皮膚鱗狀細胞癌患者中STAT3、NF-κB p65表達及與其分化程度的關系研究

高明敏 于 偉 肖 輝

皮膚鱗狀細胞癌(cSCC)多發生在顏面、下唇、耳部、手背等曝光部位皮膚,臨床多采用放療、化療、手術等方式治療,但常出現耐藥、復發情況,影響患者身心健康[1-2]。cSCC發生、進展是多種因素、多步驟共同作用結果,近來年,對癌細胞增殖分裂的調控失常、癌基因激活、抑癌基因失活、癌細胞凋亡逐漸成為臨床研究的熱點[3]。信號傳導與轉錄活化因子3(STAT3)是STAT家族的重要成員之一,被胞外細胞因子、生長因子等多肽類配體激活,是多個致癌性絡氨酸激酶的信號通道交匯點,在免疫反應、皮膚重建等生理發過程中發揮重要作用[4]。核因子-κB(NF-κB)p65是一種具有抑制細胞凋亡、促進腫瘤細胞增殖的轉錄因子,在腫瘤發生、進展中起到重要作用[5]。但STAT3、NF-κB p65表達與cSCC分化程度是否存在關系,臨床研究較少。本研究分析cSCC患者STAT3、NF-κB p65表達與分化程度的關系,為臨床診治提供新的思路。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2021年10月在我院行手術治療的58例cSCC患者,取手術切除cSCC組織標本作為研究組,距離腫瘤邊緣5 cm以上的正常皮膚組織為對照組。納入標準:符合第2版《皮膚病學》[6]中cSCC診斷標準,經手術病理檢查證實;病歷資料完整。排除標準:術前接受放化療治療者;合并其他惡性腫瘤者;合并嚴重的心肺功能、肝腎功能異常者;血液系統疾病;妊娠期或哺乳期女性。58例患者中男性33例,女性25例;年齡31～79歲,平均(60.32±4.16)歲;腫瘤分期:Ⅰ～Ⅱ期35例,Ⅲ～Ⅳ期23例;分化程度:低分化14例,中高分化44例。

1.2 方法

應用10%中性甲醛固定標本,取材后,實施脫水、透明、石蠟包埋等處理,完成后切成厚度為3 μm的小片,行5 min的蘇木精浸染,自來水沖洗1 min,分化3 s(1%鹽酸酒精),無水酒精分化3 s,自來水沖洗30 min,0.5%伊紅酒精浸染1 min,無水酒精脫水3 s,二甲苯透明10 min,完成后用蓋玻片封閉,實施免疫組分化法檢測。每張切片在400倍高倍鏡下隨機選取10個非重疊視野,觀察細胞染色強度和陽性細胞百分率。NF-κB p65蛋白表達于細胞核或/和細胞質內,STAT3主要表達于細胞質內,少量存在于細胞核內,陽性細胞均呈棕黃色顆粒。(1)細胞著色強度:0分:不著色;1分:黃色;2分:棕黃色;3分:黃褐色。(2)陽性細胞百分比:0分:陽性細胞<6%;1分:6%～25%;2分:26%～51%;3分:51%～74%;4分:≥750%。用細胞著色強度和陽性細胞百分比得分乘積判斷結果,0～2分為陰性(-);3～5分為弱陽性(+);6～8分為中陽性(++);9～12分為強陽性(+++)。

1.3 觀察指標

比較兩組STAT3、NF-κB p65陽性表達情況;分析STAT3、NF-κB p65陽性表達與cSCC臨床病理特征關系,其包含年齡、分化程度、性別、臨床分期、腫瘤直徑、淋巴結轉移等。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 STAT3、NF-κB p65陽性表達

研究組STAT3、NF-κB p65陽性表達率較對照組高,差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組STAT3、NF-κB p65陽性表達情況比較(例,%)

2.2 STAT3、NF-κB p65陽性表達與cSCC臨床病理特征的關系

有淋巴結轉移者STAT3、NF-κB p65陽性表達率高于無淋巴結轉移者,Ⅲ～Ⅳ期STAT3、NF-κB p65陽性表達率高于Ⅰ～Ⅱ期者,且分化程度越低者STAT3、NF-κB p65陽性表達率越高,且腫瘤最大直徑≥4 cm者STAT3、NF-κB p65陽性表達率高于<4 cm者,差異有統計學意義(P<0.05);STAT3、NF-κB p65陽性表達率與cSCC患者年齡、性別無關(P>0.05),見表2。STAT3、NF-κB p65陽性表達率與腫瘤最大直徑、臨床分期呈負相關(P<0.05),與分化程度、淋巴結轉移呈正相關(P<0.05),見表3。

3 討論

cSCC具體發病原因尚不十分清楚,可能與電離輻射、化學致癌物刺激、日常暴曬、紫外線照射、遺傳等因素有關,該病易患者忽視,隨著病情進展會促使腫瘤轉移、惡化,甚至威脅生命安全[7]。故,早期診治對cSCC至關重要。

表2 STAT3、NF-κB p65陽性表達與cSCC臨床病理特征的關系(例,%)

表3 兩組STAT3、NF-κB p65陽性表達與cSCC臨床病理特征的相關性分析

NF-κB 屬于多向性、多功能的核轉錄因子,可特異性結合重鏈基因增強子序列、免疫球蛋白k鏈,并可調控多種基因表達,與細胞凋亡、血管生成具有重要調控作用[8]。STAT3可調控相關基因轉錄,促使細胞惡性轉化、異常增殖,與腫瘤的發生、進展關系密切[9]。本研究中,研究組STAT3、NF-κB p65陽性表達率較對照組高;有淋巴轉移者STAT3、NF-κB p65陽性表達率高于無淋巴轉移者,Ⅲ～Ⅳ期STAT3、NF-κB p65陽性表達率高于Ⅰ～Ⅱ期者,且分化程度越低者STAT3、NF-κB p65陽性表達率越高,且腫瘤最大直徑≥4 cm者STAT3、NF-κB p65陽性表達率高于<4 cm者;STAT3、NF-κB p65陽性表達率與腫瘤最大直徑、臨床分期呈負相關,與分化程度、淋巴結轉移呈正相關,可見STAT3、NF-κB p65陽性表達率患者cSCC發生、進展密切相關。NF-κB p65是常見的NF-κB類型,蛋白酶激活物、病毒、電離輻射、細胞因子等多種刺激因子均可激活NF-κB ,活化后可經細胞質進入細胞核,在結合靶基因的基因序列上的NF-κB 結合位點,促進靶基因轉錄和靶蛋白合成,增強部分炎性因子和細胞因子的轉錄活性,加速腫瘤發生、侵襲、增殖[10]。當IL-1、腫瘤壞死因子等物質刺激NF-κB結合位點時,其移植物IκB會發生磷酸化而解離,激活NF-κB二聚體,使其進入細胞核內,刺激相關基因表達,同時可調控與血管生成、細胞生長增殖、抗凋亡和轉移的相關基因表達,促進cSCC疾病進展[11]。當STAT3受到VEGF等細胞因子信號刺激時,VEGF結合其受體后會形成二聚體,激活兩面神激酶(JAK),促使STAT3酪氨酸基團被磷酸化,形成異源或同源二聚體,并轉位入核,對其MMP-2/9、cyclin D1、BCL-2等下游靶基因轉錄進行調控,促使腫瘤細胞診治、侵襲轉移、血管形成和免疫逃逸[12]。STAT3能夠抑制p53表達,抑制p53途徑依賴性低氧誘導因子HIFI-α降解,上調HIFI-α作用的靶分子VEGF表達,促進腫瘤新生血管形成,促進疾病進展。

綜上所述,STAT3、NF-κB p65在cSCC中呈高表達,其陽性表達率與腫瘤發生、進展密切相關,可作為判斷患者病情和治療的新靶點。