乳腺癌手術切除患者放療前后外周血單個核細胞中Survivin、OTUD3 mRNA變化及與預后的關系

張 蕾 趙 嬋 王海蕊 張曉霞

乳腺癌是指發(fā)生在乳腺的良性或惡性腫瘤,根據(jù)其發(fā)病情況可分為早、中、晚三個階段[1]。早期乳腺癌癥狀體現(xiàn)為患側乳房出現(xiàn)無痛、單發(fā)的小腫塊;中期癥狀體現(xiàn)為鄰近乳頭或乳暈的癌腫因侵入乳管使之縮短,可把乳頭牽向癌腫一側,進而可使乳頭扁平、回縮、凹陷;晚期乳房因腫塊的浸潤、收縮而變形[2],可使上臂淋巴回流障礙而引起上肢水腫。乳腺癌通常高發(fā)于40～60歲的女性群體,男性患者較為少見[3]。乳腺良性腫瘤患者一般通過手術治療,惡性腫瘤患者早期首選手術治療,中晚期患者手術加藥物或放療、化療等綜合治療[4]。有研究發(fā)現(xiàn)對于癌細胞與機體生物指標之間的關系的研究可以幫助癌癥患者建立個體化治療,對提高放化療療效和疾病預后有著重大影響[5]。Survivin和OTUD3分別屬于凋亡抑制因子和去泛素化酶中的一種,與癌細胞之間存在著密切聯(lián)系,為明確兩者表達情況與疾病的預后關系,特選取79例乳腺癌患者作為觀察對象,具體研究報告內(nèi)容如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取我院2019年1月至2021年1月收錄的79例乳腺癌并行擴大根治術的患者作為觀察組,另選取同期健康體檢志愿者55例作為對照組。納入標準:①觀察組患者經(jīng)檢查均符合乳腺癌診斷標準[6];②無術前癌細胞遠處轉移;③無家族遺傳性精神疾病者;④年齡20～65歲。排除標準:①合并有神經(jīng)系統(tǒng)疾病者;②合并有心臟、腎臟等功能性疾病者;③合并有免疫系統(tǒng)疾病者;④男性患者。觀察組79例,年齡20～65(42.63±1.22)歲,病程1～6(3.14±0.65)年。對照組納入標準:①X光照射檢查結果正常;②核磁共振檢查結果正常。對照組55例,年齡18～57(41.14±1.06)歲。2組研究對象一般資料對比無統(tǒng)計學意義(P>0.05)

1.2 方法

1.2.1 放射治療 采用6 MV的電子線對患者胸壁上區(qū)進行照射治療,使用9 MV的電子線在鎖骨上區(qū)照射治療,均行18次照射治療,照射治療結束后在患者胸壁處使用0.5組織等效膜,2 Gy/次,5次/周,總量50 Gy,以21天為1個完整療程,共進行3個療程的治療。

1.2.2 外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況檢測 收集對照組和觀察組患者放療前后外周靜脈血3 mL進行低溫冷凍保存,淋巴細胞分離液對單個核細胞進行分析,按照50∶1的比例加入Trizol試劑,并按照標準步驟提取RNA,提取出的RNA用100%的去離子甲酰胺溶解,-70 ℃環(huán)境下保存,對RNA進行逆錄轉并且進行PCR擴增,最后使用2-ΔΔct計算出Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達量。所有RNA提取試劑盒、PCR試劑盒均從武漢默沙克生物科技有限公司采購。

1.3 觀察指標

(1)2組人員外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況對比,觀察組包括放療前后;(2)觀察組人員的一般資料和病理特征與Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況的關系,包括年齡、腫瘤大小、腫瘤分期、腫瘤分化程度和淋巴結轉移情況等;(3)觀察組放療前后Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況與病理特征的相關關系;(4)Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對放療的預后價值評估。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 2組人員外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況對比

觀察組放療前后外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達量均高于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);觀察組放療后外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA低于放療前,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。如表1。

2.2 觀察組人員的一般資料和病理特征與Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況的關系

表1 2組人員外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況對比

放療前后外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達與年齡、腫瘤大小無關(P>0.05),與腫瘤分期、腫瘤分化和淋巴結轉移情況有關(P<0.05)。如表2。

表2 觀察組人員的一般資料和病理特征與Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況的關系

2.3 觀察組放療前后Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況與病理特征的相關關系

放療前后外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達量與腫瘤分期都呈現(xiàn)顯著正相關關系(γ=0.622,γ=0.684,γ=0.705,γ=0.714;P<0.001);與腫瘤分化呈現(xiàn)顯著負相關關系(γ=-0.548,γ=-0.629,γ=-0.574,γ=-0.596;P<0.001);與淋巴結轉移呈現(xiàn)顯著正相關關系(γ=0.685,γ=0.711γ=0.697γ=0.688;P<0.001)。如表3。

表3 觀察組放療前后Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況與病理特征的相關關系

2.4 Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對放療的預后價值評估

根據(jù)ROC 曲線獲得,最佳界限以Survivin-mRNA(1.67)、OTUD3-mRNA(0.49)可獲得ROC 曲線下最大面積,表明乳腺癌術后放療與Survivin-mRNA、OTUD3-mRNA密切相關,且兩項聯(lián)合檢測的敏感度(81.0%)、特異度(83.6%)均高于單項檢測(P<0.05),見圖1,表4。

圖1 ROC曲線圖

3 討論

流行病學研究顯示,乳腺癌在全球女性癌癥中的發(fā)病率為24.2%,位居首位,其中52.9%發(fā)生在發(fā)展中國家[7]。在我國,每年有30余萬女性被診斷出乳腺癌。在東部沿海和經(jīng)濟發(fā)達地區(qū),發(fā)病率尤其上升[8]。從發(fā)病年齡看,我國乳腺癌發(fā)病率從20歲以后逐漸上升,40～50歲達到高值。隨著新的治療方法普及,全球乳腺癌死亡率逐步下降。然而在我國,特別是廣大農(nóng)村地區(qū),乳腺癌死亡率下降趨勢并不明顯[9]。近年來對于乳腺癌患者進行個體化治療,預測早期療效和預后效果的研究已經(jīng)成為癌癥治療的熱門話題[10]。放射治療在乳腺癌的術后治療方面占有重要地位,因此如果能夠?qū)Ψ派渲委煹寞熜Ш皖A后進行一定程度上的評估和預測,將對臨床癌癥治療方面起著重大影響[11]。目前來說,常用的形態(tài)影像學預測效果并不理想,而對于生物標志物方面的研究似乎可以作為新的方向,因此找到能夠預測評估癌癥術后放療和預后效果的生物標志物已成為目前研究的重要研究方向[12]。

表4 Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對放療的預后價值評估

本次研究結果顯示乳腺癌患者放療前后外周血單個核細胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達量均高于正常人體細胞的表達量,且放療后的表達量比放療前有著明顯降低,這提示Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達情況與乳腺癌的疾病以及放療存在著密切關系。Survivin屬于20世紀初發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制蛋白中新的一員[13]。凋亡抑制蛋白可通過BIR 結構域直接與Caspase 的IBM 結合,抑制Caspase3/7/9 的催化活性,阻斷細胞凋亡進程,同時在人體細胞漿、細胞核和染色體上也有表達,Survivin就屬于定位于細胞核上的一種[14-16]。國外學者研究[17]表明,凋亡抑制蛋白介導的凋亡抑制可能是腫瘤細胞產(chǎn)生耐藥性的原因之一,是調(diào)控腫瘤細胞凋亡和對化療藥物敏感性的關鍵分子,有可能發(fā)展為逆轉腫瘤細胞耐藥、提高療效的新靶點[18]。而OTUD3則是屬于去泛素化酶OTUDs家族中的一種,OTUD3的底物PTEN能夠與OTUD3之間直接進行相互作用,通過阻斷P13/Akt的信號通路來抑制癌細胞的發(fā)展進程并起到抑癌基因的作用。有研究[19]表明,OTUD3參與各種癌癥發(fā)展進程。本研究結果顯示放療前后外周血單個核細胞Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達量與腫瘤分期和淋巴結轉移都呈現(xiàn)顯著正相關關系,而與腫瘤分化程度則是呈現(xiàn)負相關關系,與歷史研究資料的結果相一致[20]。對Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對放療的預后價值評估的研究結果顯示兩者AUC均大于0.7,提示Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對于乳腺癌患者術后放療短期預后都存在著一定評估價值。

綜上,對乳腺癌患者術后體內(nèi)Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達情況進行監(jiān)測對術后放療短期預后都存在著一定評估價值。因此Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA也許能夠作為評估癌癥術后放療預后的重要生物指標,具有重要臨床價值。