經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤組織中COX-2、fascin蛋白表達(dá)水平及其與預(yù)后的相關(guān)性

劉 冰 王 舒 楊 瑩

經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤(classical Hodgkin lymphoma,CHL)是最常見的淋巴瘤之一,與其他淋巴瘤實(shí)體相比,具有獨(dú)特的細(xì)胞組成,在CHL中,不到2%的細(xì)胞是霍奇金和里德·斯騰伯格(HRS)細(xì)胞,其余包括巨噬細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞和 T 細(xì)胞[1-2]。環(huán)氧合酶(COX)-2是一種誘導(dǎo)性酶,負(fù)責(zé)在炎癥和傷口愈合部位產(chǎn)生前列腺素[3]。COX-2在多種人類癌癥中高度表達(dá),例如乳腺癌、卵巢癌、結(jié)直腸癌[4]。Fascin是一種肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白,由FSCN1編碼基因(位于 7 號(hào)染色體上),其表達(dá)與腫瘤生長(zhǎng)、遷移、侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)[5-6]。本研究旨在研究COX-2、fascin在CHL組織中的表達(dá),并探討其評(píng)估CHL預(yù)后的價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2016年5月至2018年5月本院收治CHL患者50例,年齡7～72歲,平均(24.54±5.13)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):①根據(jù)2008版世界衛(wèi)生組織(WHO)淋巴造血系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)[7],經(jīng)病理及免疫組化確診為CHL;②患者簽署自愿受試同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):①精神疾病患者;②合并其他惡性腫瘤患者;③合并其他器官嚴(yán)重性病變患者。

1.2 免疫組化分析COX-2、fascin水平

用免疫組織化學(xué)檢測(cè)COX-2、fascin表達(dá),以鼠抗人COX-2、fascin單克隆抗體為一抗,用已知陽(yáng)性切片作陽(yáng)性對(duì)照,PBS代替一抗作陰性對(duì)照,用蘇木精復(fù)染細(xì)胞核,參考標(biāo)準(zhǔn),COX-2、fascin陽(yáng)性產(chǎn)物均位于細(xì)胞核,視野中出現(xiàn)粗細(xì)一致的棕黃色為陽(yáng)性染色,無(wú)棕色反應(yīng)為陰性染色。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞占全部細(xì)胞數(shù)的百分?jǐn)?shù)對(duì)其進(jìn)行判斷,陰性為陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<10%;陽(yáng)性為陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)>10%。

1.3 隨訪

隨訪時(shí)間指從確診為CHL至死亡或隨訪截止的時(shí)間,隨訪截止時(shí)間為2021年8月1日,50例患者均采用電話隨訪。總生存(OS)時(shí)間從疾病確診計(jì)算至任何原因引起的死亡、失訪或隨訪結(jié)束。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 CHL患者臨床病理特征

50例CHL患者中男性29例,患者年齡≥45歲有8例。參照WHO 2008版淋巴瘤分類標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分類:AnnArbor分期Ⅰ～Ⅱ期者22例(44%),Ⅲ～Ⅳ期者28例(56%)。國(guó)際預(yù)后指數(shù)(IPI)評(píng)分1～2分者43例(86%),3～5分者7例(14%)。根據(jù)B癥狀(發(fā)熱、盜汗、6個(gè)月內(nèi)體重減輕>10%)診斷標(biāo)準(zhǔn),有B癥狀的患者共13例(26%)。血清乳酸脫氫酶(LDH)超過(guò)正常值高限(240 U/l)者15例(30%)。全部患者標(biāo)本均進(jìn)行了EBER原位雜交檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果顯示EBV陽(yáng)性率為40%(20/50)。

2.2 CHL患者COX-2、fascin表達(dá)與臨床特征的相關(guān)性

COX-2陽(yáng)性表達(dá)者42例(84%),fascin陽(yáng)性表達(dá)者44例(88%)。將患者的臨床特征分別與COX-2、fascin表達(dá)進(jìn)行分析比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表1。

表1 COX-2、fascin表達(dá)與CHL患者臨床特征的相關(guān)性分析/例

2.3 CHL患者COX-2、fascin表達(dá)與3年總生存率的關(guān)系

50例CHL患者中,截止到隨訪結(jié)束有19例死亡患者,3年OS率為62%。COX-2、fascin陽(yáng)性表達(dá)患者的OS率明顯低于陰性患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表2。

表2 CHL患者COX-2、fascin表達(dá)與3年總生存率的關(guān)系/例

2.4 CHL患者3年總生存的多因素分析

多因素分析結(jié)果顯示,COX-2陽(yáng)性、fascin陽(yáng)性是影響CHL患者3年OS預(yù)后獨(dú)立影響因素(P<0.05),見表3。

表3 CHL患者3年總生存的多因素分析

3 討論

CHL占所有淋巴瘤的15%～25%,是西方世界兒童和年輕人中最常見的淋巴瘤亞型[8]。在淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤中,CHL具有顯著的組織形態(tài)學(xué)外觀、惡性細(xì)胞的特殊表型特征以及大量主要免疫細(xì)胞浸潤(rùn)等特征[9]。CHL的病理診斷需要存在特征性的腫瘤細(xì)胞,稱為霍奇金和里德-斯騰伯格(HRS)細(xì)胞,其數(shù)量超過(guò)腫瘤微環(huán)境(TME)中的反應(yīng)細(xì)胞,包括T和B淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞、漿細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞[10]。大多數(shù)局限期或晚期CHL患者可以通過(guò)化療治愈;然而,5%～10%的患者會(huì)出現(xiàn)一線治療難治的疾病,10%～30%的患者會(huì)復(fù)發(fā)[11]。

Fascin是一種肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白,可促進(jìn)不同模式的細(xì)胞遷移,包括在胚胎發(fā)育和癌癥轉(zhuǎn)移期間[12]。Fascin促進(jìn)遷移的一種方式是將肌動(dòng)蛋白絲交聯(lián)或捆綁在一起[13]。Fascin有助于形成許多富含肌動(dòng)蛋白的遷移結(jié)構(gòu),如絲狀偽足、片狀偽足、應(yīng)力纖維和微刺[14]。Fascin也定位于富含肌動(dòng)蛋白的粘附結(jié)構(gòu)[15]。由于其在細(xì)胞遷移中的作用,Fascin在成人上皮組織中不存在,但在許多類型的癌組織中高度表達(dá)[16]。Fascin的高表達(dá)與預(yù)后不良和轉(zhuǎn)移增加有關(guān)[17]。因此,Fascin是一種預(yù)后生物標(biāo)志物和轉(zhuǎn)移性癌的潛在治療靶點(diǎn)。COX-2,也稱為前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合酶-2,在多種細(xì)胞中表達(dá),尤其是炎癥細(xì)胞。在靜止細(xì)胞狀態(tài)下,COX-2的表達(dá)被限制在非常低的水平,在蛋白質(zhì)印跡上幾乎檢測(cè)不到。在用細(xì)胞因子、脂多糖(LPS)、生長(zhǎng)和促有絲分裂因子進(jìn)行細(xì)胞刺激后,COX-2的表達(dá)激增[18-19]。環(huán)氧合酶催化花生四烯酸轉(zhuǎn)化為前列腺素和血栓素,并以兩種同工型Cox-1和Cox-2存在[20]。COX-2的持續(xù)過(guò)表達(dá)在介導(dǎo)炎性組織損傷和癌癥生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移方面起著重要作用[21]。Cox2通過(guò)合成前列腺素E2調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、細(xì)胞粘附、抑制細(xì)胞凋亡、免疫監(jiān)視和血管生成[22]。雖然COX-2已經(jīng)被報(bào)道參與致癌作用,但很少有研究報(bào)告HL和Cox-2的表達(dá)之間的關(guān)聯(lián)[23]。本研究中50例CHL患者中,截止到隨訪結(jié)束有19例死亡患者,3年OS率為62%。COX-2、fascin表達(dá)陽(yáng)性的OS率明顯低于陰性組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。多因素分析結(jié)果顯示,COX-2陽(yáng)性、fascin陽(yáng)性是影響CHL患者3年OS預(yù)后獨(dú)立影響因素。但是本研究存在局限性,樣本量少以及選取中心單一,對(duì)結(jié)果可能會(huì)產(chǎn)生偏移,因此未來(lái)需要更具前瞻性的全面研究來(lái)證實(shí)此結(jié)果。

綜上所述, COX-2、fascin蛋白表達(dá)均與CHL患者的預(yù)后相關(guān),對(duì)CHL患者的預(yù)后具有一定判斷作用。