目前我國GB 2763-2021 中規定的多菌靈和嘧霉胺在枇杷上的最大殘留限量值。